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Article de méthode

Embolique Artère cérébrale moyenne occlusion (MCAO) pour AVC ischémique avec homologues caillots sanguins chez les rats

27.1K vues

DOI :

10.3791/51956

17 septembre 2014

Dans cet article

Avis d’erratum

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Résumé

Dans cet article, nous démontrons une méthode standard pour produire une occlusion embolique de l’artère cérébrale moyenne avec des caillots sanguins homologues (riches en fibrine) chez le rat adulte. Ce modèle imite étroitement l’AVC ischémique humain et convient à l’étude préclinique du traitement thrombolytique de l’AVC ischémique.

Résumé

Cliniquement, la thérapie thrombolytique avec l'utilisation de l'activateur du plasminogène tissulaire recombinant (tPA) reste le traitement le plus efficace pour l'AVC ischémique aigu. Cependant, l'utilisation de tPA est limitée par la fenêtre thérapeutique étroite et par un risque accru de transformation hémorragique. Il est urgent de développer des modèles de temps appropriés pour étudier de nouveaux agents thrombolytiques et des stratégies pour le traitement de l'AVC ischémique. À l'heure actuelle, deux grands types de modèles d'AVC ischémiques ont été développés chez les rats et les souris: intraluminale suture OACM et embolique OACM. Bien que les modèles MCAO via la technique de suture intraluminale ont été largement utilisés dans la recherche de la course mécanisme axé, ces modèles de suture n'imitent pas la situation clinique et ne sont pas adaptés pour les études thrombolytiques. Parmi ces modèles, le modèle OACM embolique imite étroitement AVC ischémique humaine et est adapté pour enquête préclinique d'un traitement thrombolytique. Ce modèle embolique été d'abord développé chez le rat par Overgaard et al. 1 en 1992 et caractérisé en outre par Zhang et al., en 1997 2. Bien embolique OACM a gagné plus d'attention, il ya des problèmes techniques rencontrés par de nombreux laboratoires. Pour répondre aux besoins croissants en matière de recherche thrombolytique, nous présentons un modèle hautement reproductible de embolique OACM chez le rat, qui peut se développer un volume de l'infarctus prévisible dans le territoire de l'ACM. En bref, un tube de PE-50 modifié est doucement avancé à partir de l'artère carotide externe (ECA) dans la lumière de l'artère carotide interne (ICA) jusqu'à ce que la pointe du cathéter atteigne l'origine de la MCA. Par le cathéter, un seul caillot de sang homologue est placé à l'origine de la MCA. Pour déterminer le succès d'occlusion de la MCA, le débit sanguin cérébral régional a été contrôlée, des déficits neurologiques et des volumes d'infarctus ont été mesurées. Les techniques présentées dans le présent document devraient aider les chercheurs à surmonter les problèmes techniques pour la création de ce modèle pour la recherche de la course. </ P>

Introduction

L'AVC est la troisième cause de décès aux États-Unis, mais les options de traitement de l'AVC aigu reste limitée. À l'heure actuelle, l'injection intraveineuse de l'activateur du plasminogène tissulaire recombinant (tPA) à dissoudre les caillots de sang est le traitement le plus efficace pour un AVC ischémique aigu. Cependant, l'utilisation de tPA est limitée par la fenêtre thérapeutique étroite et par un risque accru d'hémorragie intracérébrale. Par conséquent, un modèle de course adapté à la recherche thrombolytique est urgent.

L'artère cérébrale moyenne (MCA) est l'artère occluse le plus souvent dans....

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Protocole

Déclaration éthique: adultes rats Sprague-Dawley mâles (pesant 330-380 g) ont été utilisés dans ce protocole. Ce protocole a été approuvé par le Comité institutionnel de protection des animaux et l'utilisation (IACUC) à la LSU Health Science Centre-Shreveport et est en conformité avec le «Guide pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire de (huitième édition, National Academy of Sciences, 2011 ).

1 Préparation de modification PE-50 Tube

  1. Tenir un long tube PE-50 de 30 cm au-dessus d'un feu de gaz par les mains, adoucir progressivement le tube. Étirez délicatement le tube.
  2. Sélectionnez un point ....

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Résultats

Laser Doppler (LDF) a été utilisé pour surveiller DSCr pendant l'induction de l'ischémie cérébrale 6,7. Beaucoup de laboratoires, y compris notre laboratoire ont utilisé DSCr pour identifier les animaux avec succès occlusion MCA, mais les seuils de référence varient entre les laboratoires qui sont liés au site de mesure. La sonde de la LDF est positionné à 2 mm en arrière et latéralement par rapport à 5 mm du bregma, comme décrit précédemment 6. DSCr a été contrôlée à 0, 5, 15, 30, 60, 90 et 120 mi.......

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Discussion

Dans cette étude, nous avons démontré un procédé standard pour exécuter un modèle d'AVC embolique MCAO chez le rat, dans lequel l'origine de la MCA est occluse par un caillot de fibrine riche. Le principal avantage de ce modèle est: l'occlusion de la tige de MCA avec un caillot de sang fibrine riche est semblable à un coup de thromboembolique chez les humains, le modèle de course embolique est apte à effectuer une enquête préclinique de la thérapie fibrinolytique, et que ce modèle peut se développer un volum.......

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Déclarations de divulgation

Nous n’avons pas d’intérêts potentiellement conflictuels à divulguer.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par des subventions des National Institutes of Health HL087990 (G.L.).

....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
rh-tPAChemicalGenentech
Chlorure de 2,3,5-triphényltétrazoliumChemicalSigmaT8877
Équipement de vaporisateur d’anesthésieSoma TechnologyDrager Vapor 19.1  ;   ;
Micro-perceuse rechargeable à grande vitesseÉquipementOutils de sciences fines18000-17
Ciseaux incurvésÉquipementOutils de sciences fines14117-14
Pinces Dumont (Médical #7)Équipement Outils de sciences fines11270-20
Pinces Dumont (Médical #5)Équipement Outils de sciences fines11251-35
Ciseauxà ressort de style VannasEquipementOutils pour les sciences fines15000-03
Chambre de récupération vétérinaireÉquipement  ;Peco Services  ;V1200° ;   ;
Pompe à seringue Genie plusÉquipementKent Scientific Corporation
Matrice cérébrale de ratÉquipementKent Scientific CorporationRBMA-310C
Pied à coulisse numérique  ;EquipementWorld Precision Instruments501601
Microscope de dissectionEquipementWorld Precision InstrumentsPZMTIII-BS-LWD
Seringue HamiltonEquipementHamiltonmodel 710
Unité de commande de couverture homéothermiqueEquipementHarvard Appareil
Tondeuse électriqueEquipementBraintree ScientificCLP-9931
Unité électrochirurgicale vétérinaireÉquipementMACAN Manufacturing CompanyMV-9
Débitmètre sanguinÉquipementAdinstruments
PowerLab 4/30ÉquipementAdinstruments
LabChart 7.2logicielAdinstruments
1 ml seringueConsommableBecton, Dickinson and Company309659
Consommableà l’aiguille 23 GBecton, Dickinson and Company305143
l’aiguille 30 GConsommableBecton, Dickinson and Company305106
tube PE-50ConsommableBecton, Dickinson and Company427517
tube PE-10ConsommableBecton, Dickinson and Company427400
Consommablesuture en soieAppareil de Harvard723287
5-0 Suture en soieConsommableAppareil de Harvard517607
HarvardConsommable à6-0 de

Références

  1. Overgaard, K., Sereghy, T., Boysen, G., Pedersen, H., Høyer, S., Diemer, N. H. A rat model of reproducible cerebral infarction using thrombotic blood clot emboli. J Cereb Blood Flow Metab. 12 (3), 484-490 (1992).
  2. Zhang, R. L., Chopp, M., Zhang, Z. G., Jiang, Q., Ewing, J. R. A ra....

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Réimpressions et autorisations

Erratum


Formal Correction: Erratum: Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats
Posted by JoVE Editors on 11/01/2014. Citeable Link.

A correction was made to Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats. The institution information was updated.

The institution "Louisiana State University Health Science Center" was changed to "Louisiana State University Health Science Center, Shreveport".

Étiquettes

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