Caractérisation des tissus après une nouvelle méthode de désagrégation pour la peau Micro-Greffes Generation

Résumé

Le protocole décrit une nouvelle méthode pour désagréger les tissus humains et de créer des micro-greffes autologues qui, combiné avec des éponges de collagène, donnent lieu à des bio-complexes humains prêts à l'emploi dans le traitement des lésions de la peau. En outre, ce système préserve la viabilité des cellules de micro-greffes à différents moments après la désagrégation mécanique.

Résumé

Plusieurs nouvelles méthodes ont été développées dans le domaine de la biotechnologie pour obtenir des suspensions cellulaires autologues pendant la chirurgie, afin de fournir un traitement étape pour les lésions aiguës et chroniques cutanées. En outre, la gestion des plaies chroniques, mais aussi aiguës résultant d'un traumatisme, le diabète, les infections et d'autres causes, reste difficile. Dans cette étude, nous décrivons une nouvelle méthode pour créer des micro-greffes autologues de tissu cutané d'un seul patient et leur application clinique. En outre, la caractérisation biologique in vitro du tissu cutané dérivé de la peau, de-épidermisé derme (DED) et le derme de plusieurs organes et / ou les donateurs multi-tissus a également été réalisée. Tous les tissus ont été ventilées par ce nouveau protocole, ce qui nous permet d'obtenir des micro-greffes viables. En particulier, nous avons signalé que ce protocole innovant est capable de créer des bio-complexes constitués par des micro-greffes autologues et les éponges de collagène prêt à être appliqué sur des lésions cutanées. Le Clinil'application de cal autologues bio-complexes sur une lésion de la jambe a également été rapporté, montrant une amélioration des deux processus de ré-epitalization et la douceur de la lésion. De plus, notre modèle in vitro ont montré que la viabilité des cellules après la désagrégation mécanique avec ce système est maintenue au fil du temps pour un maximum de sept (7) jours de culture. Nous avons également observé, par cytométrie de flux, que le pool de cellules obtenues à partir de désagrégation est composée de plusieurs types cellulaires, notamment les cellules souches mésenchymateuses, qui exercent un rôle clé dans les processus de régénération et de réparation tissulaire, de leur potentiel de régénération élevé. Enfin, nous avons montré in vitro que cette procédure maintient la stérilité des micro-greffes lorsqu'elles sont cultivées dans des boîtes de gélose. En résumé, nous concluons que cette nouvelle approche régénérative peut être un outil prometteur pour les cliniciens d'obtenir en une seule étape viable, stérile et prêt à utiliser des micro-greffes qui peuvent être appliqués seuls ou en combinaison avec la plupart Scaffo biologique communelds.

Introduction

Au cours des dernières années, plusieurs nouvelles méthodes ont été développées dans le domaine de la biotechnologie pour obtenir des suspensions cellulaires autologues lors de la chirurgie afin de fournir des traitements en une seule étape pour les lésions aiguës et chroniques cutanées. En outre, la gestion des plaies aiguës mais surtout chroniques résultant d'un traumatisme, le diabète, les infections, et d'autres causes, reste difficile. Il y a des preuves croissantes que les plaies chroniques sont devenues un problème mondial grave pour la santé, provoquant un énorme fardeau financier sur les systèmes de soins de santé à travers le monde ^1.

Protocole

Déclaration éthique: depuis l'application clinique du protocole nécessite l'utilisation de tissu autologue cutanée du patient, sa caractérisation in vitro a été réalisée avant l' utilisation clinique sur le tissu cutané homologue à la Banque Emilia Romagna régionale de la peau en suivant les lignes directrices de la réglementation nationale sur la récolte, la transformation et la distribution de tissus destinés à la transplantation (CNT 2013).

1. Construction Bio-complexe pour l'application clinique

NOTE: Ce protocole est cliniquement basé sur l'utilisation de Rigeneracons (liste per....

Résultats

Dans cette étude préliminaire, le premier objectif était d'étudier la capacité des micro-greffes autologues humaines combinées avec un support biologique, tels que le collagène, pour produire des bio-complexes prêts à l'emploi. Ces bio-complexes ont été implantés chez un patient avec une lésion de la jambe provoquée par un accident de voiture (figure 2A) et une réépithélialisation complète associée à la réparation des tissus ap.......

Discussion

Cette étude préliminaire a montré que les micro-greffes obtenus par ce protocole peuvent être combinés avec des éponges de collagène, comme déjà signalé dans d' autres applications cliniques, afin d' optimiser l'efficacité des micro-greffes d' implants ^{9, 10.} En particulier, cette étude a rapporté la capacité de bio -complexes, constitué par des micro-greffes et les éponges de collagène, de l'adjuvant de cicatrisation d'une lésion de la jambe après 30 jours de l'application cliniqu.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Rigenera Machine	Human Brain Wave	79210R
Rigeneracons	Brain Wave	79450S
MTT	Roche Diagnostic GmbH	11465007001
RPMI medium	PBI International	733-2292
DMEM medium	PBI International	F 0415
Antibiotiques	Biologique Secteurs d’activité PBI	03-038-1   ;   ;
Anticorps pour l’analyse FACS	eBiosciences	code 12-1469 pour CD146-P ; code 17-0349  ; pour CD34-APC  ;
Gélose Columbia	BioMérieux Company	43041
Condress® ;	Abiogen Pharma		utilisée pour les bio-complexes
DMSO  ;	Bioniche Pharma USA LLC, Lake Forest, IL
Solution NaCl	Fresenius Kabi, Bad Homburg, Allemagne
Xylene  ;	Carlo Erba

Human Éponge à collagène