Method Article

Construire un modèle de souris humanisé avec une immunité artificielle contre le VIH

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Source : Zhen, A., et al. Immunité artificielle à base de cellules souches contre l’infection par le VIH dans le modèle murin humanisé. J. Vis. Exp. (2016).

La vidéo présente une technique permettant de générer un modèle de souris humanisée avec une immunité artificielle à base de cellules souches contre le virus de l’immunodéficience humaine (VIH). Du tissu thymus fœtal humain et des cellules souches hématopoïétiques (CSH) modifiées sont implantés dans la capsule rénale d’une souris gravement immunodéprimée. Les CSH, qui expriment des récepteurs antigéniques chimériques (CAR) contre le VIH, sont mélangées dans un mélange de protéines gélatineuses qui favorise leur co-localisation avec le tissu du thymus. Après l’intervention, les CSH se différencient en diverses cellules immunitaires humaines, ce qui a entraîné le développement d’un modèle de souris humanisé doté d’un système immunitaire humain fonctionnel contre le VIH.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Toutes les procédures impliquant le prélèvement d'échantillons ont été effectuées conformément aux directives de l'IRB de l'institut. Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Construction de souris humanisées conçues avec un récepteur antigénique chimérique CD4

  1. Traitement du thymus fœtal et isolement des CSH CD34+ du foie fœtal
    1. Traitement du thymus
      1. Lavez délicatement le thymus dans une solution saline ta....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Kit de microbilles CD34MiltenyiTél. : 130-046-702Pour le tri des cellules progénitrices CD34+ humaines
BambankerWakoRéférence 302-14681pour cellules de congélation
QIAamp Kit d’ARN viralQiagenRéférence 52904Pour mesurer la charge virale dans le sérum
Cytomètre en flux MACSQuantMiltenyiPour l’analyse de flux
BD LSRFortessa™BD biosciencesPour l’analyse de flux
HyaluronidasesigmaRéf. H6254-500MGPour la digestion des tissus
Désoxyribonucléase IWorthingtonLS002006pour la digestion des tissus
CollagènaseTechnologie de la vieRéférence 17104-019pour la digestion des tissus
Système de détection PCR en temps réel CFXBioradPour mesurer la charge virale et l’expression des gènes
Souris, souche NOD. cg-prkdcscid il2rgtm1Wjl/szJLe Laboratoire JacksonRéférence 5557Pour la construction des souris humanisées
Pénicilline Streptomycine (Pen Strep)Thermo Fisher Scientific10378016Pour la culture de cellules
pipéracilline/tazobactamPfizerZosynAntifongique
Amphotéricine B (Fungizone antimycosique)Thermo Fisher ScientificRéférence 15290-018Antifongique
AUTOCLIP Pinces de bobinage, 9 mm - 1000 unitésBecton Dickinson427631Pour la chirurgie
Blouses chirurgicales stériles Poly-Renforcées Aurora, 30 par caisseMedlineDYNJP2707Pour la chirurgie
Sutures, 4-0, vicrylOwens et MinorRéférence 23000J304HPour la chirurgie
Tampons de préparation à l’alcoolOwens et Minor3583006818Pour la chirurgie
Gants, chirurgicaux, 6 1/2Owens et Minor4075711102Pour la chirurgie
Milieu cellulaire T sans sérum d'YsselProduits Gemini Bio400 à 102Pour la transduction des cellules CD34+
Albumine sérique humaineSigma-AldrichN° A9511Pour la transduction des cellules CD34+

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Humanized Mouse ModelEngineered ImmunityHIV InfectionHematopoietic Stem CellsChimeric Antigen ReceptorsFetal Thymus TissueRetro orbital InjectionKidney Capsule ImplantationGelatinous Protein MatrixHuman Immune System

Related Articles