Adaptation neuronale au préconditionnement hypoxique répétitif chez la souris

Résumé

Source : Poinsatte, K., et al., Quantification de la protection neurovasculaire à la suite d’un préconditionnement hypoxique répétitif et d’une occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne chez la souris. J. Vis. Exp. (2015)

Cette vidéo montre la méthode de préconditionnement hypoxique répétitif (RHP) en exposant une souris à des cycles d’hypoxie contrôlés avant d’induire un AVC ischémique. L’expérience évalue ses effets sur la stabilité de la barrière hémato-encéphalique, l’adaptation neuronale et l’inflammation.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Préconditionnement hypoxique répétitif

1. Concevez sur mesure quatre débitmètres sur des régulateurs de gaz et fixez-les à des chambres d’induction standard de 15 L avec des tubes en polychlorure de vinyle (PVC) pour permettre au gaz comprimé des réservoirs d’oxygène (O₂) de s’écouler dans les chambres via un orifice d’entrée.
2. Divisez les souris en 2 groupes : le groupe de préconditionnement hypoxique répétitif (RHP), qui reçoit des expositions à 8 % et 11 %_d’O2, et le groupe témoin, qui reçoit des expositions à 21 % d’O2 (air ambiant) simultanément.
3. Retirez le couvercle supérieur du filtre de chaque cage et placez la cage, avec les bouteilles de nourriture et d’eau intactes, dans les chambres reliées à leurs réservoirs O₂ respectifs. Fermez et fixez le couvercle de la chambre.
   1. Ouvrez la vanne de gaz principale pour les réservoirs et réglez le débit initial pour chaque chambre d’induction à 2 L par minute (LPM) pendant les 5 premières minutes d’exposition. Réduire le débit à 1 LPM pour le reste de l’exposition.
   2. À la fin de l’exposition, réduisez le débit à 0 LPM et fermez les vannes de gaz des réservoirs.
   3. Ouvrez les couvercles de la chambre et replacez le couvercle supérieur du filtre sur chaque cage. Placez les cages dans un boîtier standard jusqu’à la prochaine exposition hypoxique.
4. Vaporisez chaque chambre d’induction avec du NPD (Steris) ou un désinfectant/désodorisant équivalent après chaque utilisation.
5. Exposez les souris à 21 % et à RHP au même moment de la journée pendant deux semaines.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Débitmètres, régulateurs	VetEquip, Inc	Commande spéciale	Quatre débitmètres sont fixés à un tube en PVC flexible de 6,0 mm qui se connecte à l’orifice d’entrée de chaque chambre d’induction avec un connecteur femelle en plastique. Ces débitmètres sont boulonnés à une barre métallique de 6,5 » x 1 » x 1 ». Cette barre métallique est boulonnée à un manomètre MI-246-P avec une sortie DISS. Cet équipement de manomètre et de débitmètre peut être fixé à chaque nouvelle bouteille de gaz à l’aide d’une clé.
Réservoir 21 % O₂	AirGas	OX USP200
Réservoir 11 % O₂	AirGas	Commande spéciale Réservoir
8 % O₂	AirGas	Commande
15 L chambres d’induction	VetEquip	941454

spéciale