Isolement des cellules de Schwann à partir de racines vertébrales de souris

Résumé

Source : He, Q., et al., & Ding, F. Purification des fibroblastes et des cellules de Schwann à partir des nerfs sensoriels et moteurs in vitro. J. Vis. Exp. (2020)

Cette vidéo décrit l’isolement et la culture de cellules de Schwann à partir de racines spinales de souris. Des cellules isolées sont ensuite cultivées dans des milieux spécifiques. Les cellules de Schwann sont isolées par digestion différentielle et par adhérence. Ils sont ensuite transférés sur des lamelles recouvertes d’une matrice extracellulaire pour être fixés et proliférer.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Isolement et culture de fibroblastes de nerfs moteurs et sensoriels et de cellules SC (cellules de Schwann)

1. Utilisez des rats Sprague-Dawley (SD) âgés de sept jours (n = 4) du Centre des animaux expérimentaux de l’Université de Nantong en Chine. Placez les rats dans un réservoir contenant 5 % d’isoflurane pendant 2-3 minutes, laissez les animaux respirer lentement et n’avoir aucune activité indépendante, puis désinfectez avec de l’éthanol à 75 % avant la dé....

Résultats

Graphique 1 : Le schéma montrant les étapes de séparation et de purification des fibroblastes et des SC sensoriels et moteurs.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
La solution saline équilibrée de D-Hank	Gibco	14170112
DMEM	Corning	10-013-CV
Microscope de dissection	Olympe	SZ2-ILST
Sérum fœtal bovin (FBS)	Gibco	Référence 10099-141C
Forskoline	sigma	F6886-10MG
0,25 % (p/v) de trypsine	Gibco	Référence 25200-072
Plats de culture
Tubes à centrifuger
Lamelles
Poly-L-lysine
Incubateur à CO2