Mesure de la réponse auditive du tronc cérébral chez la souris

Résumé

Source : Lee, D., et. al. Conditions expérimentales modifiées pour la perte auditive induite par le bruit chez la souris et évaluation de la fonction auditive et des lésions des cellules ciliées externes. J. vis. exp. (2023)

Cette vidéo montre la mesure de la réponse auditive du tronc cérébral (ABR) chez une souris. Les électrodes sont placées sur la tête, derrière l’oreille et près de la queue d’une souris anesthésiée. Des stimuli acoustiques de différentes intensités sont délivrés et les signaux électriques générés sont enregistrés sous forme d’ondes.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Évaluation du seuil

1. d’audition basée sur la réponse auditive du tronc cérébral (ABR)Utilisez un système de test ABR commercial spécialement conçu pour les petits animaux.
2. Injectez par voie intrapéritonéale un mélange de tilétamine et de zolazépam (40 mg/kg) et de xylazine (9,3 mg/kg) dans les souris pour une anesthésie générale.
   REMARQUE : L’évaluation ABR dure ~2 h. Assurez-vous de fournir un support thermique via un coussin chauffant et d’appliquer une pommade oculaire pour éviter la sécheresse pendant que la souris est sous anesthésie.
3. Mesurer l’ABR chez la souris sous anesthésie générale. Placez des électrodes à aiguille sous-cutanées (12 mm) au niveau du sommet, derrière le pavillon de l’oreille gauche et près de la queue pour mesurer le seuil d’audition.
4. Présentez des stimuli acoustiques à l’aide d’un haut-parleur placé à 1 cm de l’oreille gauche de l’animal.
5. Utilise un oscilloscope pour contrôler les stimuli acoustiques. Choisissez l’onde sinusoïdale pour les stimuli et 10 k pour l’échelle de fenêtre. Tournez le bouton Fréquence pour obtenir la fréquence souhaitée des stimuli acoustiques.
6. Ajustez l’intensité du stimulus en tournant le bouton d’amplitude ou AMLP sur le générateur de fonctions. Obtenez l’intensité de stimulus souhaitée en tournant le bouton AMLP à une tension appropriée, calculée à partir de l’étalonnage.
7. Collecte les mesures ABR sous une série d’intensités de stimulus, de 10 dB Sound Pressure Levelor SPL à 100 dB SPL, avec une taille de pas de 10 dB.
   REMARQUE : Mesurez le seuil d’audition dans une boîte insonorisée. On a supposé que le niveau d’intensité minimum du stimulus qui pourrait donner lieu à une onde V discernable dans le signal collecté était le seuil ABR (Figure 1). Après l’évaluation ABR, surveiller l’animal jusqu’à ce qu’il se rétablisse de l’anesthésie (~1 h).

Résultats

Figure 1 : Mesure de l’audition par l’ABR. Résultats ABR représentatifs à 12 kHz, recueillis le 13ème jour (1 semaine après l’exposition au bruit). L’onde V à chaque intensité est étiquetée si elle est discernable.

Matériaux