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Imagerie de polysomes isolés du cerveau d’une souris à l’aide de la microscopie à force atomique

May 29th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

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p style='line-height :1.2 ;margin-bottom :0pt ;margin-top :0pt ;' dir='ltr'>Source : Lunelli, L., et al. Regarder les polysomes cérébraux avec la force atomique Microscopie. J. Vis. exp.(2016).

Cette vidéo montre l’imagerie des polysomes à l’aide de la microscopie à force atomique. Une feuille de mica enrobée d’ions nickel ancre l’ARN avec les ribosomes attachés. L’échantillon est lavé, séché et monté sur la platine du microscope. La pointe en porte-à-faux scanne la surface de l’échantillon, enregistrant les déviations du laser pour cartographier la topologie. Un logiciel est utilisé pour corriger les distorsions et visualiser les structures polysomiques à haute résolution.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Attention : Pour éviter toute dégradation de l’ARN des échantillons, préparez tous les tampons en utilisant de l’e....

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Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
CycloheximideSigma1810Préparation du lysat
DNAseIThermo Scientific89836Préparation du lysat
inhibiteur de RNAse RiboLockLife technologiesEO-0381Préparation du lysat
Sigma40718Préparation du lysat
Triton X100SigmaT8532Préparation du lysat
DTTSigma43815Préparation du lysat
Désoxycholate de sodiumSigmaD6750Préparation du lysat
MicrocentrifugeEppendorf5417RPréparation du lysat
SucroseSigmaS5016Préparation du dégradé de saccharose
UltracentrifugeBeckman CoulterOptima LE-80KCentrifugation par gradient de saccharose
Rotor d’ultracentrifugeuseBeckman CoulterSW 41 TiCentrifugation de gradient de saccharose
Polyallomer tubeBeckman Coulter331372Sucrose centrifugation dégradée
Système de fractionnement de gradient de densitéTeledyne Isco67-9000-176Fractionnement du gradient de saccharose
AFMAsylum ResearchCyphervisualisation du polysome
< style='couleur-de-fond :#ffffff ; couleur :#1a202c ; famille-de-polices :Roboto ; taille de police :7pt ; poids-police :normal ; débordement :caché ; rembourrage :0px 3px ; alignement vertical :bas ; espaces :normal ; word-wrap :break-word ; stratégie-d’enveloppement :4 ;' >DEPC

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