Sürekli büyüyen fare kesici diş epitel kök hücreler (DESCs) diş dokularının yenilenmesini eğitim için bir model sağlar. Sürekli ve güvenilir bir şekilde kesici bu hücrelerin elde edilmesi ve in vitro ile genişletilmesi için sağlam bir sistem burada bildirilmektedir.
Diş yenilenme ve yenileme altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmaların anlaşılması büyük ilgi 1-4 bir konu haline, ve fare kesici, bu işlemler için bir model sağlar sahiptir. Bu olağanüstü organ hayvanın hayatı boyunca sürekli büyür ve (dil doğru) (dudağa doğru) labial ve lingual servikal döngü (CL) bölgeleri muhafaza yetişkin kök hücrelerin aktif havuzlarından gerekli tüm hücre tiplerini oluşturur. Labiyali CL sadece diş kök hücreler labiyali yüzeyinde emaye, dişlerin dış kaplama oluşturmak ameloblastlar sebebiyet verir. Bu asimetrik mine teşekkülü kesici ucunda aşınma sağlar ve proksimal dişe atalarıdır ve kök hücreler diş dokuları sürekli doldurulan emin olun. Bu in vitro progenitör veya kök hücreleri izole ve büyümek için yeteneğini kendi genişleme sağlar ve saat gibi in vivo elde değil çok sayıda deney, kapılarını açıyorpotansiyel kök hücre düzenleyici faktör üksek throughput testi. Burada, biz tarif ve fare kesici dişin labial CL kültür hücreleri güvenilir ve tutarlı bir yöntem ortaya koymaktadır.
Omurgalıların eşsiz özelliklerinden biri diş evrimdir. Moleküler yollar ve bu organın ilgili morfolojik uzmanlık gelişim ve evrimsel biyologlar 5 de dahil olmak üzere, çeşitli açılardan incelenmiştir gibi diş, araştırma birçok alanda önemli bir model sistem haline gelmiştir. Daha yakın zamanda, rejeneratif tıp alanında bir model olarak diş kullanarak değerli bilgiler kazanmaya başladı. Özellikle, diş epitel kök hücrelerin keşif önemli bir ilerleme 6-13 olmuştur.
Tüm kemirgenler erişkin kök hücre yönetmeliği incelemek için, bu dişlere erişilebilir bir model sistemi yapım olan büyüme kök hücreleri tarafından körüklenen sürekli büyüyen kesicilerin sahip. Genetik soy izleme deneylerinde 8,9,12,14 ardından 1970'lerde 10,11 etiketleme deneyleri, DESCs kesici proksimal bölgesinde bulunan olduğunu göstermiştir. KökHücre labiyali servikal döngü (CL) olarak bilinen, varsayılan niş, dışarı labial yan hareket epitel bölmeye döl ve geçiş yalıtım (TA) hücreleri (Şekil 1) adı verilen bir hücre popülasyonuna katkıda bulunur. Özellikle, DESCs dış mine epiteli (OEE) ve Stellate retikulum (SR) 8,9,14 ikamet ve iç mine epiteli (IEE) sonra hareket hücre döngüsü sınırlı sayıda ilerlerken TA hücrelere yol açar ve distal kesici uzunluğu (Şekil 1) boyunca. Fare dişe ayırt ameloblastlar tek bir günde 15,16 yaklaşık 350 mikron dikkate değer bir oranda kesici dişin boyunca distale hareket devam ediyor. Onlar hareket ettikçe, hücrelerin olgun ameloblastlar ve stratum intermedium (SI) hücrelerin içine ayırt. Emaye matris tam kalınlık olarak biriktirilmesi sonra ameloblastlar birçok apoptoz geçirir, ve geriye kalan hücreler boyutu küçültmek ve emaye olgunlaşmasını düzenleme <> 17 sup. Gibi SR gibi Labiyal CL, diğer hücre tiplerinin soy daha az açıktır ve mezenşimin 18 ve lingual CL kök hücrelerin ilişkin veriler sadece ortaya çıkmaya başlıyor.
Fare modeli kullanılarak kesici, grup bir dizi genetik yollar ve doğal kök hücre bazlı bir organ yenilenmesine katılan hücre biyolojik süreçleri aydınlatmak için çalıştık. Bununla birlikte, dudak CL 5,000 birincil hücreler zorlu çalışma yapar kesici fare başına olduğu tahmin hücrelerin nispeten küçük bir sayısını ihtiva etmektedir. Bu nedenle, kültür çalışmaları yapılmış ve in vivo olarak elde olmayan deneysel yaklaşımlar için yeni kapılar açmak için in vitro 6,16,19,20 bu hücreleri genişletmek edilmiştir. En son çalışma, bu hücreler, kendini yenileme ve kültürlendiğinde 13 hücreleri ifade Amelogenin içine ayırt hem göstermiştir. Burada, th için bir yöntem tarif etmekte ve açıklamaktadırfare labiyali CL hücrelerin e güvenilir ve tutarlı bir kültürü.
Epitel hücreleri 40 yıl önce 21-24 başarıyla üzerinde ilk kültürlü idi, ve daha yakın zamanda, epitel kök hücrelerin 25-27 başarılı izolasyon epitel biyoloji bilgimizi ilerlemiştir. Biz yetişkin fare kesici dişlerinin DESCs, diş biyoloji ve mine oluşumuna dair önemli bilgiler verim potansiyeline sahip kök hücrelerin nispeten ilgili yeterli nüfusa izole etmek için bir protokol rapor. Bu protokol, ilk olarak kıl folikülü 28 epitel kök hücre izolasyonu daha ön…
The authors have nothing to disclose.
Yazarlar AZALAN kültürlerle ilk yardım için Xiu-Ping Wang teşekkür ederim. Yazarlar (OH MGC, K08-DE022377-02 AHJ, K12-GM081266 için K99-DE022059 ve ODK R01-DE021420) Ulusal Sağlık Enstitüleri burs ve hibe tarafından finanse edilmektedir.
Forceps, size 5 | Fine Science Tools | 11251-30 | FST by Dumont, Dumoxel, |
Forceps Straight, fine, 3.5 | Roboz | RS5070 | |
Razorblades | Electron Microscopy Services | #71960 | |
Scalpel Handle No.3 | VWR | ||
Feather Blade No. 15 | Electron Microscopy Services | #72044-15 | Surgical Stainless Steel |
Collagenase Type-1 filtered | Worthington Biochemical Corporation | #4214 | |
Insulin syringe | BD | #329424 | |
Accumax | EMD Millipore | #SCR006 | |
DMEM/F12 | Gibco | 11320-033 | |
EGF | R&D | 2028-EG-200 | |
FGF2 | R&D | 233-FB-025 | |
B27 Supplement | Gibco | 10889-038 |