Cet article démontre des procédures chirurgicales de reflux gastro-œsophagien avec des souris. Ces modèles sont des outils utiles pour la recherche sur les mécanismes et le traitement du reflux gastro-œsophagien et potentiellement l'œsophage de Barrett et l'adénocarcinome de l'œsophage.
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Article de méthode
Les modèles de chirurgie de reflux gastro-œsophagien avec des souris
Dans cet article
Résumé
Résumé
Plusieurs procédures chirurgicales auraient été signalées comme induisant un reflux gastro-œsophagien chez les animaux. Nous rapportons ici trois modèles chirurgicaux chez la souris visant à induire un reflux de contenu gastrique, de contenu duodénal ou de contenus mixtes. Les procédures chirurgicales et les principes généraux ont été décrits en détail. Un chercheur ayant une expérience chirurgicale devrait être capable de saisir la technique après une courte période de pratique. Après la chirurgie, la plupart des souris peuvent survivre et développer une œsophagite par reflux similaire à celle chez l'homme. Cependant, il convient de noter que les différences histologiques entre l'œsophage de souris et celui de l'homme sont les limitations inhérentes de ces modèles chirurgicaux. Si elles sont utilisées pour la recherche sur l'œsophage de Barrett et l'adénocarcinome, ces procédures pourraient devoir être combinées à des modifications génétiques.
Introduction
La maladie du reflux gastro-œsophagique (MRGO) est un trouble chronique causé par l'exposition prolongée de l'œsophage distal au contenu gastrique ou gastroduodénal1. L'exposition prolongée à ces reflux nocifs altère les défenses intrinsèques de l'épithélium œsophagien et entraîne ainsi une œsophagite2. L'œsophage de Barrett apparaît dans le contexte d'un reflux chronique, et est une lésion prémaligne avec un risque accru d'adénocarcinome œsophagien3,4. Malgré l'importance clinique, les mécanismes de la MRGO, de l'œsophage de Barrett et de l'adénocarcinome n'ont pas été bien compris.
Les modèles animaux son....
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Protocole
Toutes les expériences sur les animaux ont été approuvés par le Comité de protection des animaux et l'utilisation institutionnelle.
1. Préparation de la souris
- Utilisez la souris sur ~ 20 g de poids corporel ou au-dessus ~ 6 semaines d'âge pour la chirurgie.
- Avant la chirurgie, les souris donner un chow et de l'eau ad libitum de laboratoire et de maintenir sur un cycle lumière-obscurité de 12:12 h.
- Rasez la zone chirurgicale avec une tondeuse à cheveux. Anesthésier les souris par injection intraperitoneale de 80 mg / kg de kétamine et 12 mg / kg de xylazine. Cette dose met souris dans le....
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Résultats
La plupart des souris (> 95%) peuvent survivre à la chirurgie. Au cours de la période périopératoire, les principales causes de décès comprennent surdose d'anesthésiques, des saignements et des raisons inconnues.
Quatre semaines après la chirurgie,> 90% des souris souffrant de reflux gastrique ou de reflux mixte et> 80% des souris avec le reflux duodénal peuvent survivre. Pendant cette période, les souris meurent de sténose de l'œsophage et de l'incapacité de manger prin.......
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Discussion
Différents modèles chirurgicales ont été créés pour imiter gastrique, duodénal et le reflux mixte chez les rongeurs. Ces trois procédures décrites ici sont appropriés pour des expériences à long terme avec des taux raisonnables de survie postopératoire. Un chercheur ayant une expérience chirurgicale devrait être en mesure de saisir la technique après une courte période de pratique.
Le saignement peut résulter de l'injection intraperitoneale d'anesthésiques avant une intervention chir.......
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Déclarations de divulgation
L'un des auteurs (XC) a reçu un financement fourni par Takeda Pharmaceutical Company Ltd, qui soutient la recherche fondamentale associée à la maladie de reflux gastro-œsophagien. Aucun des réactifs ou instruments utilisés dans cet article n'est produit par cette entreprise.
Remerciements
Nous sommes soutenus par des subventions de recherche de la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (NO. 81400590), des National Institutes of Health (U54 CA156735) et de Takeda Pharmaceutical Company Ltd. (MA-NC-D-156).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Dumont #1 Forceps Dumostar Tip | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Micro Clip Applying Forceps 5.5" | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Bonn Scissors 3.5" Straight 15 mm Sharp/Sharp Tungsten Carbide Blades | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Operating Scissors 5.5" Straight Sharp/Sharp SureCut | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| 4-0 Silk Black Braid 100 Yard Spool | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Surgeon's Needle 1/2 Circle Cutting Edge Size 12 (25 mm Chord Length) Pack 12 | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Halsey Needle Holder 5" Smooth | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Micro Needle Holder 5.125" Curved Lock.6 mm | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Reflex 9 mm Wound Clip Applier | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Reflex 9 mm Wound Clips Box Of 100 | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| PRONOVA Poly (hexafluoropropylene-VDF) Suture 8-0 | Ethicon US, LLC | ||
| Ringer's solution | Henry Schein, Inc. | ||
| kétamine | Henry Schein, Inc. | ||
| xylazine | Henry Schein, Inc. |
Références
- Kandulski, A., Malfertheiner, P. Gastroesophageal reflux disease--from reflux episodes to mucosal inflammation. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 9 (1), 15-22 (2012).
- Orlando, R. C. The integrity of the esophageal m....
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Réimpressions et autorisations
