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Article de méthode

L'imagerie non-invasive de rejet aigu après transplantation rénale Rat aide

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DOI :

10.3791/4240

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28 avril 2013

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* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Nous présentons ici un modèle de transplantation rénale chez le rat afin d'évaluer de façon non invasive rejet aigu d'allogreffe utilisant la tomographie par émission de positons au 18F-FDG.

Résumé

Le nombre de patients atteints de maladie rénale en phase terminale, et le nombre de receveurs d'une allogreffe rénale augmente continuellement. Les épisodes de rejet aigu d'allogreffe cellulaire (AR) sont un facteur de mauvais pronostic pour la survie de l'allogreffe à long terme, et son diagnostic précoce est crucial pour la fonction allogreffe 1. À l'heure actuelle, AR ne peut être définitivement diagnostiquée par biopsie à l'aiguille-aiguille, qui, comme une méthode invasive, découvre un risque important de blessure ou même la perte du greffon. De plus, les biopsies ne sont pas réalisables chez les patients prenant des anticoagulants et le site d'échantillonnage limité de cette technique peut entraîner des résultats faussement négatifs si l'AR est focale ou inégale. En conséquence, cela a donné lieu à une recherche permanente de nouvelles méthodes de détection AR, qui doit souvent être fait chez les animaux, y compris l'utilisation de différents modèles de transplantation.

Depuis le début des années 60, la transplantation rénale de rat est une méthode expérimentale bien établie pour l'examination et l'analyse des AR 2. Nous ici présents en plus petit animal positron emission tomography (PET) avec 18 F-FDG (FDG) pour évaluer AR dans un uninéphrectomisés modèle transplantation rénale de rat allogénique et proposer imagerie FDG-PET greffe comme une nouvelle option pour un non-invasive, précise et le diagnostic précoce de l'AR aussi pour la situation humaine 3. En outre, cette méthode peut être appliquée pour le suivi pour améliorer la surveillance du rejet de greffe 4.

Protocole

1. Récupération de donneur d'organe

  1. Mettre en place le microscope stéréotaxique, poids record de la semaine 8-10 rat (donneur et receveur poids corporel doit correspondre).
  2. Anesthésier le rat donneur (Lewis Brown Norway F1, F1 LBN) utilisant de l'oxygène / inhalation isoflurane (isoflurane 4% / 2 L / min d'oxygène). Maintenir une anesthésie par isoflurane abaissement à 2-2,5%.
  3. Placez le rat anesthésié sur le pavé de la chirurgie. Fixer les extrémités du rat avec du ruban adhésif sur le tampon et appliquer une pommade ophtalmique (Bepanthen, Bayer) aux yeux du rat.
  4. Rasage et désinfecter l'abdomen du rat et d'....

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Résultats

Histologie

Au cours de leucocytes AR, à savoir principalement les lymphocytes T sont recrutés dans la greffe, alors que la gravité du rejet se traduit par le degré d'inflammation. Dans le (PAS) coloration acide périodique Schiff représenté ici (Figure 1), l'allogreffe rénale montre des signes histologiques significatives de AR, à savoir glomérulite, tubulite, endothelialitis et l'infiltration du greffon (Figure 1, ATX POD4) (POD = jour post.......

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Discussion

Imagerie TEP-FDG est une nouvelle option pour le diagnostic de rejet aigu. En raison de sa nature non invasive et précise, la TEP-FDG est avantages par rapport aux diagnostics classiques de la biopsie au trocart. Contrairement à la taille limitée de l'échantillon d'une biopsie, une analyse FDG-PET toute la greffe. En outre, on peut l'appliquer aux patients sous traitement anticoagulant, et l'on peut effectuer des mesures PET répétitive par exemple pour surveiller l'efficacité du traitement <.......

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Déclarations de divulgation

Aucun conflit d'intérêt déclaré.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par la Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB 656, Münster, en Allemagne, des projets C7 et C6) et la IZKF Münster (de l'unité centrale SMAP). Les auteurs sont reconnaissants à Truc Van Le, Anne Kanzog, Ute Neugebauer, Wiebke Gottschlich et Priebe romaine pour une excellente assistance technique et de Daniel Burkert et Sven Fatum pour la production de radiotraceurs.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Équipement
Porte-aiguille Mathieu - 14 cmFine Science Tools12010-14
Porte-aiguille micro-chirurgical Castroviejo - 9 cmFine Science Tools12061-01
Ciseaux chirurgicaux - Tranchants_épointésFine Science Tools14001-12
Ciseaux à iris ToughCut droits - 11,5 cmFine Science Tools14058-11
Ciseaux à ressort Vannas pour étudiantsFine Science Tools91500-09
Ciseaux à ressort Vannas - Lames de 3 mmFine Science Tools15000-00
Pinces à tissus pour étudiants - 1x2 dents - 12 cmFine Science Tools91121-12
Pinces Dumont SS-45 - Inox MedicalFine Science Tools11203-25
Applicateur de clips micro-Serrefine avec verrouFine Science Tools18056-14
Micro-Serrefine 6 mm x 1 mmFine Science Tools18055-03
Micro-Serrefine 4 mm x 0,75 mmFine Science Tools18055-04
Réactif
Isoflurane (par ex. Forene 100 % v/v)Abott
Antiseptique cutané (par ex. Octeniderm)Schülke
Povidone iodée (par ex. Betaisodona)Mundipharma
Pommade ophtalmique (par ex. Bepanthen)Bayer
Buprénorphine (par ex. Temgesic)RB Pharmaceuticals
Solution de perfusion HTK (par ex. CUSTODIOL HTK)Dr. Franz Köhler Chemie
Fil chirurgical Mersilene 0EthiconEH6665E
Fil chirurgical Mersilene 4-0EthiconEH6732H
Fil chirurgical Prolene 6-0Ethicon8697H
Fil chirurgical Ethilon 9-0Ethicon2809G
Fil de soie chirurgical 5-0Vömel14739
Canule (par ex. Microlance 3, 27G ¾)BD302200

Références

  1. Wu, O., Levy, A. R., Briggs, A., Lewis, G., Jardine, A. Acute rejection and chronic nephropathy: a systematic review of the literature. Transplantation. 87, 1330-1339 (2009).
  2. Miller, B. F., Gonzales, E., Wilchins, L. J., Nathan, P. Kidney transplantation in the rat. Nature. 194

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Réimpressions et autorisations

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