Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.

Article de méthode

In utero mesure de la fréquence cardiaque chez la souris par M mode non invasive échocardiographie

11.2K vues

⸱

DOI :

10.3791/50994

⸱

22 novembre 2013

Dans cet article

Résumé

Ultra-haute ultrasons de fréquence est un outil d'imagerie en temps réel puissant pour examiner les anomalies cardiaques chez les petits animaux. Son caractère non invasif permet de maintenir l'état physiologique de l'embryon. Ici, nous montrons l'utilisation du mode M ultrasons pour mesurer les taux d'embryons de coeur à -18,5 in utero.

Résumé

Cardiopathie congénitale (CHD) est la cause non infectieuse la plus fréquente de décès à la naissance. L'incidence de la maladie coronarienne varie de 4 à 50/1 000 naissances (maladie et les estimations régionales des blessures, de l'Organisation mondiale de la Santé, 2004). Chirurgies qui compromettent souvent la qualité de vie sont nécessaires pour corriger des malformations cardiaques, nous rappelant l'importance de trouver les causes de la maladie coronarienne. Modèles de souris mutantes et de la technologie de l'imagerie en direct sont devenus des outils essentiels pour étudier l'étiologie de cette maladie. Bien que les méthodes avancées permettent l'imagerie en direct de cœur anormaux chez les embryons, les états physiologiques et hémodynamiques de ces derniers sont souvent compromises en raison de procédures chirurgicales et / ou longs. L'imagerie par ultrasons non invasive, cependant, peut être utilisé sans exposition chirurgicale des embryons, en maintenant ainsi leur physiologie. Ici, nous utilisons simplement l'échographie en mode M pour évaluer les taux d'embryons de coeur à -18,5 in utero. La détection de taux anormaux de coeur est en effet un bon indicateurteur de la dysfonction du cœur et constitue donc une première étape dans l'identification des défauts de développement pouvant conduire à une insuffisance cardiaque.

Introduction

CHD est la cause non infectieuse la plus fréquente de décès à la naissance 1. Chirurgies multiples sont souvent nécessaires pour corriger les défauts structurels dans les sujets dont la qualité de vie peut rester compromis 1. Les enfants atteints de cardiopathies congénitales développent fréquemment des troubles neurologiques, même si elles n'ont pas subi une intervention chirurgicale, indiquant importante des conséquences sur le développement in utero 2,3. Les facteurs génétiques et environnementaux, tels que l'exposition à des virus ou des produits chimiques (alcool) pendant la grossesse, cause CHD. Étudier....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Protocole

Toutes les procédures indiquées dans ce protocole ont été approuvés par le Comité de protection des animaux de l'IRCM.

Une. Système à ultrasons et préparation station

  1. Démarrer le système d'imagerie par ultrasons et de connecter la tête de balayage ainsi que l'unité de commande de la physiologie selon les instructions du fabricant (figure 1). Choisir le programme de mesure cardiaque et la tête de balayage qui correspond au transducteur de 30 MHz.
  2. Remplir l'embout de la tête de balayage avec de l'eau désionisée. Éviter les bulles d'air où ils interfèrent avec la résolution d'....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Résultats

Le procédé ci-dessus a été utilisée pour évaluer l'impact de la présence ou de l'absence de la furine de sérine protéase dans des cellules endotheliales sur le taux d'embryons de souris de coeur à -18,5 in utero. Furine appartient à la famille des proprotéines convertases (PC) que précurseurs de protéines clivent après résidus basiques. Furine et ses substrats sont des protéines sécrétoires et le clivage peut se produire dans l'appareil de Golgi, les endosomes ou à la surface de la cellule. Subs.......

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Discussion

Mode M échocardiographie est une méthode simple et efficace pour mesurer des taux cardiaques in utero d'embryons de souris. Transducteurs disponibles dans le commerce offrent une résolution suffisante pour visualiser petits cœurs qui battent. Ainsi, ils permettent une mesure très précise de la fréquence cardiaque, en comparaison avec d'autres méthodes telles que la mesure d'impulsion, et peuvent se substituer à haute résolution vidéo-microscopie. Cependant, les outils actuels ne permettent .......

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Déclarations de divulgation

Aucun conflit d'intérêt déclaré.

Remerciements

Nous remercions Manon Laprise à la formation en échocardiographie et Ann Chamberland pour prendre les photos présentées sur les figures 1 et 2. Ce travail a été soutenu par les Instituts canadiens de recherche en santé subvention MOP 44363 et président 950-216684 Canada.

....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
IsofluranePharmaceutical Partners of Canada Inc.CP0406v21-chloro-2,2,2-trifluoroéthyl difluorométhyl éther
Gel à ultrasonsParker Laboratories Inc.transparentes
Parker Laboratories Inc.Spectra 360
Gel ophtalmiqueNovartisTear-Gel
Crème dépilatoireChurch Dwight Co., Inc.Nair
Tondeuse à
Échange gaze/cotonQ-tips
Marqueur
Haute résolution In vivo Système d’imagerie par ultrasonsVisual SonicsVevo770
30 MHzSonde Visual SonicsRMV707B
Plate-forme d’imagerie et unité de contrôle de physiologieVisual Sonics
Système anesthésiqueCyprane North America Inc.
Lampe
Gel d’électrodes Aquasoniccheveuxpermanent312462 chauffante infrarouge

Références

  1. Hoffman, J. I., Kaplan, S. The incidence of congenital heart disease. J. Am. Coll. Cardiol. 39, 1890-1900 (2002).
  2. Miller, S. P., et al. Abnormal brain development in newborns with congenital heart disease. N. Engl. J. Med. 357, 1928-1938 (2007).
  3. Bru....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Réimpressions et autorisations

Étiquettes

Fréquence cardiaque in uteroimagerie d'embryons de sourisultrasons non invasifscardiopathie congénitalefréquence cardiaque embryonnairemesure cardiaquegel ultrasoniquegénotypage d'embryonsphysiologie fœtale de la souris