Préparation de boîtes de culture compartimentées enrobées de collagène pour la culture de cellules neuronales

Résumé

Source : Zepecki, J. P., et al. Surveillance en temps réel de la migration des cellules de gliome humain sur les co-cultures axones-oligodendrocytes du ganglion de la racine dorsale. J. Vis. Exp. (2019)

Cette vidéo montre la construction d’un système de culture cellulaire à trois compartiments à l’aide de collagène et de graisse non réactive. Ce système est utilisé pour observer les interactions entre les cellules de gliome et les axones en temps réel.

Protocole

1. Culture compartimentée de ganglions de la racine dorsale (DRG), d’oligodendrocytes (OPC) et de hGC (cellules de gliome humain) de rat

1. Préparation des boîtes de culture compartimentées

REMARQUE : Effectuez les étapes suivantes les jours précédant la récolte prévue des DRG.

1. Assemblez des plats de culture compartimentés.
2. Diluer la solution mère de collagène à 500 μg/mL dans du H₂O distillé stérile ; bien mélanger.
3. À l’aide d’une pipette de transfert stérile, remplissez une boîte de culture de 35 mm avec 2 ml de solution de collagène, retirez la....

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Boîte de culture cellulaire	Corning	430165	35 mm x 10 mm
Aiguille hypodermique, 18G	Bd	511097
Solution d’hydroxyde d’ammonium	Fisher Scientific	Réf. A669-500	concentré
Boîte de culture cellulaire	Corning	430165
Chambre Campenot	Tyler Recherche	CAMP-10
Pince hémostatique	Roboz	RS-7035
Collagène de rat Cultrex I	Trévigen	Référence 3440-100-01
Râteau à goupilles	Tyler Recherche	CAMP-PR
Milieu neurobasal	Thermo Fisher	21103049
Graisse silicone
lime métallique
plateau
gaze
Incubateur à CO2
pipette en verre