Imagerie par tomographie par cohérence optique pour l’évaluation de l’uvéite dans un modèle murin

Résumé

Source : John, S., et al. Uvéite mycobactérienne amorcée (UPM) comme modèle d’uvéite post-infectieuse. J. Vis. Exp. (2021)

Cette vidéo présente une technique d’imagerie in vivo pour détecter et quantifier l’inflammation oculaire dans un modèle murin d’uvéite post-infectieuse. Cette technique, connue sous le nom de tomographie par cohérence optique (OCT), génère des images en coupe transversale à haute résolution de l’œil pour évaluer la progression de la maladie.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Préparation d’antigène pour injection sous-cutanée

1. Effectuer toutes les procédures décrites dans cette section à l’intérieur d’une hotte chimique pour éviter l’inhalation ou le contact cutané avec la poudre de Mycobacterium tuberculosis (Mtb) H37Ra. Traitez conformément aux politiques de votre établissement l'adjuvant de Freund complet (généralement BSL-1). Cela comprend l’utilisation de gants résistant aux produits chimiques, de l....

Résultats

Figure 1 : Configuration de l’injection intravitréenne chez la souris. L’injection intravitréenne est effectuée sur l’œil de la souris à l’aide (A) d’un contrôleur de micro-pousse-seringue connecté à (B) la Micropompe et (C) d’une seringue d’injection. La seringue est chargée et montée sur la micropompe (D). La tête de la sour.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
AK-FLUOR	Akorn Pharmaceuticals, IL, États-Unis		10 % de fluorescéine sodique 100 mg/mL dans un flacon de 5 mL
AnaSed	Akorn Animal Health, IL, États-Unis	NDC 59399-110-20	Xylazine 20 mg/mL
Bétadine 5 % Solution de préparation ophtalmique stérile	Alcon, Texas, États-Unis	Référence 8007-1
Aiguilles de glissement de précision B-D -25 g	Becton, Dickinson and Company, NJ, États-Unis	305122
Aiguille B-D Precision Glide -30-G	Becton, Dickinson and Company, NJ, États-Unis	305106
Bond MAX, Bond Rx	Leica Biosystems, IL, États-Unis		Système de coloration IHC automatisé
Pommade au chloramphénicol	Martindale Pharma, Romford, Royaume-Uni		1 % p/p de chloramphénicol
EG1150H	Leica Biosystems, IL, États-Unis		Enrobage tissulaire
Envisu R2300	Bioptigen/Leica		Machine OCT
Adjuvant incomplet de Freund	BD Difco, NJ, États-Unis	Référence 263910
Pommade oculaire lubrifiante GenTeal	Alcon, Texas, États-Unis	---
Gel lubrifiant pour les yeux GenTeal	Alcon, Texas, États-Unis	---
Extrait de mycobactéries lyophilisées H37Ra	BD Difco, NJ, États-Unis	231141
Aiguille RN de Hamilton (33/12/2)S	Hamilton, Reno, NV	7803-05(33/12/2)	33 grammes
Seringue Hamilton	Hamilton, Reno, NV	CAL7633-01	5 μL
Aiguille à insuline	Exel International, États-Unis	Référence 26029	1 mL
L’isoflurane
Ketaset	Zoetis, États-Unis	377341	Kétamine HCL 100 mg/mL
Pompe à seringue de micro-injection et Micro4Controller	World Precision Instruments, Floride, États-Unis	UMP3
Micron IV	Laboratoires de recherche Phoenix, Pleasanton, Californie		Appareil d’imagerie/OCT alternatif
Seringue Nanofil 10 μL	World Precision Instruments, Floride, États-Unis	NANOFIL
Kit d’injection intraoculaire Nanofil	World Precision Instruments, Floride, États-Unis	IO-KIT
Olympus SZX10	Olympe		Portée de la dissection
Pbs	Gibco	Référence 14190
Chlorhydrate de phényléphrine Solution ophtalmique USP 2,5 % stérile 15 mL	Akorn Pharmaceuticals, IL, États-Unis	17478020115
RM2255	Leica Biosystems, IL, États-Unis		Section tissulaire
Seringue antituberculeuse	Becton, Dickinson and Company, NJ, États-Unis	309602	1 mL
Tétracaïne 0,5 %	Alcon, Texas, États-Unis	1041544
Série VIP Tissue Tek	Sakura Finetek États-Unis, Inc., CA.		Traitement histologique des tissus
Tropicamide 1 %	Chauvin Pharmaceuticals, Romford, Royaume-Uni		Minimes
Tylenol	Johnson & Johnson Consumer Inc, Pennsylvanie, États-Unis	NDC 50580-614-01	acétaminophène
Viscodéchirures	Novartis Pharmaceuticals, Camberley, Royaume-Uni		Gel pour les yeux au carbomère 0,2 % p/p