Article de méthode

Un modèle de contusion unilatérale des blessures moelle épinière cervicale aide de l'impacteur Infinite Horizon

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DOI :

10.3791/3313

24 juillet 2012

Dans cet article

Résumé

Une façon fiable et reproductible pour produire un col de l'utérus blessures unilatérale moelle épinière aide de l'impacteur Infinite Horizon est décrite. La méthode tire parti d'un cadre personnalisé conçu et pince pour stabiliser la colonne vertébrale. La procédure normalisée et biomécanique des blessures paramètres entraînent des blessures suffisantes et durables.

Résumé

Alors que la majorité des humains blessures de la moelle épinière se produisent dans la moelle épinière cervicale, la grande majorité des recherches en laboratoire emploie des modèles animaux de lésions de la moelle épinière (SCI) dans lequel la moelle épinière thoracique est blessé. En outre, parce que la plupart lésions de la moelle de l'homme se produisent à la suite d'émoussée, non-pénétrant un traumatisme (accident de véhicule automobile, par exemple, des blessures sportives) où la moelle épinière est violemment frappé par de l'os déplacées ou des tissus mous, la majorité des chercheurs SCI sont d'avis que les plupart des modèles de blessures cliniquement pertinents sont ceux dans lesquels la moelle épinière est rapidement contusionné. 1 Par conséquent, une étape importante dans l'évaluation préclinique de nouveaux traitements sur le chemin de la traduction humaine est une évaluation de leur efficacité dans un modèle de contusion au sein de SCI la moelle épinière cervicale. Ici, nous décrivons les aspects techniques et les résultats qui en résultent anatomiques et comportementales d'un modèle unilatéral contondante du cancer du col SCI qui emploie leInfini Horizon frappe des lésions médullaires.

Des rats Sprague-Dawley ont subi une laminectomie unilatérale du côté gauche au niveau de C5. Afin d'optimiser la reproductibilité des résultats biomécaniques, fonctionnels, et histologique du modèle des blessures, nous contus de la moelle épinière en utilisant une force d'impact de 150 kdyn, une trajectoire d'impact de 22,5 ° (animaux tourné à 22,5 °), et un point d'impact hors de la ligne médiane de 1,4 mm. La récupération fonctionnelle a été évaluée à l'aide du test du cylindre d'élevage, de test échelle horizontale, le toilettage de test et test de l'escalier modification de Montoya pour un maximum de 6 semaines, après quoi les moelles épinières ont été évalués histologiquement pour épargne matière grise et blanche.

Le modèle présenté ici donne des blessures cohérents et reproductibles des forces biomécaniques de la moelle épinière, une caractéristique importante de tout modèle expérimental SCI. Cela entraîne des dommages histologiques discret à la moitié latérale de la moelle épinière qui est en grande partie contenue à til côté ipsilatéral de blessure. La blessure est bien tolérée par les animaux, mais ne se traduisent par des déficits fonctionnels de la patte antérieure qui sont importants et soutenus dans les semaines suivant la lésion. Le modèle de lésion cervicale unilatérale présenté ici peut être une ressource pour les chercheurs qui souhaitent évaluer les thérapies potentiellement prometteuses avant la traduction humaine.

Protocole

1. Mettre en place: conception du cadre et de serrage pour tenir l'animal

  1. Le cadre et le collier de tenir l'animal a été spécialement conçu pour accueillir l'horizon infini (IH) Spinal Cord Injury Impactor.
  2. La base de la trame est une plate-forme en aluminium taillées dans les dimensions suivantes (30,2 cm x 20,3 cm x 1,3 cm) pour s'insérer dans le support de guide de table qui est livré en standard avec l'appareil IH (figure 1A).
  3. Quatre plaques Flexaframe pied d'appui (Fisher Scientific, Toronto, ON) sont attachés à la plate-forme et de huit tiges de support Flexaframe (Fisher Scientific, Toronto, ON, 30,5 cm) sont ass....

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Discussion

Dans cet article, nous décrivons un modèle contusion cervicale unilatérale en utilisant l'horizon infini (IH) frappe avec une force de 150 kdyn, un angle de 22,5 ° par rapport à la verticale, et un objectif latérale de 1,4 mm de la ligne médiane. Avec ces paramètres, nous étions en mesure de produire les déficits comportementaux subies dans le membre antérieur ipsilatéral avec une perturbation du parenchyme contenue en grande partie sur le côté ipsilatéral, où il est apparu que des dommages considérables eu lieu dan.......

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Déclarations de divulgation

Pas de conflits d'intérêt déclarés.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Nom de l'équipement Entreprise Numéro de catalogue Commentaires
Impactor Infinite Horizon Precision Systems et de l'instrumentation IH-0400
Tôle d'aluminium Metalsupermarlets.com APT6061/500
Des plaques d'appui de pied Flexaframe Les pêcheurs scientifique 1466625Q
Tiges de support Flexaframe Les pêcheurs scientifique 1466610GQ
Flexaframe Connecteurs de soutien Les pêcheurs scientifique 1466620Q
Fixer une Custom made Choo et al., 2009
Détenteurs de métal Custom made Voir ci-dessus
Impactor pointe Custom made Diamètre: 1,15 mm
Cadre stéréotaxique David Kopf Instruments Modèle 900
Niveau Cylindre Yijia OUTILS YJ-SL0620
Microscope Leica Modèle #: MZ8
Ciseaux Laboratoire prise VWR 12620-902

Références

  1. Lee, J. H., Tigchelaar, S., Liu, J., Stammers, A. M., Streijger, F., Tetzlaff, W., Kwon, B. K. Lack of neuroprotective effects of simvastatin and minocycline in a model of cervical spinal cord injury. Exp. Neurol. 225, 219-230 (2010).
  2. Kwon, B. K., Hillyer, J., Tetzlaff, W.

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Mots-clés

Mod le de contusion unilat raleMod le de l sion de la moelle pini revaluation de la r cup ration fonctionnelleAnalyse histologique des dommagesProc dure de laminectomie C5talonnage de la force d impactBatterie de tests comportementauxPr servation de la substance blanche

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