Nous décrivons la fabrication de pastilles comprimées d'hormones, ainsi que l'implantation chirurgicale sous-cutanée à des souris. Cette stratégie peut être combinée avec la croissance de xénogreffes de cellules et de tissus sous la capsule rénale de souris nudes athymiques pour évaluer la carcinogenèse hormonale et la régulation de la croissance bénigne de la prostate.
Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.
Article de méthode
Rénale Capsule xénogreffe sous-cutanée et Pellet implantation pour l'évaluation de la carcinogenèse prostatique et l'hyperplasie prostatique bénigne
Dans cet article
Résumé
Résumé
Nouvelles thérapies pour les deux maladies courantes de la prostate, le cancer de la prostate (AEPA) et l'hyperplasie bénigne de la prostate (HBP), dépendent de façon critique sur les expériences évaluant leur régulation hormonale. Hormones stéroïdes sexe (notamment les androgènes et oestrogènes) sont importants dans érythroblastopénie et l'HBP; nous sondons leurs rôles respectifs dans l'induction de la croissance de la prostate et la cancérogenèse chez la souris avec des expériences à l'aide de pastilles d'hormones compressés. Hormones et / ou de drogues pastilles sont facilement fabriqués avec une presse à pellets, et chirurgicalement implantés dans le tissu sous-cutané de l'hôte chez les souris mâles. Nous décrivons également un protocole pour l'évaluation de la carcinogenèse hormonale sous-cutanée en combinaison avec l'hormone culot implantation de recombinants xénogreffe de cellules de la prostate sous la capsule rénale de souris immunodéprimées. En outre, l'hormone sous-cutanée culot implantation, en combinaison avec capsule rénale xénogreffe de tissu de BPH, est utile pour mieux comprendre la régulation hormonale de prost bénignemangé la croissance, et de tester de nouvelles thérapies ciblant sexe stéroïde voies hormonales.
Introduction
Cancer de la prostate (AEPA) et l'hyperplasie bénigne de la prostate (HBP) sont des fardeaux pour la santé. L'érythroblastopénie est le deuxième cancer d'organe solide la plus fréquente chez les hommes et une cause majeure de cancer liés mort 1. L'HBP est également très fréquente chez les hommes plus âgés, et il est estimé que la manifestation clinique de l'HBP, la baisse des symptômes des voies urinaires (TUBA), aura une incidence sur 50-90% des hommes 2. Alors que les androgènes et oestrogènes sont connus pour être important dans érythroblastopénie et BPH, notre compréhension des mécanismes hormonaux qui sous-tendent la car....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Protocole
Une. Préparation de comprimé d'hormone / Drug Pellet
- Cette procédure doit être effectuée sous une hotte de sécurité chimique tout en portant une blouse de laboratoire, des gants, un masque, des lunettes de sécurité, et le chapeau. Pour éviter toute contamination croisée, il est essentiel que l'équipement de fabrication de granulés est nettoyé à fond avec de l'éthanol 70% avant et après la fabrication de chaque type de pastille.
- En utilisant une échelle d'analyse et de peser papier, mesurer la quantité désirée de poudre d'hormone / médicament. Environ 5% de matière supplémentaire est recommandé pour accueillir perte pendant le ....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Résultats
En fonction de l'hypothèse à tester, capsule rénale xénogreffe de recombinants de tissus ou de cellules peut être effectuée en vase clos ou sous-cutanée en combinaison avec l'hormone culot implantation. Un schéma d'une expérience hypothétique combinant rénale expérience capsule de xénogreffe sous-cutanée de l'hormone culot implantation est illustrée sur la figure 1. Une variété de substances pulvérulentes et / ou cristallins peut être utilisé dans la fabrication de pastilles compri.......
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Discussion
Ce document et le protocole décrit ici décrivent la fabrication de l'hormone comprimé et / ou granulés de drogue, et la procédure chirurgicale pour sous-cutanée culot implantation de souris. Selon la question de recherche à traiter, cette technique peut être réalisée individuellement ou en combinaison avec capsule rénale xénogreffe de cellules de la prostate greffes recombinantes ou des xénogreffes de tissus de la prostate, qui sont des techniques largement utilisées dans la recherche de la prostate 17-19.
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Déclarations de divulgation
Les auteurs déclarent qu'ils n'ont aucun intérêt financier concurrents.
Remerciements
Les auteurs tiennent à remercier tous les membres du laboratoire Ricke, passés et présents. Nous remercions Calvin Patten, Jr., DVM et Brigitte Raabe, DVM, des commentaires utiles sur le protocole. Nous tenons à remercier le NIDDK, NCI, et NIEHS pour leur soutien financier pour ces études: R01DK093690, R01CA123199, RC2ESO18764. TMN est un stagiaire dans le Programme de formation scientifique médicale à l'Université de Rochester financé par le NIH GM07356 T32, le NIH sous Ruth L. Kirschstein Prix national F30DK093173 Service de recherche soutient également ce projet. CDV est soutenu par T32CA157322 et ABT est soutenu par T32ES007015 à l'Université de Wisconsin....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Presse à granulés | PARR Industries | 2815 | 3mm Poinçon & Jeu de matrices |
| Balance analytique | Ohaus | 1918302 | Voyager ou autre |
| bec Bunsen | Fisher Scientific | 03-962Q | |
| Microscope de dissection | Leica | L2 | |
| Deltaphase Pad Kit (cire chauffante) | Braintree Scientific | 39DP | Alternative à un coussin chauffant électrique |
| Stérilisateur à billes chaudes | F.S.T.18000-45 | ||
| Vaporisateur d’isoflurane | Supera Anesthesia Innov | VAP3000 | |
| Chambre à induction | Supera Anesthesia Innov | RES644 | |
| F/AIR Bidon | Supera Anesthesia Innov | 80120 | |
| 4 ports Collecteur | Supera Anesthesia Innov | RES536 | |
| Circuits de réinspiration | Supera Anesthesia Innov | CIR529 | |
| Raccords d’entrée/sortie Supera | Anesthesia Innov | VAP203/4 | |
| Pression Reg/Gauge | Supera Anesthesia Innov | OXY508 | |
| Débitmètre d’oxygène | Supera Anesthesia Innov | OXY660 | |
| 21mm Tube transparent | Supera Anesthesia Innov | 301-150 | |
| Cône de nez de petites souris | Supera Anesthesia Innov | ACC526 | |
| Blouse chirurgicale stérile | Midwest Vet Supply | 350.79866.2 | |
| Masque chirurgical | Midwest Vet Supply | 350.50111.2 | 2 plis avec boucles d’oreille |
| Gaze stérile | Midwest Vet Supply | 001.14100.2 | 2 x 2 pouces |
| Gants stériles | Kimberly Clark | 55092 | |
| Bouffant | Midwest Vet Supply | 001.27100.2 | |
| Applicateur d’embout en coton | Midwest Vet Supply | 001.06220.2 | |
| Lavage chirurgical Scrub Wash | Midwest Vet Supply | 733.80010.3 | |
| Champs stériles (fenestrés) | General Econopak, Inc | 88VCSTF | |
| REAGENTS | |||
| Cholesterol | Sigma-Aldrich | C-3292 | |
| Testosterone Proprionate | Sigma-Aldrich | T-1875 | |
| 17β ;-estradiol | Sigma-Aldrich | E-2758 | |
| Isoflurane | Midwest Vet Supply | 193.33161.3 | |
| Carprofen | Midwest Vet Supply | 193.70200.3 | Injectable (Rimadyl) |
| Betadine | Webster Veterinary | 07-836-3379 | |
| Saline stérile | Midwest Vet Approvisionnement | 193.74504.3 | NaCl 0.9 %, Injectable |
| INSTRUMENTS CHURRURGICAUX | |||
| Straight Sharp/Blunt Ciseaux | Outils scientifiques fins (F.S.T.) | 14054-13 | |
| Pince Graefe (dentelée, dentée, courbée) | F.S.T. | 11055-10 | |
| Ciseaux à iris fins | F.S.T. | 14090-09 | |
| Scalpel Graefe | F.S.T. | 10071-12 | |
| Pince Dumont #5 | F.S.T. | 11251-20 | |
| Pipettes Pasteur en verre | Fisher Scientific | S67050 | de 5" de longueur |
| (dentelée, incurvée) | F.S.T. | 11052-10 | |
| Pince Graefe (dentelée, droite) | F.S.T. | 11050-10 | |
| Vicryl Suture | Midwest Vet Supply | 295-92100.2 | 4-0, FS-2, Porte-aiguille résorbable |
| avec action de ciseaux | F.S.T. | ||
| Clips de plaie | Braintree Scientific | ACS CS | Peut utiliser des clips de 7 mm ou 9 mm |
| Reflex Wound Clipper | F.S.T. | 12031-09 | Correspond à la taille du clip enroulé |
| Would Clip Remover | F.S.T. | 12033-00 | de |
| stérilisation | F.S.T. | 20810-01 | Tout récipient autoclavable fera l’affaire |
| Seringue avec aiguille | BD | 148292C | 1cc, 25Gx1 |
| Ear Tag Applicator | National Band Tag Co. | 1005s1 | Alternative à l’encoche d’oreille Étiquettes d’oreille |
| pour petits animaux | National Band Tag Co. | Référence 1005-1 |
Références
- Cancer Facts Figures. 4, American Cancer Society. (2010).
- McVary, K. T. BPH: epidemiology and comorbidities. Am. J. Manag. Care. 12, S122-S128 (2006).
- Nicholson, T. M., Ricke, W. A.
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Réimpressions et autorisations
