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Article de méthode

Une méthode d'injection dans les ganglions noueux rat Sprague-Dawley

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DOI :

10.3791/52233

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25 novembre 2014

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Dans cet article

Résumé

La signalisation vagale afférente transmet des informations importantes au système nerveux central à partir de récepteurs situés dans les organes de l’abdomen et du thorax. Les ganglions nodoses des nerfs vagues contiennent de nombreux types de récepteurs qui modulent l’activité vagale. Ce protocole décrit une méthode d’injections locales de substances neurochimiques dans les ganglions nodoses.

Résumé

La signalisation afférente via le nerf vague transmet des informations viscérales générales importantes au système nerveux central à partir de nombreux récepteurs divers situés dans les organes de l’abdomen et du thorax. Le nerf vague communique des informations à partir de stimuli tels que la fréquence cardiaque, la pression artérielle, l’irritation bronchopulmonaire et la distension gastro-intestinale au noyau du tractus solitaire de la moelle. Les corps cellulaires du nerf vague sont situés dans les ganglions nodose et pétreux, dont la majorité sont situés dans le premier. Les ganglions nodoses contiennent une multitude de récepteurs pour les acides aminés, les monoamines, les neuropeptides et d’autres substances neurochimiques qui peuvent modifier l’activité du nerf vague afférent. La modification des afférences vagales par des traitements médicamenteux périphériques systémiques ciblant les récepteurs des ganglions nodoses a le potentiel de traiter des maladies telles que l’apnée du sommeil, le reflux gastro-œsophagien ou la toux chronique. Le protocole décrit ici une méthode d’injection de substances neurochimiques directement dans le ganglion nodose. L’injection de substances neurochimiques directement dans les ganglions nodoses permet d’étudier les effets uniquement sur les corps cellulaires qui modulent l’activité nerveuse afférente, et prévient la complication de l’implication du système nerveux central comme on le voit dans le traitement neurochimique systémique. À l’aide d’un équipement facilement disponible et peu coûteux, les injections intranodoses des ganglions sont facilement effectuées chez les rats Sprague-Dawley anesthésiés.

Introduction

La signalisation afférente via le nerf vague (nerf crânien X) transmet des informations viscérales générales importantes au système nerveux central (SNC) à partir des récepteurs baro-, chimio-, hépatiques osmo-, cardiaques, pulmonaires et gastriques situés dans les organes de l’abdomen et du thorax. Le nerf vague communique des informations à partir de stimuli tels que la fréquence cardiaque, la pression artérielle, l’irritation bronchopulmonaire et la distension gastro-intestinale au noyau des voies solitaires (NTS) de la moelle. Les corps cellulaires des neurones pseudo-unipolaires du nerf vague sont situés dans les ganglions nodose et pétreux, dont la majorité se t....

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Protocole

Toutes les procédures et protocoles ont été approuvés par le soin et l'utilisation des animaux Commission institutionnelle de l'Université de l'Illinois à Chicago. Les expériences décrites ici sont des expériences non-survie aigus, et il n'y avait pas d'utilisation de pommade oculaire. Le maintien de conditions stériles se produit uniquement lorsque les instruments chirurgicaux sont lavées avec 70% d'éthanol dans Dih 2 O. Sacrifice de rats à la fin de l'expérience a eu lieu par l'intermédiaire de surdose de kétamine IV / xylazine.

1. Préparation des instruments et des produits chimiques

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    Résultats

    La figure 1 représente un exemple d'enregistrement de la respiration chez les rats qui avaient perfusion de 5-HT pour induire une apnée avant et après les injections de ganglions intranodose de dronabinol. 5-HT active 5-HT3 sur les ganglions noueux qui contribuent à l'réflexe de Bezold-Jarisch de la bradycardie, l'hypotension et l'apnée. 11,17-19 injections de ganglions Intranodose de dronabinol activent les récepteurs CB inhibiteurs, ou module de manière allostérique 5-HT 3

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    Discussion

    Les étapes essentielles pour l'injection de substances neurochimiques succès dans les ganglions noueux sont les suivants: 1) l'identification et le nettoyage du tissu conjonctif de la ganglions noueux; 2) confirmer l'intégrité des ganglions noueux avant injection; 3) et en utilisant une aiguille de calibre petite pour injecter délicatement dans, mais pas complètement piquant à travers, les ganglions noueux.

    Le nerf vague innerve nombreux organes dans le cou et l'abdomen, et r.......

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    Déclarations de divulgation

    Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

    Remerciements

    Cette étude a été soutenue par les Instituts nationaux de la santé (Grant 1UM1HL112856).

    ....

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    Matériaux

    Liste des matériaux utilisés dans cet article
    NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
    5-HT HClMP Biomedicals21537659112.5 & micro ; g/kg par 350 & micro ; l/kg
    Dronabinol (Marinol) 10 mg Gélules (80 µ ; g/µ ; l)AbbVieNDC 0051-0023-21Diluer avec de l’huile de sésame à 20 & micro ; g/µ ; l
    Huile de sésameSigma-AldrichS3547
    Intramedic Polyéthylène-50BD427411Commandé chez VWR (Cat. # 63019-047)
    Graefe ForcepsRobozRS-5138Deux sont nécessaires
    Johns Hopkins Bulldog ClampRobozRS-7441Trois sont nécessaires
    Jauge de contrainte piézoélectriqueAmbu813255-100
    Acquisition de données Sous-systèmes USBDataWave Technologies
    Sciworks Experimenter Software
    CyberAmpAxon Instruments
    Seringue, 500 & micro ; l, Modèle 1750 TLLHamilton Company81220
    Seringue, 10 & micro ; l, modèle 1801 RN7659-01
    Aiguille, 28 g, petit moyeu RN7803-02point style 4, angle 35, longueur 0,5 po

    Références

    1. Zhuo, H., Ichikawa, H., Helke, C. J. Neurochemistry of the nodose ganglion. Prog. Neurobiol. 52 (2), 79-107 (1997).
    2. Carley, D. W., Radulovacki, M. Pharmacology of vagal afferent influences on disordered breathing during sleep. Respir. Physiol. Neurobiol. 164

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    Réimpressions et autorisations

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