Visage axotomie des nerfs chez la souris: Un modèle pour étudier motoneurone réponse à une blessure

Deborah N. Olmstead; Nichole A. Mesnard-Hoaglin; Richard J. Batka; Melissa M. Haulcomb; Whitney M. Miller; Kathryn J. Jones

doi:10.3791/52382

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Article de méthode

Visage axotomie des nerfs chez la souris: Un modèle pour étudier motoneurone réponse à une blessure

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DOI :

10.3791/52382

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23 février 2015

Deborah N. Olmstead¹^,² , Nichole A. Mesnard-Hoaglin³ , Richard J. Batka¹^,² , Melissa M. Haulcomb¹^,² , Whitney M. Miller¹^,² , Kathryn J. Jones¹^,²

¹Anatomy and Cell Biology, Indiana University School of Medicine, ²Research and Development Services, Richard L. Roudebush VA Medical Center, ³Department of Anatomy and Cell Biology, University of Illinois, Chicago

Dans cet article

Résumé

Nous présentons un protocole chirurgical détaillant comment effectuer une axotomie par coupure ou écrasement sur le nerf facial chez la souris. L’axotomie du nerf facial peut être utilisée pour étudier la réponse physiologique aux lésions nerveuses et tester des techniques thérapeutiques.

Résumé

Le but de ce protocole chirurgical est d'exposer le nerf facial, qui innerve la musculature faciale, à sa sortie du foramen stylomastoïdien et coupé ou écraser pour induire une lésion nerveuse périphérique. Avantages de cette chirurgie sont sa simplicité, haute reproductibilité, et l'absence d'effet sur les fonctions vitales ou la mobilité de la paralysie faciale ultérieure, résultant ainsi en un résultat chirurgicale relativement faibles par rapport à d'autres modèles de lésion nerveuse. Un avantage majeur de l'utilisation d'un modèle de lésion des nerfs crâniens est que les motoneurones résident dans une population relativement homogène dans le noyau moteur facial dans le pont, ce qui simplifie l'étude des corps cellulaires des neurones moteurs. En raison du caractère symétrique de l'innervation du nerf facial et le manque de diaphonie entre les noyaux moteurs du visage, l'opération peut être effectuée de manière unilatérale avec le côté unaxotomized servant de témoin interne apparié. Une variété d'analyses peut être effectuée après l'opération de culss la réponse physiologique, dont les détails sont au-delà de la portée de cet article. Par exemple, la récupération de la fonction musculaire peut servir de marqueur comportementale pour réinnervation, ou les motoneurones peut être quantifiée pour mesurer la survie des cellules. En outre, les motoneurones peuvent être capturées avec précision en utilisant la microdissection laser pour l'analyse moléculaire. Parce que l'axotomie du nerf facial est peu invasive et bien toléré, il peut être utilisé sur une grande variété de souris génétiquement modifiées. En outre, ce modèle de la chirurgie peut être utilisé pour analyser l'efficacité des traitements de lésion nerveuse périphérique. Lésion du nerf facial fournit un moyen d'enquêter non seulement les motoneurones, mais aussi les réponses du microenvironnement central et périphérique gliale, le système immunitaire, et la cible musculature. Le modèle de lésion du nerf facial est un modèle de lésion nerveuse périphérique largement acceptée qui sert comme un outil puissant pour étudier les lésions nerveuses et la régénération.

Introduction

De nombreux modèles de lésion nerveuse périphérique existent, mais celui qui se démarque pour l'étude des motoneurones est le modèle nerf facial axotomie. Le nerf facial, également connu sous le nerf crânien VII, est originaire de la protubérance et innerve les muscles de l'expression faciale ^1,2. Dans ce protocole chirurgical, le nerf facial est exposé à sa sortie du foramen stylomastoïdien et soit coupé ou écrasé. La gravité des lésions nerveuses peuvent être classés suivant les ^trois classifications Sunderland, qui différencie la blessure sur la base de l'intégrité de l'axones, endonèvre, périnèvre et épinèvre, qui sont des co....