Imagerie multispectrale à réflectance diffuse du flux sanguin cérébral et de la structure tissulaire du rat

Résumé

Source : Nishidate, I., et al. Évaluation simultanée de l’hémodynamique cérébrale et des propriétés de diffusion de la lumière du cerveau de rat in vivo à l’aide de l’imagerie multispectrale à réflectance diffuse. J. Vis. Exp. (2017)

Cette vidéo montre l’utilisation de l’imagerie multispectrale à réflectance diffuse pour analyser le débit sanguin cérébral, les niveaux d’oxygène et les modifications de la structure tissulaire chez un rat anesthésié, fournissant ainsi des informations sur l’hémodynamique et la morphologie du cerveau dans diverses conditions.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Acquisition d’images d’échantillons
   Remarque : Les images de l’intensité lumineuse diffuse du cerveau de rat exposé à neuf longueurs d’onde sont capturées et sauvegardées sur le disque dur d’un ordinateur personnel dans les mêmes conditions d’acquisition.
   1. Placez doucement le rat sur la scène et ajustez lentement le niveau de la scène afin que la caméra puisse se concentrer sur la surface du cerveau du rat.
   2. Sélectionnez la commande « enregistrer » dans le menu Fichier pour enregistrer une image dans un fichier.
   3. Changez l’emplacement du filtre en tournant la roue à filtres.
   4. Enregistrez une image aux autres longueurs d’onde selon le processus décrit ci-dessus. Le nom du fichier doit identifier l’échantillon et la longueur d’onde (e.g., R500, R520, R540 ... R760).
2. Acquisition d’images sombres
   REMARQUE : La caméra CCD (dispositif à couplage chargé) peut générer une intensité lumineuse en réponse à un signal électrique. Cependant, il y a une sortie mineure due au bruit dans les circuits électriques et les détecteurs, même si la lumière ne pénètre pas dans le détecteur ; C’est ce qu’on appelle le bruit du courant d’obscurité. Pour mesurer avec précision l’intensité spectrale de la lumière, la composante du courant d’obscurité doit être enregistrée sous forme d’image sombre, puis soustraite du signal mesuré. L’image sombre est une image prise avec le chemin de la lumière bloqué.
   1. Éteignez la source lumineuse de la lampe halogène.
   2. Bloquez le chemin de la lumière vers le système de caméra CCD à l’aide d’une plaque de blindage.
   3. Sélectionnez la commande « enregistrer » dans le menu Fichier pour enregistrer une image dans un fichier. Le nom du fichier doit identifier l’échantillon ( par exemple, Dark).

Matériaux