Dissection et montage d’explants de cerveau de larves de mouches des fruits

Résumé

Source : Sheng, C., et al. Imagerie en direct en accéléré et quantification de la dynamique des branches dendritiques rapides dans le développement des neurones de la drosophile. J. Vis. Exp. (2019).

Cette vidéo montre la dissection et le montage d’explants cérébraux de larves de drosophile. Le système nerveux central (SNC), attaché aux disques oculaires, est extrait des larves, puis monté sur une lame de verre dans une solution saline physiologique.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Dissection et montage des explants de cerveau larvaire

1. Disséquer les cerveaux larvaires dans la solution saline externe physiologique (120 mM de NaCl, 4 mM de MgCl₂, 3 mM de KCl, 10 mM de NaHCO₃, 10 mM de glucose, 10 mM de saccharose, 5 mM d’acide N-[Tris(hydroxyméthyl)méthyl]-2-aminoéthanesulfonique (TES), 10 mM d’acide 4-(2-hydroxyéthyl)-1-pipérazinéthanesulfonique (HEPES), 2 mM de Ca²⁺, pH de 7,2) sous un....

Résultats

Figure 1 : Flux de travail du protocole d’imagerie et de quantification de la dynamique des dendrites. (A) Le protocole contient six étapes couvrant la préparation des échantillons, la collecte d’images, le traitement d’images et la quantification semi-automatisée de la dynamique des dendrites. (B) Un schéma illustrant une chambre d’imagerie contenant un ex.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Graisse sous vide poussé	Dow Corning	Référence 79751-30
Verre de protection de microscope	Fisher Scientific	12-544-E
Lames de microscope Superfrost Plus	Fisher Scientific	Référence 12-550-15
Réactifs
glucose
HEPES
Kcl
MgCl2
NaCl
NaHCO3
Pbs
saccharose
TES