Rapides à haut débit amylose Détermination dans lyophilisé échantillons de pommes de terre de tubercules

Résumé

Ce protocole décrit un procédé colorimétrique haut à travers mettre qui repose sur la formation d'un complexe entre l'iode et les chaînes de molécules de glucose de l'amidon. Iode forme des complexes avec les deux amylose et l'amylopectine dans de longues chaînes. Après l'addition d'iode à un échantillon d'amidon, l'absorption maximale de l'amylose et de l'amylopectine se produit à 620 et 550 nm, respectivement. Le ratio amylose / amylopectine peut être estimé à partir du rapport des valeurs d'absorbance 620 nm et 550 et en les comparant à une courbe standard dans laquelle les concentrations connues spécifiques sont tracées en fonction des valeurs d'absorption. Ce débit élevé, méthode peu coûteuse est fiable et reproductible, permettant l'évaluation des grandes populations de clones de pommes de terre.

Résumé

Ce protocole décrit un procédé colorimétrique haut à travers mettre qui repose sur la formation d'un complexe entre l'iode et les chaînes de molécules de glucose de l'amidon. Iode forme des complexes avec les deux amylose et l'amylopectine dans de longues chaînes. Après l'addition d'iode à un échantillon d'amidon, l'absorption maximale de l'amylose et de l'amylopectine se produit à 620 et 550 nm, respectivement. Le ratio amylose / amylopectine peut être estimé à partir du rapport des valeurs d'absorbance 620 nm et 550 et en les comparant à une courbe standard dans laquelle les concentrations connues spécifiques sont tracées en fonction des valeurs d'absorption. Ce débit élevé, méthode peu coûteuse est fiable et reproductible, permettant l'évaluation des grandes populations de clones de pommes de terre.

Introduction

Environ 80% du poids frais d'un tubercule de pomme de terre est de l'eau; la quasi-totalité de la matière sèche restante est l'amidon ^1. La plupart de l'amidon (70%) est composé d'amylopectine, tandis que le reste est de l'amylose. Le rapport entre l'amylose et l'amylopectine est la propriété la plus importante influence sur les propriétés physiques de l'amidon. L'amylose est un alpha 1-4 chaîne linéaire de glucose, tandis que l'amylopectine est un linéaire alpha 1-4 chaîne alpha 1-6 branches ^2. Des méthodes telles que la liaison de l'iode, calorimétrie différentielle à balayage (DSC), la Chromatog....

Protocole

Une. Détermination de la pomme de terre amylose Tuber amidon

1. Peler et couper les tubercules frais en petits cubes.
2. Placez les cubes de pommes de terre dans de petits sacs bruns et stocker pendant une nuit à -80 ° C.
3. Transfert cubes de pommes de terre dans des sacs de nylon et de lyophilisation.
4. Après lyophilisé, broyer l'échantillon de pommes de terre en poudre en utilisant un mortier et un pilon ou un broyeur Wiley.
5. Dans un tube de 50 ml, ajouter 20 à 30 mg de l'échantillon de sol tubercule lyophilisée.
6. Préparer une solution de 45% (p / v) d'acide perchlorique (mélange 24,4 ml d'acide perch....

Résultats

La courbe d'étalonnage construite à partir des données masquées de différentes solutions de concentration amylose / amylopectine montre ratios d'absorbance approximatif allant de 0,7 à 1,6 (Tableau 1). Une ligne de tendance de régression linéaire à partir de ces données sont ensuite utilisées pour déduire la teneur en amylose dans lyophilisés échantillons de pommes de terre (figure 1).

L'environnement de production de l'usine a un certain eff.......

Discussion

La teneur en amylose dans les tubercules de pomme de terre est généralement comprise entre 20-35% ^7,8. Si la plupart des valeurs sont en dehors de cette gamme, tenir compte de ces erreurs possibles: 1) les données brutes ont été utilisés à la place des données masquées pour la construction de la courbe standard amylose / amylopectine; 2) les données brutes ont été utilisés à la place des données masquées pour la détermination de la teneur en amylose ratios / amylopectine à partir des échantillons de pommes de.......

Matériaux

Equipment

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Réactifs
Amylose	Sigma	859656
Amylopectine	Sigma	A8515
Acide perchlorique 60 %	Sigma	311413	Très dangereux pour la peau et les yeux
Iode	Sigma	23214TD
Iodure de potassium	Sigma	08625JE
Lecteur de plaques	Bio Tek	ELx800

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