Microscopie à deux photons pour l’imagerie de la morphologie neuronale chez un bébé souris

Résumé

Source : Mizuno, H., et al. In Vivo Imagerie à deux photons des neurones corticaux chez les souris néonatales. J. Vis. Exp. (2018)

Cette vidéo présente l’utilisation de la microscopie à deux photons pour imager les neurones dans le cerveau d’un bébé souris transgénique anesthésié. Le laser à deux photons permet une imagerie plus profonde avec une résolution spatiale élevée et une diffusion minimale de la lumière, ce qui permet de capturer en détail la morphologie neuronale, y compris les projections dendritiques.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le vétérinaire JoVE. <span style='font-family :Arial,sans-serif ;font-size :12pt ;font-style :normal ;font-variant :normal ;text-decoration :none ;vertical-align :baseline ;white-space :pre-wrap ....

Résultats

Figure 1 : Chirurgie, préparation de la fenêtre crânienne et fixation de la barre en titane. (A) Ce panneau.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
pK031. TRE-Cre	Auteurs	-	Disponible à partir de RIKEN BRC et Addgene
pK029. CAG-loxP-STOP-loxP-RFP-ires-tTA-WPRE	Auteurs	-	Disponible à partir de RIKEN BRC et Addgene
pK273. CAG-loxP-STOP-loxP-CyRFP-ires-tTA-WPRE	Authors	-	Disponible à partir de authors
Isoflurane	Wako	099-06571
410 Unité d’anesthésie (machine à gaz isoflurane)	Univentor	8323101
Vetbond (adhésif tissulaire)	3M	084-1469SB
MμltiFlex Round (pointe de chargement)	Sorenson	13810
Gelfoam (éponge de gélatine)	Pfizer	09-0353-01
Agarose	Sigma	A9793	Point de fusion bas
Couvre-objet de forme ronde	Matsunami	-	Sur mesure
Unifast 2 (ciment dentaire)	GC	-<
Titanium bar	Auteurs	-
Rimadyl (carprofen)	Zoetis	-
microscope à 2 photons	Zeiss	LSM7MP
laser titane-saphir	Spertra-Physics	Mai-Tai eHPDS
Plaque de titane	Authors	-	Sur mesure (voir Figure 2A)
IMARIS, FilamentTracer, MeasurementPro	BITPLANE		<
Goniometer stage	Thorlabs	GN2/M

td style='couleur-de-fond :#ffffff ;débordement :caché ;rembourrage :0px 3px ;alignement vertical :bas ;'> < style='couleur-de-fond :#ffffff ;couleur :#1a202c ;famille-de-police :Roboto ;taille-de-police :7pt ;poids-de-police :normal ;débordement :caché ;rembourrage :0px 3px ;alignement vertical :bas ;espace-blanc :normal ;habillage de mots :mot-pause ;stratégie-d’habillage :4 ;'>Fait sur mesure (voir Figure 1G)< td style='couleur-de-fond :#ffffff ;couleur :#1a202c ;famille-de-police :Roboto ;taille-de-police :7pt ;poids-de-police :normal ;débordement :caché ;rembourrage :0px 3px ;alignement vertical :bas ;espace-blanc :normal ;habillage de mots :break-word ;stratégie-d’enveloppement :4 ;'>Injectabletr style='hauteur :20px ;'>