Un modèle de souris de la reconstruction de la base du crâne humain endoscopique a été développé qui crée une interface semi-perméable entre le cerveau et le nez en utilisant des greffes muqueuses nasales. Cette méthode permet aux chercheurs d'étudier à la livraison du système nerveux central de la thérapeutique de haut poids moléculaire qui sont par ailleurs exclus par la barrière hémato-encéphalique lorsqu'il est administré par voie systémique.
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Article de méthode
Heterotopic muqueuse procédure de greffe de médicaments Livraison directe au cerveau chez les souris
Dans cet article
Résumé
Résumé
Livraison d'agents thérapeutiques dans le cerveau est entravée par la présence de la barrière hémato-encéphalique (BHE) qui restreint le passage de composés polaires et de haute masse moléculaire et de la circulation sanguine dans le tissu cérébral. Certains succès de livraison directe chez l'homme a été atteint par l'implantation de cathéters transcrânienne; Cependant cette méthode est très invasive et associée à de nombreuses complications. Une alternative moins invasive consiste à doser le cerveau à travers un implanté chirurgicalement, la membrane semi-perméable telle que la muqueuse nasale qui est utilisé pour réparer des défauts de la base du crâne après la chirurgie endoscopique transnasale tumorale d'élimination chez les humains. transfert des médicaments bien que cette membrane serait effectivement contourner la BBB et diffuser directement dans le cerveau et le liquide céphalorachidien. Inspiré par cette approche, une approche chirurgicale chez la souris a été développée qui utilise une membrane muqueuse septale donneur greffé sur un défaut chirurgical Bureau extra. Ce modèle a été démontré efficacementpermettre le passage de composés de haut poids moléculaire dans le cerveau. Depuis de nombreux médicaments candidats sont incapables de traverser la BHE, ce modèle est utile pour effectuer des essais précliniques de nouveaux traitements pour les maladies neurologiques et psychiatriques.
Introduction
Le traitement d'une maladie neurologique ou psychiatrique est gravement entravée par la présence de la barrière hémato-encéphalique (BHE) qui empêche plus de 95% de tous les agents pharmaceutiques potentiels d'atteindre le système nerveux central 1-3. Par exemple, il a été démontré dérivé des cellules gliales facteur neurotrophique (GDNF) pour être efficace dans le traitement de la maladie de Parkinson lorsqu'il est injecté directement dans le cerveau, mais est inefficace lors de la livraison systémique parce qu'il ne peut pas pénétrer dans le 4-6 du Bureau.
Nombreux approché ont été développées pour ....
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Protocole
Avant la chirurgie assurez-vous que toutes les procédures à effectuer sont approuvés par IACUC et des autorités éthiques ou juridiques supplémentaires et utilisent des pratiques de traitement sans cruauté des animaux. Cela comprend l'utilisation des conditions de chirurgie stériles, anesthésier la souris en utilisant IACUC méthode approuvée, la lubrification des yeux de souris avec une pommade vétérinaire pendant la chirurgie, et fournir des soins post-opératoires. Ne pas procéder à une chirurgie s'il ya une question de savoir si les aspects de la procédure sont approuvés. Toutes les procédures effectuées ici ont été approuvés par l'Université institution....
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Résultats
L'obtention d'un assez grand cloison nasale explant est crucial pour les étapes ultérieures. Ceci peut être réalisé par perçage à l'emplacement sur le crâne de la souris donneuse représenté sur la figure 1a. Coupant le long de ce chemin va produire un explant de la taille suffisante comme le montre la Figure 1b. Si la profondeur de perçage n'est pas assez profond, la greffe sera tronquée et il sera difficile d'obtenir une membrane suffisamment grande pour couvrir l.......
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Discussion
L'étape la plus difficile de la procédure décrite ici est la réussite du transfert d'une membrane muqueuse de taille adéquate sur la surface du cerveau. Cette étape est faite beaucoup plus facile si la cloison nasale récolté est assez grand et bien nettoyée. Si la partie ventrale de la cloison est tronqué, une nouvelle greffe devrait être obtenu. L'angle de perçage doit être perpendiculaire à la tête de la souris pour faire en sorte que la membrane de la muqueuse n'est pas endommagé par le foret. Si un c.......
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Déclarations de divulgation
Benjamin S. Bleier MD est l'inventeur de plomb provisoires méthodes de délivrance de médicaments pour le système nerveux central de recouvrement de brevet.
Remerciements
Cette étude a été financée par la Fondation Mcihael J. Fox pour la recherche 2011 Innovations de réaction rapide de Parkinson Programme de bourses. Les bailleurs de fonds n'ont joué aucun rôle dans la conception de l'étude, la collecte et l'analyse des données, la décision de publier, ou de la préparation du manuscrit.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Souris | Taconic | C57BL/6 | |
| Isoflurane | Piramal Soins de santé | ||
| Ciseaux fins pour étudiants | Outils scientifiques fins | 91461-11 | |
| Perceuse pneumatique | MTI Dental | 333-CB | |
| Mèche | |||
| Pince | Outils scientifiques fins | 91106-12 | |
| Injection de chlorure de sodium à 0,9 % USP | Abbott Laboratories | 4925 | |
| Boîte de Pétri en polystyrène | Fisher | 08-757-12 | pour le stockage temporaire des greffons |
| Stérilisateur à billes | Outils pour les sciences fines | 18000-45 | |
| Système d’oxygène/isoflurane | de la température V720100 | SurgiVet | |
| Physitemp | TCAT-2LV | ||
| Instrument stéréotaxique pour petits animaux | KOPF | Modèle 940 | |
| Pommade | |||
| Rasoir | |||
| Applicateurs à embout de coton | Fisher | 23-400-106 | |
| 7,5 % Providone iode | Bétadine Gommage chirurgical | ||
| 70 % Éthanol | |||
| Lame chirurgicale Feather en acier inoxydable | 2976#10 | ||
| Manche de scalpel - #3 | Fine Science Tools | 10003-12 | |
| 3 % de peroxyde d’Hydogen | pour le nettoyage du | ||
| Adhésif pour tissus Vetbond | 3M | 1469SB | |
| Aiguilles | Becton, Dickinson and Company | 305176 | pointe d’aiguille coupée et utilisée également |
| Seringues | Becton, Dickinson and Company | 309597 | |
| Gants en nitrile | Denville Scientific Inc | G4162 | pour la fermeture de puits et la protection de la greffe |
| 5-0 Fil | |||
| Student Halsey porte-aiguille | Fine Science Tools | 91201-13 | |
| Adhésif | disponible dans le commerce super colle | ||
| Kit de ciment dentaire, 1 lb, rose opaque | Stoelting | 51458 | |
| Isobutane (2-méthylbutane) | Aldrich | M32631 | pour bain de glace carbonique |
| Glace |
Références
- Cardoso, F. L., et al. Looking at the blood-brain barrier: Molecular anatomy and possible investigation approaches. Brain Res. Rev. 64, 328-363 (2010).
- Pardridge, W. M. Drug transport across the blood-brain barrier. J. Cereb. Blood Flow Metab
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Réimpressions et autorisations
