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Évaluation des réseaux neuronaux à l’aide d’un réseau de microélectrodes dans des coupes de moelle épinière de souris

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Source : Iredale, J. A., et al. Enregistrement de l’activité du réseau dans les circuits nociceptifs spinaux à l’aide de réseaux de microélectrodes. J. Vis. Exp. (2022).

Cette vidéo présente un test basé sur un réseau de microélectrodes pour étudier l’activité des réseaux neuronaux dans des sections de moelle épinière de souris. Tout d’abord, l’activité électrophysiologique de la corne dorsale superficielle (SDH) de la tranche est enregistrée. Ensuite, un inhibiteur des canaux potassiques est introduit pour prolonger la dépolarisation, ce qui entraîne une activité rythmique synchrone sur l’ensemble du réseau neuronal.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Toutes les procédures impliquant le prélèvement d'échantillons ont été effectuées conformément aux directives de l'IRB de l'institut.

1. Électrophysiologie in vitro

  1. Préparation de solutions pour la préparation et l’enregistrement des coupes de moelle épinière
    1. Liquide céphalo-rachidien artificiel
      note: Le liquide céphalo-rachidien artificiel (LCRa) est utilisé dans une chambre d’incubation d’interface, où les tranches sont stockées jusqu’au début de l’enregistrement et pendant les expériences comme perfusat et diluant pour les médicaments. Voir le tableau 1

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Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Figure 1 : Orientations, méthodes de montage et de coupe des coupes de la moelle épinière. (A) Les tranches transversales nécessitent un bloc de coupe en polystyrène avec une rainure de support découpée dedans. La moelle épinière est reposée contre le bloc dans la rainure de soutien, la face dorsale du cordon faisant face à l’opposé du bloc. Le bloc et le cordon sont collés su.......

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
4-aminopyridineSigma-AldrichRéférence 275875-5G
100 % éthanolThermo FisherAJA214-2.5LPL
CaCl2 1MBanksia ScientificRéférence 0430/1L
Carbonox (Carbogen - 95 % O2, 5 % CO2)Coregas219122
Ciseaux à ressort incurvés à long mancheOutils scientifiques finsRéférence 15015-11
Chambre d’incubation à interface d’air sur mesure
Sérum fœtal bovinThermo Fisher10091130
Pince Dumont #5Outils scientifiques finsRéférence 11251-30
glucoseThermo FisherAJA783-500G
Sérum de chevalThermo Fisher16050130
Microscope inverséZeissAxiovert10
KclThermo FisherAJA383-500G
kétamineCevaKETALAB04
Grands ciseaux chirurgicauxOutils scientifiques finsRéférence 14007-14
Loctite 454 Adhésif InstantanéBoulons et fournitures industriellesL4543G
MATLABMathWorksR2018b
MEA, 3 dimensionsSystèmes multicanaux60-3DMEA100/12/40iR-Ti, 60-3DMEA200/12/50iR-Ti60 électrodes en nitrure de titane (TiN) avec 1 électrode de référence interne, organisées en une grille carrée de 8x8. Les électrodes ont un diamètre de 12 m, une hauteur de 40 m (100/12/40) ou 50 m (200/12/50) et sont espacées de 100 m (100/12/40) ou de 200 m (200/12/50).
Tête d’affiche de la région MEASystèmes multicanauxMEA2100-HS60
Carte d’interface MEASystèmes multicanauxMCS-IFB 3.0 Multiboot
Filet MEASystèmes multicanauxALA HSG-MEA-5BD
Système de perfusion MEASystèmes multicanauxPPS2
AEM, PlanaireSystèmes multicanaux60MEA200/30iR-Ti, 60MEA500/30iR-Ti60 électrodes en nitrure de titane (TiN) avec 1 électrode de référence interne, organisées soit en une grille carrée 8x8 (200/30), soit en une grille rectangulaire 6x10 (500/30). Les électrodes ont un diamètre de 30 m et sont espacées de 200 m (200/30) ou de 500 m (500/30).
MgCl2Thermo FisherAJA296-500G
Caméra microscopeMotiqueMoticam X Wi-Fi
Logiciel d’analyse multicanalSystèmes multicanauxV 2.17.4
Logiciel d’expérimentation multicanalSystèmes multicanauxV 2.17.4
NaClThermo FisherAJA465-500G
NaHCO3Thermo FisherAJA475-500G
NaH2PO4Thermo FisherACR207805000
RongeursOutils scientifiques finsRéférence 16021-14
Petits ciseaux à ressortOutils scientifiques finsRéférence 91500-09
Petits ciseaux chirurgicauxOutils scientifiques finsRéférence 14060-09
saccharoseThermo FisherAJA530-500G
SuperglueAdhésif cyanoacrylate
TétrodotoxineAbcamAB120055
Table d’isolation des vibrationsNewportVH3048W-OPT
Microtome vibrantLeicaVT1200 S

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Microelectrode ArrayNeuronal NetworkMouse Spinal CordSuperficial Dorsal HornPotassium Channel Inhibitor4 AminopyridineAction Potential RecordingElectrophysiological ActivitySynchronous Rhythmic ActivityArtificial CSF Perfusion

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