Enregistrements électrophysiologiques de préparations du tronc cérébral et de la moelle épinière d’un rongeur nouveau-né

Résumé

Source : Rousseau, J., et al. Electrophysiology on Isolated Braintron-spinal Cord Preparations from Newborn Rongeurs permet l’enregistrement de la sortie du réseau neuronal respiratoire. J. Vis. Exp. (2015).

Cette vidéo présente des enregistrements électrophysiologiques de préparations isolées du tronc cérébral et de la moelle épinière de rongeurs nouveau-nés. La préparation est placée dans une chambre d’enregistrement, et les sursauts inspiratoires du tronc cérébral sont enregistrés dans des conditions oxygénées et privées d’oxygène à l’aide de la quatrième racine nerveuse ventrale de la moelle épinière.

Protocole

Toutes les procédures impliquant le prélèvement d'échantillons ont été effectuées conformément aux directives de l'IRB de l'institut.

1. Installation et préparation

1. Solutions
   1. Préparez des solutions mères de liquide céphalo-rachidien artificiel (LCR-A) selon les recettes suivantes. D’autres recettes avec des variations de concentration sont disponibles dans la littérature. Conservez les solutions mères à 4 °C pendant un mois maximum.
      1. Solution saline : ajouter 75,39 g de NaCl (129 mM final), 2,5 g de KCl (3,35 mM final), 0,81 g de NaH₂PO4 (0,58 mM final), 2,33 ....

Résultats

Figure 1. Schéma récapitulatif de la configuration.L’aCSF à bulles est réchauffé et envoyé par une pompe dans la chambre d’enregistrement. L’excès de LCR dans la chambre d’enregistrement est aspiré par une pompe et éliminé. La chambre d’enregistrement est reliée au sol et au régulateur de température. La sortie de l’électrode est directement relayée à l’amplificateur, puis au moyen mobile et a.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Sylgard	Sigma Aldrich	Référence 761036-5EA	Utilisation sous la capuche
NaCl	Boutique bio	Réf. SOD002
Kcl	Boutique bio	Réf. POC888
CaCl2	Boutique bio	CCL444
MgCl2	Boutique bio	MAG510
NaHCO3	Boutique bio	SOB999
NaH2PO4	Boutique bio	SPM306
D-glucose	Boutique bio	GLU501
Carbogène	Linde	Référence 343-02-0006
Régulateur de température	Warner Instruments, Hamden, CT, États-Unis	TC-324B
Électrode d’aspiration	A-M Systems, Everett, WA, États-Unis	Modèle 573000
Amplificateur différentiel à courant alternatif	A-M Systems, Everett, WA, États-Unis	Modèle 1700
Moyenne mobile	CWE, Ardmore, Pennsylvanie, États-Unis	modèle MA-821
Système d’acquisition de données	Dataq Instruments, Akron, OH, États-Unis	modèle DI-720
Logiciel LabChart	ADInstruments, Colorado Springs, CO, États-Unis
Logiciel de prisme	Graphpad, La Jolla, CA, États-Unis
Chambre d’enregistrement	Fait maison
base	Kanetec, Bensenville, IL, États-Unis
Micromanipulateur	World Precision Instrument Inc., Sarasota, Floride, États-Unis	Mo
base	Kanetec, Bensenville, IL, États-Unis	KITE-R
Pompe péristaltique	Gilson, Middleton, WI, États-Unis	Mo
Cage de Faraday	Fait maison	MINIPULS 3
ordinateur