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Article de méthode

PRP comme une nouvelle approche pour prévenir l'infection: Préparation et

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DOI :

10.3791/50351

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9 avril 2013

Dans cet article

Résumé

Implant associée à l'infection est une complication clinique importante. Cette étude décrit une approche basée sur plasma riche en plaquettes (PRP) pour prévenir les infections associées aux implants, présente le protocole pour la préparation de PRP avec la concentration de plaquettes constante, et rend compte des propriétés nouvellement identifiés antimicrobiennes de PRP et les protocoles connexes pour examiner de telles propriétés antimicrobiennes In vitro.

Résumé

Implant associée à l'infection devient de plus en plus difficile pour l'industrie des soins de santé dans le monde entier en raison de la résistance croissante aux antibiotiques, la transmission de bactéries résistantes aux antibiotiques entre les animaux et les humains, et le coût élevé du traitement des infections.

Dans cette étude, nous décrivons une nouvelle stratégie qui pourrait être efficace dans la prévention des infections associées aux implants basée sur les propriétés antimicrobiennes potentielles de plasma riche en plaquettes (PRP). En raison de ses propriétés bien étudiées pour favoriser la cicatrisation, PRP (un produit biologique) a été de plus en plus utilisées pour des applications cliniques, y compris les chirurgies orthopédiques, chirurgies parodontales et orale maxillo-faciale, la chirurgie, la chirurgie plastique, médecine du sport, etc

PRP pourrait être une alternative de pointe pour traitements antibiotiques conventionnels en matière de prévention des infections associées implant. L'utilisation de PRP peut être avantageux par rapport aux traitements antibiotiques conventionnels scnce PRP est moins susceptible d'induire une résistance aux antibiotiques et PRP antimicrobienne et la guérison des propriétés favorisant peut avoir un effet synergique sur la prévention des infections. Il est bien connu que les agents pathogènes et les cellules humaines sont en compétition pour les surfaces de l'implant, et les propriétés de PRP de guérison de promotion pourrait améliorer la fixation des cellules humaines réduisant ainsi les chances d'infection. En outre, le PRP est intrinsèquement biocompatible et sécuritaire et exempt de risque de maladies transmissibles.

Pour notre étude, nous avons sélectionné plusieurs souches bactériennes cliniques qui sont généralement trouvés dans les infections orthopédiques et a examiné si PRP a les propriétés in vitro antimicrobiens contre ces bactéries. Nous avons préparé PRP en utilisant une approche qui permet centrifugation deux fois la même concentration plaquettaire à obtenir pour tous les échantillons. Nous avons obtenu des résultats cohérents antimicrobiens et a constaté que PRP a une forte propriétés in vitro antimicrobiens contre les bactéries comme methicillin sensible et résistant à la méthicilline Staphylococcus aureus, streptocoques du groupe A, et Neisseria gonorrhoeae. Par conséquent, l'utilisation de PRP peut avoir le potentiel pour prévenir l'infection et à réduire le besoin de coûteux traitement post-opératoire de l'implant infections nosocomiales.

Introduction

Implant associée à l'infection est une complication clinique importante. Staphylococcus aureus (S. aureus) est l'un des microorganismes les plus fréquemment isolés à partir implant infections nosocomiales. Il est capable de produire un biofilm qui recouvre les surfaces des implants et peut conduire à l'infection de 1,2 résistante aux antibiotiques. Traitement des infections associées aux implants nécessite souvent une hospitalisation à long terme pour débridements répétés et prolongés thérapie parentérale d'antibiotiques. En cas de résistance aux antibiotiques, le retrait de l'implant peut être nécessaire. La résistance croissa....

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Protocole

1. Préparation et activation du PRP

1,1 prélever du sang

  1. Anesthésier le lapin par inhalation d'isoflurane (2% de O 2 pour l'induction et 1% pour la maintenance).
  2. Dessinez 2 ml 0,129 M citrate trisodique (une solution anticoagulant) dans une seringue de 20 ml. La solution de citrate trisodique est préparée par dissolution de 1,897 g de tri-sodium citrate dans 50 ml H 2 O distillée et filtrer avec un filtre stérile de 0,22 um.
  3. Stériliser l'oreille de lapin à l'aide d'éthanol à 70%.
  4. Prélever du sang (par exemple 5 ml) à partir de la veine de l'oreill....

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Résultats

Le PRP est reproductible préparés en utilisant une approche centrifugation deux fois (Figure 1). PRP est considérée comme présentant une forte (jusqu'à 100 fois la réduction de UFC) dans les propriétés antimicrobiennes in vitro contre les staphylocoques résistants à la S. méthicilline (SARM) (figure 3), qui se trouve couramment dans les hôpitaux à travers le monde 14. De même, le PRP a de fortes propriétés antimicrobiennes contre la méticilline .......

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Discussion

Plasma riche en plaquettes a été de plus en plus utilisées pour des applications cliniques en raison de ses propriétés favorisant la guérison 15-17. Dans la présente étude, le PRP a été présentée comme une nouvelle approche pour la prévention des infections. Le PRP a été constaté que de fortes propriétés antimicrobiennes contre le SARM, SASM, streptocoque du groupe A, et Neisseria gonorrhoeae. Les principaux avantages de la PRP, par rapport à des traitements antibiotiques conventionnels, pou.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent n'avoir aucun conflit d'intérêts financiers.

Remerciements

Les auteurs remercient Therwa Hamza, John E. Tidwell, Nina Clovis, et Suzanne Smith pour son aide expérimentale et Suzanne Smith pour la relecture. Les auteurs remercient également Jean Thomas, Ph.D. de fournir les isolats bactériens cliniques et John B. Barnett, PhD, pour son soutien et à l'utilisation du laboratoire de sécurité biologique au Département de microbiologie, d'immunologie et de biologie cellulaire à l'Université West Virginia. Les auteurs tiennent à remercier le soutien financier de l'ostéosynthèse et Trauma Care Foundation et la National Science Foundation (# 1003907). Expériences de microscopie et analyse d'images ont également ét....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Thrombine bovineKing Pharmaceuticals, Inc60793-215-05Thrombine (origine bovine)
Chlorure de calciumKing Pharmaceuticals, Inc60793-215-05Chlorure de calcium à 10 %
ÉthanolSigma-AldrichE7023
IsofluraneBaxter1001936060
Mueller Hinton bouillonBecton, Dickinson and Company275710
Solution saline tamponnée au phosphateSigma-AldrichD8662
Citrate tri-sodiqueSigma-AldrichW302600
Gélose tryptiquede soja Fisher ScientificR01202
CentrifugeuseKendro Produitsde laboratoire 750043077
Filtre à seringueMilliporeSLGP033RS

Références

  1. Gristina, A. G. Biomaterial-centered infection: microbial adhesion versus tissue integration. Science. 237, 1588-1595 (1987).
  2. Gristina, A. G., Costerton, J. W. Bacterial adherence to biomaterials and tissue. The significance of its role in....

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Réimpressions et autorisations

Étiquettes

Plasma riche en plaquettespréparation du PRPinoculum bactérienactivation par la thrombineunités formant coloniesréduction des UFCdouble centrifugationStaphylococcus aureus résistant à la méthicillinepropriétés de cicatrisation des plaies