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Article de méthode

Évaluation de la contraction musculaire avec un traitement par bloqueur neuromusculaire

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8 juillet 2025

Dans cet article

Résumé

Source : Lin, C. U., et al., Jonction neuromusculaire in vitro induite à partir de cellules souches pluripotentes induites par l’homme. J. Vis. Exp. (2020)

Cette vidéo démontre l’évaluation du muscle à l’aide de motoneurones cultivés, de cellules de Schwann et de myotubes, suivie d’un traitement avec un bloqueur neuromusculaire pour inhiber la contraction. Les graphiques de mouvement temporel codés en couleur affichent un graphique de mouvement temporel codé en couleur. Le rouge indique le mouvement le plus rapide et le bleu indique le mouvement le plus lent.

Protocole

1. Traitement de la contraction musculaire et du curare

  1. Pour déclencher la contraction du myotube, ajoutez 25 mM de chlorure de calcium (CaCl2) au milieu de culture. Le mouvement des myotubes peut être observé en 1\u20122 min.
  2. Placez la plaque à 6 puits sur la platine d’un microscope inversé. Enregistrement d’un film de contraction des myotubes par microscopie à cellules vivantes.
  3. Pour arrêter la contraction du myotube, ajoutez du curare dans le milieu de culture (300 ng/mL). Ensuite, enregistrez le film à l’étape 1.2.
  4. Ouvrez le fichier vidéo à l’aide d’un logiciel d’analyse vectorielle de mouvement, puis cliquez sur le bouton Analyse de mouvement pour analyser le film.
    REMARQUE : La contraction des myotubes est représentée sous forme de graphique temps-mouvement. Les films sont codés par couleur pour montrer la vitesse de déplacement des myotubes. Les signaux scintillants codés par couleur indiquent les mouvements des myotubes, où la couleur rouge indique la vitesse de déplacement la plus rapide et la couleur bleue indique la vitesse de déplacement la plus lente.

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Déclarations de divulgation

Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Milieu, facteurs de croissance et réactifsObjetMarqueN° de cat. Nombre
B27, GibcoGibco12587-001
BDNFSystèmes de R & D248-BD
ECM, Matrigel (facteur de croissance réduit)Corning356230
GDNFSystèmes de R & D212-GD
Enduiseur d’ionsJEOLJEC3000FC
Microscopie à cellules vivantesNikonMicroscope Eclipse Ti
Logiciel d’analyse vectorielle de mouvementSonySI8000
N2, GibcoGibco17502-048
Milieu neurobasalGibco21103-049
NT3Systèmes de R & D267-N3

Étiquettes

Jonction neuromusculairechlorure de calciummicroscopie sur cellules vivantesanalyse temporelle et motrice codée par couleurscontraction des myotubesrécepteurs à l'acétylcholinemicroscope inversétraitement au curare