Induction d’une crise électroconvulsive aiguë dans un modèle de rat

Résumé

Source : Jang, S., et al, Crises électroconvulsives chez les rats et fractionnement de leur hippocampe pour examiner les changements induits par les crises dans les protéines de densité postsynaptiques. J. Vis. Exp. (2017)

Cette vidéo démontre l’induction d’une crise électroconvulsive aiguë (ECS) dans un modèle de rat pour étudier la neuroplasticité induite par les crises. Les chercheurs appliquent une stimulation électrique à l’aide d’électrodes de pince auriculaire, déclenchant l’hyperexcitabilité neuronale et le clonus. Ce modèle permet d’étudier la plasticité synaptique, les mécanismes convulsifs et les effets thérapeutiques liés à l’électroconvulsivothérapie (ECT).

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Induction du SEC aigu

REMARQUE : Voir Figure 1B, panneau supérieur.

1. Mouillez les clips d’oreille avec une solution saline stérile et assurez-vous qu’ils sont saturés.
2. Mouillez les oreilles d’un rat avec une solution saline stérile en les enveloppant dans de la gaze imbibée de solution saline. Une fois qu’ils sont mouillés, retirez la gaze.
3. Fixez un clip par oreille et positionnez-le au-delà de la bande cartilagineuse principale.
4. Confirmez sur la machine ECS qu’une boucle true est établie ; si ce n’est pas le cas, un message d’erreur ou une lecture de « 1 » apparaîtra sur la machine.
5. Portez un gant épais et non métallique. Tout en tenant doucement le rat dans une main gantée, appuyez sur le bouton « SHOCK » pendant quelques secondes et relâchez lentement la prise sur le rat pour observer la crise. Pour le contrôle simulé « sans convulsation » (NS), manipulez le rat de la même manière, mais ne délivrez pas le courant.
6. Débranchez les clips d’oreille au début du clonus et enregistrez le comportement de la crise selon une échelle de Racine révisée qui comprend les « mouvements de la bouche et du visage » (stade 1), le « hochement de tête » (stade 2), le « clonus des membres antérieurs » (stade 3), le « cabrage avec clonus des membres antérieurs » (stade 4) et « l’élevage et la chute avec le clonus des membres antérieurs » (stade 5). La crise devrait durer environ 10 s ; Enregistrez la durée de la crise à l’aide d’une minuterie.
7. Après l’arrêt de la crise, retournez le rat dans sa cage d’origine. Surveillez le rat pendant encore 5 minutes pour vous assurer qu’il se remet des convulsions. Gardez-le logé individuellement dans la cage et retournez la cage dans la salle de réveil.
8. Répétez l’induction ECS sur le rat suivant.
9. Surveillez les rats tout au long du reste de la journée et au moins une fois le matin et une fois l’après-midi le lendemain jusqu’à ce qu’ils soient euthanasiés pour des expériences.
   REMARQUE : La méthode d’induction ECS pourrait entraîner des signes cliniques en tant qu’effet secondaire accessoire, qui nécessite une attention particulière. Par exemple, le protocole d’induction ECS pourrait induire des crises qui durent plus de 15 secondes et causer une détresse inutile aux rats. Dans ce cas, interrompez la crise à l’aide de diazépam (10 mg/kg, i.p.) ou de pentobarbital (25 - 30 mg/kg, i.p.). Si les rats développent une détresse respiratoire ou de graves anomalies comportementales après l’arrêt de la crise, euthanasiez-les par inhalation de dioxyde de carbone suivie d’une décapitation.

Résultats

Figure 1 : Schéma pour l’induction du SEC aigu et du SEC chronique. (A) Un rat a été connecté à un générateur d’impulsions à l’aide d’électrodes à pince auriculaire, et un choc électrique (55 mA, 100 impulsions/s pendant...

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Sprague-Dawley rat	Charles River Laboratories		ECS fournit un
générateur d’impulsions	Ugo Bsile, Comerio, Italy	57800	ECS supplies