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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Enregistrement de la réponse auditive du tronc cérébral (ABR)
- Anesthésier des rats Sprague Dawley (SD) (petits âgés de 1 à 14 jours et adultes de 2 mois, des deux sexes) avec une injection unique de pentobarbital sodique à 1,5 % (22 mg/kg pour les petits et 30 mg/kg pour les adultes, intrapéritonéal (i.p.).
- Placez l'animal anesthésié dans un moule en mousse de polyéthylène pour immobiliser le corps de l'animal. Placez l’animal sur une table anti-vibration dans une pièce insonorisante. Maintenez la température corporelle de l'animal à 37,5 °C à l'aide d'un coussin chauffant.
- Essuyez la zone de la tête avec de l’éthanol à 70 % (vol/vol). À l’aide de ciseaux fins, faites une incision ventrolatérale de 1 à 2 mm au pavillon externe pour placer l’électrode de référence ou la terre. Une électrode d’aiguille sous-cutanée (électrode d’enregistrement) est située au-dessus du sommet du crâne (figure 1A).
- À l’aide du générateur de fonctions, générez des rafales de tonalités calibrées (montée/descente de 1 ms, plateau de 3 ms) de différentes fréquences (2, 4, 8, 16, 24 et 32 kHz) et intensités (diminuées de 85 à 10 dB SPL par pas de 5 dB). Faites varier la fréquence et l’amplitude manuellement ou à l’aide d’un ordinateur. Diffusez des stimuli sonores à l’aide d’un haut-parleur électrostatique situé à 10 cm de distance, vers la tête de l’animal.
- Filtrez (100-1 000 Hz), amplifiez et mesurez (256 fois) le potentiel sonore induit à l’aide d’un processeur multifonction pour obtenir les ABR. Les traces ABR sont surveillées en ligne et stockées pour une analyse hors ligne. Il faut environ 40 minutes pour terminer l’enregistrement ABR à partir d’un animal.
note: Habituellement, trois à sept pics (de la vague I à la vague VII) avec des latences inférieures à 15 ms peuvent être identifiés (Figure 1B). Le seuil ABR est défini comme le niveau sonore minimal auquel les ondes I et II peuvent être détectées.
- Euthanasier avant que les animaux ne se réveillent de l’anesthésie (avec une injection intrapéritonéale de 0,3 mL de pentobarbital sodique).
