Chronique à long terme<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; Infection des voies respiratoires chez les souris

Marcella Facchini; Ida De Fino; Camilla Riva; Alessandra Bragonzi

doi:10.3791/51019

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Article de méthode

Chronique à long terme

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DOI :

10.3791/51019

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17 mars 2014

Marcella Facchini¹^,² , Ida De Fino¹^,² , Camilla Riva¹^,² , Alessandra Bragonzi¹

¹Infections and Cystic Fibrosis Unit, Division of Immunology, Transplantation and Infectious Diseases, San Raffaele Scientific Institute, ²Italian Cystic Fibrosis Research Foundation

Dans cet article

Résumé

Nous décrivons la méthode agar-perles d'établir une infection persistante chronique des voies respiratoires à Pseudomonas aeruginosa à long terme dans le modèle de la souris.

Résumé

Un modèle de souris de l'infection chronique des voies respiratoires est un atout majeur dans la fibrose kystique (FK) la recherche, mais il ya un certain nombre de préoccupations concernant le modèle lui-même. Les premières phases de l'inflammation et de l'infection ont été largement étudiés en utilisant le modèle d'agar-perles souris Pseudomonas aeruginosa, tandis que peu de rapports ont mis l'accent sur l'infection chronique à long terme in vivo. Le principal défi pour l'infection chronique à long terme reste la faible charge bactérienne par P. aeruginosa et le faible pourcentage de semaines de souris infectées après l'épreuve, ce qui indique que les cellules bactériennes sont progressivement effacés par l'hôte.

Cet article présente une méthode pour obtenir une infection chronique efficace à long terme chez la souris. Cette méthode est basée sur l'incorporation de la P. souches cliniques aeruginosa dans l'agar-perles in vitro, suivie par instillation intratrachéale chez les souris C57Bl/6NCrl. Infection pulmonaire bilatérale est associée à plusieurs mesurables lecture-out, y compris la perte de poids, la mortalité, l'infection chronique, et la réponse inflammatoire. Le P. souche clinique aeruginosa RP73 a été préférée à la souche de laboratoire de référence de PAO1 car elle a entraîné une mortalité relativement bas, des lésions plus sévères, et l'infection chronique plus élevé. P. aeruginosa colonisation peut persister dans le poumon pendant plus de trois mois. Pathologie pulmonaire murin ressemble à celle de patients atteints de mucoviscidose avec une maladie pulmonaire chronique avancée.

Ce modèle murin imite plus étroitement le cours de la maladie chez l'homme et peut être utilisé à la fois pour des études sur la pathogenèse et pour l'évaluation de nouvelles thérapies.

Introduction

La fibrose kystique (FK) est une maladie génétique causée par des mutations dans le régulateur de la conductance transmembranaire de la fibrose kystique (CFTR) de gène. Ce gène code pour un canal chlorure exprimé sur la membrane de la plupart des cellules épithéliales. Dilatation des bronches, quantité de mucus et parenchymateuse destruction causée principalement par des infections à Pseudomonas aeruginosa conduit progressivement à une maladie pulmonaire grave et de mortalité dans la plupart des patients atteints de mucoviscidose ^1. Comprendre la pathogenèse de la CF et le développement de nouvelles thérapies reposent sur un modèle animal avec car....