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Imagerie de phase quantitative tridimensionnelle pour la caractérisation des sous-types de lymphocytes

July 8th, 2025

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Abstract

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Source : Yoon, J. et al. Identification sans marquage des sous-types de lymphocytes à l’aide de l’imagerie de phase quantitative tridimensionnelle et de l’apprentissage automatique. J. Vis. Exp.(2018)

Cette vidéo démontre l’identification sans marquage de la morphologie et de la biochimie des lymphocytes grâce à l’imagerie de phase quantitative 3D. Cette technique permet une analyse approfondie des lymphocytes, en découvrant leurs structures et propriétés internes sans avoir besoin de procédures de marquage.

Protocol

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1. Cytométrie en flux et tri des sous-types de lymphocytes

REMARQUE : Le tri des lymphocytes en fonction du type de cellule est essentiel pour établir les étiquettes de type cellulaire de vérité terrain (c’est-à-dire correctes) pour entraîner et tester un classificateur de type cellulaire dans l’apprentissage supervisé. La cytométrie en flux, une méthode de référence, est utilisée pour identifier et séparer les lymphocytes.

  1. Fabriquer un mélange d’anticorps marqueurs de surface dans 100 μL de milieu RPMI-1640 frais [avec 10 % de FBS, 0,1 μg de CD3e (17A2), CD8a (53-6,7), CD19 (1D3), CD45R (B220, RA3-6B2)....

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Disclosures

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Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Cytométrie en fluxBD BiosciencesAria II ou III
Chambre d’imagerieTomocube, Inc.TomoDish
HolotomographieTomocube, IncHT-1H
Logiciel d’imagerie par holotomographieTomocube, Inc.TomoStudio
Logiciel de traitement d’imagesMathWorksMatlab R2017b
Tube à centrifuger conique FalconThermoFisher ScientificRéférence 14-959-53A15 ml
Saline tamponnée au phosphateSigma-AldrichRéférence 806544-500ML
Tampon de lyse d’ammonium-chlorure-potassiumThermoFisher ScientificA1049201
RPMI-1640 moyenSigma-AldrichR8758
Sérum fœtal bovinThermoFisher Scientific10438018

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Three Dimensional Quantitative Phase ImagingLymphocyte SubtypesRefractive Index TomogramDigital Micromirror DeviceDiffraction Tomography AlgorithmHologram ReconstructionLabel Free ImagingCell Morphology AnalysisBiochemical CharacterizationLymphocyte Imaging

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