Modélisation de l’hémorragie intraventriculaire néonatale par injection intraventriculaire d’hémoglobine

Résumé

Source : Miller, B. A., et al. Modélisation de l’hémorragie intraventriculaire néonatale par injection intraventriculaire d’hémoglobine. J. Vis. Exp. (2022).

Cette vidéo présente une méthode pour générer un modèle d’hémorragie intraventriculaire néonatale chez le rat. Dans cette procédure, un raton anesthésié reçoit une injection d’hémoglobine dans le ventricule latéral du cerveau. L’hémoglobine provoque un stress oxydatif et libère de l’hème, simulant une hémorragie intraventriculaire. Les dommages qui en résultent aux tissus cérébraux, entraînés par des espèces réactives de l’oxygène et des cytokines inflammatoires, entraînent une hypertrophie ventriculaire, une conséquence fréquente de l’hémorragie intraventriculaire.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Préparation des solutions d’hémoglobine et de LCR

1. Préparez une solution stérile de liquide céphalorachidien artificiel (LCRa) en ajoutant 500 μL de la solution de LCa dans un microtube de 1,5 mL et conservez-la sur de la glace.
2. Préparez une solution d’hémoglobine stérile à 150 mg/mL en ajoutant 75 mg d’hémoglobine à 500 μL d’aCSF dans un microtube de 1,5 mL et conservez-la sur de la glace.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
0,3 ml	BD Microfine + Seringue à insuline	230-4533	0,3 à 0,5 ml fonctionneront
1,5 mL de microtube	États-Unis Scientific	1615-5500	N° de lot K194642H -3 511
6-0 Suture monofilament	ÉTHICON	67G
Balance analytique	CCURIS Instruments	W3200-320
LCR artificiel (aCSF)	Tocris Bioscience	3525	N° de lot : 72A
Bétadine	Produits Purdue L.P.	301005-00	NDC 67618-150-09
Carprofène (injectable)	Zoetis Inc.	PI 4019448	Rimadyl
Éthanol	Laboratoires Decon	2701
Coussin chauffant	Rayon de soleil	E12107-819	UL 612A, Z-1228-001
Hémoglobine	MP Biomedicals	100714	LOT N° SR02321
Isoflurane	Soins intensifs Piramal	NDC 66794-017-25
Vaporisateur d’isoflurane	VETEQUIP	911103
Lumière pour l’inturment stéréotaxique	Dolan-Jenner industries	Fiber-Lite MI-150
Pompe à seringue de micro-injection	World Precision Instruments	MICRO21	Série 184034 T08K
Oxygène	Airgas Healthcare	UN1072	NUMÉRO DE LOT S1432080XA02
Rats Sprague Dawley	Laboratoires Charles River	Code de souche : 001
Instrument stéréotaxique	Instituts KOPF	Modèle 900LS Lazy Susan
Applicateur stérile à embout en coton	Fischerbrand	23-400-118
Lame chirurgicale	covetrus	#10
Antibiotique topique triple	Pommade antibiotique triple	NDC 51672-2120-1

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