Immunothérapie

Cette vidéo illustre une méthode permettant d’isoler des lymphocytes T tueurs naturels invariants, également connus sous le nom de cellules iNKT. La procédure commence par l’injection d’un glycolipide synthétique dans une souris pour stimuler l’activation et la prolifération des cellules iNKT dans la rate. Par la suite, des suspensions unicellulaires sont préparées à partir de la rate et incubées avec des complexes de reconnaissance des cellules iNKT marqués avec des fluorophores, suivis d’une...

Cette vidéo présente une technique de fabrication ex vivo de lymphocytes T à récepteur antigénique chimérique (CAR). Les lymphocytes T humains sont incubés avec des billes magnétiques recouvertes d’anticorps anti-CD3 et anti-CD28, ainsi qu’un milieu complété par l’interleukine-2 (IL-2), conduisant à l’activation et à la prolifération des lymphocytes T. Des vecteurs lentiviraux transgéniques sont introduits, ce qui permet à l’ARN transgénique de s’intégrer dans le génome de l’hôte et d’exprimer...

Cette vidéo présente un test de transduction virale médiée par un polymère cationique dans des cellules tueuses naturelles (NK). Les cellules sont incubées avec des vecteurs de lentivirus transgéniques codant pour une protéine fluorescente. L’ajout d’un polymère cationique permet au virus de se fixer aux cellules et d’intégrer son ARN dans le génome de l’hôte, exprimant la protéine fluorescente. La fluorescence est quantifiée pour évaluer l’amélioration de la transduction induite par les...

Cette vidéo montre le processus de transfection de macrophages primaires avec un ARNm modifié codant pour une protéine fluorescente verte. Ces ARNm modifiés, conçus pour réduire l’immunogénicité et améliorer sa stabilité, assurent la transfection réussie et l’expression ultérieure des protéines fluorescentes vertes, ce qui est confirmé par la microscopie à fluorescence.

Cette vidéo présente une technique permettant d’extraire sélectivement des cellules spécifiques d’une culture cellulaire 3D mixte par photoimmunothérapie dans le proche infrarouge. Dans cette méthode, les cellules ciblées sont identifiées avec précision à l’aide d’un anticorps conjugué à un photoabsorbeur NIR. L’irradiation ultérieure à la lumière infrarouge induit la mort cellulaire, éliminant efficacement les cellules ciblées de la culture 3D.

Cette vidéo montre une technique basée sur un petit ARN interférent (siRNA) pour interférer avec le flux autophagique. Un siRNA ciblant l’ARNm FIP200 est introduit dans des cellules dendritiques immatures (iDC) dérivées de monocytes par électroporation, provoquant l’inhibition de l’expression de FIP200 et conduisant à l’inhibition de la rupture de la lamine nucléaire par autophagie. Lors de l’ajout du virus de l’herpès simplex (HSV), la sortie nucléaire de la descendance virale est inhibée en...

La vidéo présente un test utilisant des cellules T CD8+ dérivées de cellules souches pluripotentes induites humaines (iPSC) pour inhiber la réplication du virus de l’hépatite B (VHB) chez la souris. Ces lymphocytes T, conçus avec des récepteurs spécifiques du VHB, sont transférés dans des souris transgéniques. Les plasmides du génome du VHB capables de réplication sont ensuite injectés directement dans le foie, ce qui permet l’absorption de l’ADN viral. Une fois que les antigènes viraux sont...

Cette vidéo présente une technique de génération ex vivo de lymphocytes T à récepteur antigénique chimérique (CAR) spécifique de l’antigène tumoral. Des vecteurs rétroviraux porteurs d’ARN transgénique sont mélangés à des cellules de la rate dans un milieu complété par de l’interleukine-2 pour favoriser la survie et la prolifération des lymphocytes T. Le mélange est ensuite transféré sur une plaque recouverte de fragments de fibronectine humaine recombinante et centrifugée pour faciliter la...

La vidéo décrit un processus de création de cellules CAR-T génétiquement modifiées par le biais du système CRISPR-Cas9. L’infection des lymphocytes T par des lentivirus CRISPR et CAR entraîne des modifications du gène cible et la synthèse d’un récepteur antigénique chimérique ou CAR, conduisant finalement à la formation de cellules CAR-T génétiquement modifiées.

Cette vidéo présente un test permettant d’effectuer l’édition de gènes dans des cellules T humaines à l’aide de la technologie CRISPR-Cas9. Un mélange de lymphocytes T CD4+ et CD8+ primaires est associé à un complexe ribonucléoprotéique CRISPR-Cas9, ciblant des gènes spécifiques pour l’inactivation. Lors de l’électroporation, l’ARNsg guide Cas9 vers la séquence d’ADN cible, créant ainsi des coupes précises. Ces coupures sont ensuite réparées par le mécanisme d'assemblage non homologue de la...

Cette vidéo présente une technique de modification génétique médiée par la ribonucléoprotéine Cas9 des cellules tueuses naturelles primaires (NK). Une ribonucléoprotéine Cas9, constituée d’une endonucléase Cas9 liée à un ARN guide (ARNg) formé par l’appariement de bases d’un ARN CRISPR (ARNcr) et d’un ARNcr trans-activateur (ARNtracr), est introduite dans des cellules tueuses naturelles primaires par électroporation. La ribonucléoprotéine cible et clive l’ADN de l’hôte au site cible, ce qui...

Cette vidéo présente un test in vitro évaluant les effets cytotoxiques des cellules CAR-T sur des sphéroïdes tumoraux 3D exprimant des protéines fluorescentes. Cette évaluation utilise la sonde fluorescente rouge Annexine V, qui se lie aux résidus de phosphatidylsérine exposés sur le feuillet externe des cellules cancéreuses apoptotiques après des interactions avec les cellules CAR-T. La fluorescence rouge émise par la sonde permet de distinguer ces cellules des cellules saines émettant une...

Cette vidéo présente une méthode permettant d’établir une co-culture tridimensionnelle de sphéroïdes tumoraux et de lymphocytes T. Un moulage à l’agarose avec des micropuits contenant des sphéroïdes tumoraux est préparé, suivi de l’ajout de lymphocytes T. Après l’incubation, cette configuration permet d’étudier l’interaction des lymphocytes T avec les sphéroïdes tumoraux dans un environnement tridimensionnel contrôlé.

Cette vidéo présente un test in vitro pour valider l’activité des lymphocytes T du récepteur antigénique chimérique (CAR). Les cellules de lymphome à cellules B exprimant l’antigène CD19 et la luciférase cytoplasmique sont co-cultivées avec des cellules CAR-T spécifiques de CD19. La liaison des CAR aux CD19 sur une tumeur induit les cellules CAR T à libérer des cytokines et des toxines qui provoquent la cytotoxicité des cellules tumorales. L’activité des cellules CAR-T est évaluée en...

Cette vidéo montre la réalisation d’un test de libération de lactate déshydrogénase pour déterminer la cytotoxicité des cellules tueuses naturelles (NK) par rapport aux cellules cancéreuses cibles. Le test quantifie la libération de l’enzyme cytoplasmique lactate déshydrogénase par les cellules cancéreuses en mesurant l’absorbance du produit de couleur rouge formé.

Cette vidéo présente une technique permettant de générer des lymphocytes T à récepteur antigénique chimérique (CAR) spécifiques de l’antigène par transduction rétrovirale. Des lymphocytes T CD8+ murins activés sont ajoutés à une plaque de micropuits recouverte de fragments de fibronectine recombinante. Des vecteurs rétroviraux contenant de l’ARN transgénique codant pour un récepteur d’antigène chimérique (CAR) spécifique de l’antigène sont ensuite introduits, et la plaque est centrifugée pour...

Cette vidéo montre une méthode pour générer des vésicules de membrane plasmique à partir de cellules souches de moelle osseuse en les faisant passer rapidement à travers un filtre à membrane. Ces VPP présentent un potentiel pour le traitement substitutif du cytoplasme.

Cette vidéo montre un test permettant de générer des neutrophiles associés aux tumeurs (TAN) anti-angiogéniques. Lors de la prise d’une tumeur de mélanome murin contenant des TAN pro-angiogéniques, les cellules uniques sont isolées à l’aide du tri cellulaire activé par fluorescence (FACS) et traitées avec un inhibiteur de la nicotinamide phosphoribosyl transférase (NAMPT) pour réduire la capacité à stimuler l’angiogenèse.

Cette vidéo montre un test in vitro utilisant des β-glucanes pour activer les cellules microgliales afin de produire des radicaux superoxydes, une espèce réactive de l’oxygène. Dans les cellules cancéreuses du cerveau, les oxydants réactifs générés suppriment activement la prolifération des cellules tumorales et induisent la mort cellulaire.

Cette vidéo montre une procédure de transfert adoptif de cellules dendritiques (DC) présentatrices d’antigène traitées à haute teneur en sel chez la souris. Les cellules dendritiques CD11c+ murines sont exposées à un milieu contenant de grandes quantités de sodium, formant des adduits à la protéine isolévuglandine (IsoLG) dans les cellules. Ces adduits servent de néoantigènes et sont présentés à la surface des DC. Les cellules hautement traitées au sel sont injectées dans des souris par...

Cette vidéo présente un test permettant de générer des cellules T CD8αβ+ dérivées de cellules souches pluripotentes induites (iPSC) spécifiques de l’antigène tumoral. Les iPSC spécifiques de l’antigène tumoral sont cultivées sur une monocouche de cellules stromales et différenciées en cellules progénitrices hématopoïétiques (HPC). Les HPC sont différenciés en lymphocytes T CD4+ CD8+ doublement positifs à l’aide d’un milieu de différenciation. Ces cellules sont ensuite stimulées pour générer des...

Cette vidéo présente une technique de photoimmunothérapie proche infrarouge pour traiter le cancer du poumon dans un modèle murin modifié présentant des cellules tumorales exprimant la luciférase. Lors de l’injection d’un conjugué anticorps-photosensibilisateur (APC) qui se lie à des antigènes spécifiques sur les cellules tumorales, la souris est exposée à un rayonnement proche infrarouge, induisant des changements photochimiques dans l’APC et conduisant à la mort nécrotique des cellules...

Cette vidéo présente une technique de génération de souris du système immunitaire humain (HIS). Les cellules souches hématopoïétiques (CSH) CD34+ sont isolées à partir de cellules leucocytaires du sang de cordon ombilical humain à l’aide de billes magnétiques recouvertes d’anticorps. Les CSH CD34+ sont développées dans un milieu de croissance enrichi en cytokines et cryoconservées. Enfin, les CSH décongelées sont injectées dans un chiot de souris immunodéficient pour établir le modèle de souris...

Cette vidéo illustre l’essai d’un traitement adjuvant ou supplémentaire dans un modèle murin avec des tumeurs sous-cutanées incomplètement réséquées. La souris partiellement réséquée est traitée avec un anticorps ciblant la protéine anti-cytotoxique des cellules T régulatrices, réduisant potentiellement la repousse tumorale et suggérant un traitement adjuvant efficace.

Cette vidéo présente un test permettant d’évaluer l’efficacité d’un traitement antirétroviral combiné oral (cART oral) dans un modèle murin humanisé infecté par le virus de l’immunodéficience humaine-1 (VIH-1). Une combinaison de médicaments ciblant le VIH-1, y compris des inhibiteurs nucléosidiques de la transcriptase inverse et des inhibiteurs du transfert de brin de l’intégrase, est administrée avec un supplément nutritionnel et des antibiotiques. Suite à la consommation de ce mélange par...

Cette vidéo montre une méthode de greffe de peau humaine sur une souris immunodéficiente avec une réponse neutrophile supprimée. La méthode consiste à appliquer de la peau humaine d'épaisseur fendue sur le lit de greffe de la souris, à le sceller et à le recouvrir pour la récupération. Finalement, la peau humaine adhère à la peau de la souris, établissant la vascularisation et la circulation, ce qui permet une xénogreffe de peau réussie.

Cette vidéo montre un test permettant de générer un modèle murin de xénogreffe humanisé. Une souris immunodéprimée reçoit une injection de cyclophosphamide pour provoquer l’épuisement des cellules immunitaires. Des cellules tumorales dérivées de patients mélangées à des cellules mononucléées du sang périphérique humain (PBMC) dans un hydrogel sont injectées par voie sous-cutanée dans la souris, formant une tumeur avec des lymphocytes T infiltrants.

Cette vidéo présente une procédure d’implantation d’une canule intracrânienne dans un modèle murin de tumeur cérébrale, afin de faciliter l’administration d’un agent immunothérapeutique. L’administration de lymphocytes T du récepteur antigénique chimérique spécifiques du glypican-2 dans le microenvironnement tumoral déclenche l’activation des lymphocytes T, entraînant une lyse et une régression tumorale.

La vidéo démontre l’administration locorégionale de virus oncolytiques par injection artérielle hépatique comme approche thérapeutique du carcinome hépatocellulaire. Ces virus se répliquent sélectivement dans les cellules tumorales, induisant la lyse cellulaire et libérant des antigènes associés aux cellules tumorales. Ce processus déclenche la mort cellulaire immunogène, induisant une réponse anti-tumorale.

Cette vidéo présente une technique permettant d’évaluer l’activité antitumorale de la protéine activatrice des neutrophiles d’Helicobacter pylori, ou HP-NAP, dans un modèle de cancer de la vessie chez la souris. HP-NAP interagit avec les neutrophiles des cellules tumorales pour produire des cytokines pro-inflammatoires, induisant la différenciation des lymphocytes T naïfs en phénotypes de lymphocytes T auxiliaires de type 1 (Th1) et cytotoxiques de type 1 (Tc1). Les cellules Th1 et Tc1...

Cette vidéo présente une thérapie cellulaire pour l’arthrite auto-immune chez la souris. Des cellules T régulatrices dérivées d’iPSC exprimant des récepteurs spécifiques de l’ovalbumine sont injectées avec de l’albumine sérique bovine méthylée émulsionnée (mBSA) émulsionnée dans un adjuvant. Les cellules présentatrices d'antigène (CPA) murines traitent et présentent la mBSA aux cellules T, provoquant l'activation et la migration des cellules T vers la membrane synoviale de l'articulation du...

Cette vidéo présente une technique d’injection stéréotaxique pour l’administration de lymphocytes T effecteurs humains dans un modèle murin porteur d’une tumeur cérébrale humaine. En positionnant une souris anesthésiée porteuse d’une tumeur sur un cadre stéréotaxique et en créant un trou de bavure au point d’injection sur le crâne, des lymphocytes T effecteurs sont injectés sur le site de la tumeur.

Cette vidéo montre la méthode de génération d’une souris BLT (moelle, foie et thymus) osseuse doublement humanisée avec un système immunitaire humain fonctionnel et un microbiome intestinal stable de type humain.

Cette vidéo montre la génération d’aérosols médicamenteux et l’administration ciblée de ces aérosols uniquement par le nez à des souris à l’aide d’une unité d’inhalation équipée d’un générateur d’aérosols. La souris est retenue dans un dispositif de contention nasal uniquement et connectée à l'unité d'inhalation, qui délivre le médicament directement dans la cavité nasale de la souris. Par la suite, le médicament passe par la trachée et pénètre dans les poumons.

Cette vidéo présente une méthode de génération d’un modèle d’interposition aortique chez la souris pour étudier le rejet vasculaire induit par l’allo-immunité. Après avoir placé une souris donneuse anesthésiée en position couchée, l’aorte abdominale infrarénale (AIA) est soigneusement isolée des structures environnantes. Les vaisseaux ramifiés sont ligaturés et les deux extrémités de l’AIA sont clampées pour empêcher la circulation sanguine avant la résection. Par la suite, l’AIA du donneur est...

La vidéo montre une méthode chirurgicale pour générer un modèle murin de transplantation de rate hétérotopique vascularisée. La cavité abdominale d’une souris donneuse anesthésiée est ouverte chirurgicalement pour enlever la rate. La veine cave inférieure et l’aorte infrarénale sont identifiées, leurs branches lombaires sont ligaturées et des ouvertures sont pratiquées pour la transplantation hétérotopique d’une rate à partir d’une souris donneuse congénique. Une fois l’anastomose vasculaire...

La vidéo montre une méthode de génération d’un modèle de rat avec une démyélinisation corticale cérébrale généralisée. Il s’agit de perturber la barrière hémato-encéphalique en injectant des cytokines pro-inflammatoires dans des souris amorcées avec la protéine de gaine de myéline recombinante. Ce processus facilite l’infiltration des cellules immunitaires, entraînant une démyélinisation corticale cérébrale généralisée.

La vidéo montre la génération d’un modèle ex vivo de peau ovine infectée par Staphylococcus aureus. Cela implique de traiter une section de biopsie cutanée du front d'un agneau avec des antibiotiques, d'établir un lit de plaie, de le positionner sur une membrane perméable dans une plaque multipuits avec un milieu sans antibiotique et d'établir une infection bactérienne dans la plaie cutanée.

La vidéo montre une méthode de transfert direct de l’ADN plasmidique codant pour l’interleukine-15 dans le tissu cutané d’un modèle de souris déficiente en interleukine-15 par acupuncture à l’aide de micro-aiguilles. Ces micro-aiguilles génèrent des microponctions dans la couche la plus externe de la peau, facilitant l’absorption et la transfection de l’ADN plasmidique dans les cellules de l’épiderme, y compris les kératinocytes, dans le tissu cutané.

Cette vidéo illustre une procédure de transplantation de microbiote fécal chez une souris déficiente en interleukine-10 avec une inflammation du côlon. Les microbes fécaux colonisés dans l’intestin libèrent des métabolites secondaires, provoquant la libération de cytokines anti-inflammatoires et réduisant l’inflammation du côlon.

Cette vidéo montre une méthode de génération d’un modèle de souris humanisée double avec un système immunitaire humain et des cellules hépatiques. Il s’agit de transplanter des cellules hépatiques humaines et des cellules souches et progénitrices hématopoïétiques dans une souris immunodéficiente transgénique par injection intrasplénique, conduisant à la greffe de cellules hépatiques et au développement de cellules immunitaires humaines.

La vidéo démontre la technique de phagothérapie ciblant l’infection à Pseudomonas aeruginosa chez des embryons de poisson-zèbre atteints de mucoviscidose. La phagothérapie diminue efficacement la charge bactérienne et atténue les réponses immunitaires pro-inflammatoires chez les embryons de poisson-zèbre FK infectés par des bactéries, ce qui réduit la létalité des embryons FK.

Cette vidéo présente une technique d’injection de plasma riche en plaquettes (PRP) dans le tendon d’Achille sectionné de rats. Un petit segment est excisé du tendon d’Achille d’un rat receveur, le site est suturé et le rat est laissé se rétablir. En même temps, le sang total est prélevé sur un rat donneur et centrifugé pour obtenir du PRP, qui est ensuite activé et injecté dans le site suturé du rat receveur pour induire la réparation du tendon.

La vidéo présente une technique permettant de générer un modèle de souris humanisée avec une immunité artificielle à base de cellules souches contre le virus de l’immunodéficience humaine (VIH). Du tissu thymus fœtal humain et des cellules souches hématopoïétiques (CSH) modifiées sont implantés dans la capsule rénale d’une souris gravement immunodéprimée. Les CSH, qui expriment des récepteurs antigéniques chimériques (CAR) contre le VIH, sont mélangées dans un mélange de protéines gélatineuses...

Cette vidéo présente l’administration orale de cellules de levure transformées dans un modèle murin. Les cellules de levure transformées sont administrées par voie orale à l'aide d'une technique de gavage, atteignant l'estomac de la souris. Plus tard, les cellules migrent vers l'intestin grêle, où les cellules microrepliées les engloutissent et facilitent leur transfert vers les plaques de Peyer et accèdent au système immunitaire intestinal.

Cette vidéo présente la canalostomie, une procédure qui permet l’administration locale d’un médicament dans l’oreille interne d’une souris par le canal semi-circulaire avec des dommages minimes à l’audition et à la fonction vestibulaire. Cette méthode permet d'inoculer des vecteurs viraux, des produits pharmaceutiques et de petites molécules dans l'oreille interne de la souris.

Cette vidéo présente une méthode basée sur l’imagerie pour visualiser des cellules bêta transplantées exprimant la luciférase dans une souris immunodéficiente diabétique non obèse. L’introduction de splénocytes à partir d’une souris diabétique entraîne une destruction progressive des cellules bêta, confirmée visuellement par une diminution de la luminescence après l’introduction du substrat.

Cette vidéo présente un test de vaccination contre les tumeurs basé sur des cellules. Une souris, injectée par voie intradermique avec des cellules de mélanome B16-F10 pour la formation de tumeurs, est vaccinée avec des cellules B16-F10 sécrétant la cytokine Flt3L près de la tumeur développée. Le Flt3L sécrété par le vaccin favorise la maturation et la prolifération des cellules dendritiques qui présentent ensuite des antigènes tumoraux aux lymphocytes T des ganglions lymphatiques, déclenchant...

Cette vidéo présente une méthode permettant de générer des vaccins multivalents à vésicules de membrane externe (OMV). Des cellules de mammifères sont transfectées pour exprimer et sécréter des antigènes viraux fusionnés à un SpyTag et à un marqueur de polyhistidine. Ces antigènes sont ensuite purifiés à l’aide d’une colonne d’affinité d’acide nickel-nitrilotriacétique (Ni-NTA). L’antigène purifié est mélangé à des vésicules de membrane externe exprimant la protéine SpyCatcher (SC) liée à la...

Cette vidéo démontre la production de vaccins antitumoraux à base de nanoémulsion. Les dépôts de réservoirs de pétrole stables transportant des peptides synthétiques et des adjuvants sont produits par nanoémulsion à faible énergie, offrant un potentiel significatif pour l’immunothérapie tumorale.

Cette vidéo démontre l’immunisation intranasale par BCG chez la souris, activant à la fois les réponses immunitaires innées et adaptatives, conduisant au développement de lymphocytes T mémoires résidents des poumons et de lymphocytes B effecteurs, améliorant ainsi la protection contre les infections à Mycobacterium.

La vidéo présente une méthode pour créer des virus grippaux recombinants adaptés au froid. Il s’agit de transfecter des cellules humaines avec des plasmides bidirectionnels, suivi d’une incubation à basse température pour produire des virus adaptés à la production de vaccins, caractérisés par une réplication réduite dans des conditions plus chaudes.

Cette vidéo présente une méthode de génération d’une bulle de polymère ou d’une nouvelle plateforme à base de polybulles qui permet une libération en rafale retardée. Des polymères à base de polyester sont utilisés pour former les polybulles avec une structure noyau-coquille, et de petites molécules et des antigènes peuvent être utilisés comme cargaison.

Cette vidéo présente un test in vitro pour étudier les effets anticancéreux du surnageant acellulaire de Lactobacillus (LCFS). Lors de l’exposition de sphéroïdes du cancer colorectal à des doses variables de LCFS, l’interaction avec les métabolites bactériens dans le LCFS induit l’apoptose dans les cellules cancéreuses, perturbant la structure sphéroïde et conduisant à la mort cellulaire de manière dose-dépendante.

Cette vidéo présente une méthode de génération d’un candidat vaccin à ARNm à l’aide de nanoparticules polymères. Le polymère cationique interagit avec l’ARNm chargé négativement, formant des polyplexes. La formation de polyplexes stabilise l’ARNm, ce qui en fait un candidat potentiel pour de futurs vaccins à ARNm dans des applications immunothérapeutiques.

Cette vidéo présente la purification de nanoparticules de protéines auto-assemblées ou SAPN marquées à l’histidine à l’aide de la chromatographie liquide d’affinité. Les fractions SAPN purifiées qui en résultent conviennent au développement de vaccins, ce qui est prometteur pour des applications immunothérapeutiques potentielles.

La vidéo présente une technique d’injection guidée par ultrasons pour l’administration de médicaments thérapeutiques dans les glandes salivaires d’un patient humain.

La vidéo montre une technique de chargement d’antigènes sur Mycobacterium bovis BCG pour améliorer ses propriétés immunogènes. La méthode utilise le système avidine-biotine pour recouvrir la surface bactérienne d’antigènes exogènes.

La vidéo présente un test in vitro pour le dépistage d’interférons ayant une activité antivirale contre le virus Zika, un agent pathogène humain. Au sein de la cellule hôte, le virus Zika se multiplie lors de l’internalisation, infectant les cellules voisines et créant des zones distinctes ou des plaques virales. L’interféron de type I, agissant comme un agent antiviral, entrave la multiplication du virus, empêchant ainsi la formation de plaques virales dans la monocouche de la cellule hôte.

Cette vidéo montre un test d’immunisation d’un modèle murin avec des sporozoïtes vivants atténués. Les sporozoïtes de Plasmodium atténués par les radiations sont injectés dans la face dorsale de l'oreille de la souris. Après des injections à plusieurs endroits sur les deux oreilles, la souris est autorisée à récupérer.