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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Matériaux
- Préparation de l’injection de LPS
- Ajouter 25 mL d’eau distillée à 25 mg de poudre de LPS dérivé de Salmonella typhimurium jusqu’à une concentration finale de 1 mg/mL. Conserver l’injection dans un tube stérile à 4 °C
prudence: Le LPS est toxique.
2. Animaux
- Administrer du LPS à des rats Sprague-Dawley mâles, âgés de 10 semaines (poids moyen : 280 ± 20 g) par injection intrapéritonéale.
prudence: Si les rats sont achetés auprès d’une autre organisation, la phase d’adaptation ne doit pas être inférieure à 7 jours.
3. Injections de LPS
- Injectez du LPS par voie intrapéritonéale à chaque rat à une dose de 1 mg/kg et renvoyez les rats dans leur cage d’origine.
note: L’anesthésie n’est pas nécessaire.
- Six heures plus tard, injectez la même dose d’injection de LPS dans les rats.
- Seize heures plus tard, injectez la même dose de LPS chez les rats.
prudence: L’injection de LPS à une dose de 1 mg/kg chez des rats SD peut entraîner un taux de mortalité de 5 %. Le taux de mortalité pourrait encore augmenter chez les rats jeunes ou âgés ou les rates femelles gravides.
- Remettez les rats dans leurs cages après l’injection de LPS et donnez-leur un accès à volonté à la nourriture et aux boissons.
note: Les rats présenteront une réponse inflammatoire systémique distincte, et les cages doivent donc rester propres tout au long de l’expérience. Les rats doivent être surveillés fréquemment (2 fois par jour) pour leur poids, leur apparence générale et leur attitude après la première injection de LPS. Si les rats commencent à présenter une posture voûtée, une réticence à bouger, une perte de poids significative (>20 %) ou une coloration à la porphyrine, ils doivent être euthanasiés sans cruauté avant la fin de l’étude de 7 jours.