Obtention de tranches de cervelet à partir d’un cerveau de poussin embryonnaire

Résumé

Source : Hanzel, M., et al. Culture ex vivo de tranches cérébelleuses de poulet et électroporation spatialement ciblée de précurseurs de cellules granulaires. J. Vis. Exp. (2015).

La vidéo montre la préparation des tranches de cervelet. Il montre une procédure détaillée pour isoler le cervelet d’un embryon de poulet. Les tranches sont ensuite préparées à partir du cervelet disséqué à l’aide d’un hachoir à tissus pour une analyse expérimentale plus approfondie.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Dissection de l’embryon de poulet Jour 14 (e14) Cervelet

1. Incuber les œufs de poules fécondés bruns à 38 °C jusqu'au 14e jour embryonnaire.
2. À l’aide de ciseaux à œufs, décapitez l’embryon de poussin in ovo et placez la tête dans une boîte de Pétri contenant une solution saline tampon phosphate (PBS) glacée (figure 1A).
3. À l’aide d’une pince standard, faites des incisions derrière chaque œil à trav....

Résultats

Graphique 1. Dissection du cervelet à partir d’embryons de poussins E14. (A) Décapitez le poussin dans l’œuf et retirez la tête dans une boîte de Pétri avec du PBS glacé. Retirez la mâchoire inférieure et les yeux en faisant une incision derrière les yeux et le pharynx (ligne pointillée). (B) Retirez la peau de la surface du crâne. (C) Enlever les os frontaux et pariétaux, et (D) Retirer le.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Hachoir à tissus McIlwain	Mickle Laboratory Engineering Ltd		Coupez à 300μm pour de meilleurs résultats.