Procédure d'enregistrement polygraphique pour la mesure du sommeil chez la souris

Résumé

L’enregistrement de l’électroencéphalogramme (EEG) et de l’électromyogramme (EMG) chez les souris se comportant librement est une étape essentielle pour corréler le comportement et la physiologie avec le sommeil et l’éveil. Le protocole expérimental décrit dans le présent document fournit un système câblé pour l’acquisition d’enregistrements EEG et EMG chez la souris.

Résumé

L’enregistrement de l’électroencéphalogramme (EEG) et de l’électromyogramme (EMG) épiduraux chez les petits animaux, comme les souris et les rats, a été essentiel pour étudier l’homéodynamique et les circuits de régulation veille-sommeil. Dans de nombreux laboratoires, un système d’enregistrement du sommeil par câble est utilisé pour surveiller l’EEG et l’EMG chez les souris au comportement libre, en combinaison avec un logiciel informatique pour la notation automatique des états de vigilance sur la base de l’analyse du spectre de puissance des données EEG. Une description de ce système est détaillée ci-dessous. Des vis en acier sont implantées sur la zone corticale frontale et la zone pariétale de 1 hémisphère pour surveiller les signaux EEG. De plus, l’activité EMG est surveillée par le placement bilatéral de fils dans les deux muscles du cou. Les mouvements oculaires non rapides (non paradoxaux ; Le sommeil lent est caractérisé par de grandes ondes cérébrales lentes avec une activité delta inférieure à 4 Hz dans l’EEG, tandis qu’un passage d’une activité delta basse fréquence à un EEG basse tension rapide dans la gamme thêta entre 6 et 10 Hz peut être observé lors de la transition du sommeil NREM au sommeil paradoxal. En revanche, l’éveil est identifié par des ondes cérébrales de tension faible à modérée dans le tracé EEG et une activité EMG significative.

Introduction

Les progrès techniques ont souvent précipité sauts quantiques dans la compréhension des processus neurobiologiques. Par exemple, la découverte de Hans Berger en 1929 que les potentiels électriques enregistrés à partir du cuir chevelu humain ont pris la forme d'ondes sinusoïdales, dont la fréquence est directement liée au niveau de l'éveil du sujet, a conduit à des progrès rapides dans la compréhension de veille-sommeil la réglementation, dans les deux animaux et les humains. ¹ A ce jour l'electroencephlogram (EEG), en collaboration avec l'électromyogramme (EMG), ie., l'activité électrique produite par les muscles squelettiques,....

Protocole

Déclaration éthique: procédures impliquant des sujets animaux ont été approuvés par la Commission institutionnelle Expérience animale de l'Université de Tsukuba.

1. Préparation des électrodes et des câbles pour EEG / EMG Recordings

1. Préparer EEG / EMG électrode d'enregistrement selon le mode opératoire suivant.
   Remarque: L'électrode est jetable et peut être utilisée que pour une animal. Planifiez soigneusement la configuration de câblage pour tous les connecteurs. Placer des marques sur les connecteurs pour l'orientation correcte.
   1. Soudez chaque broche d'une tête à 4 broches à un fil d'acie....

Résultats

Figure 1B illustre des exemples de l'EEG souris dans les différents états de vigilance. Comme le montre le tableau 1, les époques sont classés comme si le sommeil lent EEG montre grandes ondes cérébrales, avec un rythme lent de delta inférieure à 4 Hz et l'EMG ne dispose que d'un signal faible ou nulle. Époques sont classés comme le sommeil paradoxal si l'EEG montre rapides ondes cérébrales basse tension dans la gamme thêta entre 6 et 10 .......

Discussion

Ce protocole décrit un set-up pour les enregistrements EEG / EMG qui permet l'évaluation de sommeil et l'éveil sous faible bruit, conditions de coût-efficaces et à haut débit. En raison de la petite taille de l'ensemble de tête de l'électrode EEG / EMG, ce système peut être combiné avec d'autres implants pour des expériences intra-cérébrales, y compris optogénétique (optique de l'implantation de la fibre) ou, en conjonction avec simultanée canule implantation, microperfusion de médicaments dans l.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Embase 4 broches	Hirose	A3B-4PA-2DSA(71)
Ampicilline	Meiji Seika
Convertisseur analogique-numérique	Contec	AD16-16U(PCIEV)
Caffeine	Sigma	C0750
Coupeuse en carbure	Minitor	B1055
Boîtier de sertissage	Hirose	DF11-4DS-2C
Douille à sertir	Hirose	DF11-30SC
Ciment dentaire (Toughron Rebase)			chimique Miki
Adhésif époxy	Konishi	#16351
Connecteur FFC/FPC	Honda Tsushin Kogyo	FFC-10BMEP1(B)
Câble plat	Hitachi Cable	20528-ST LF
Colle instantanée (Aron Alpha A)	Toagosei	N/A
Meloxicam	Boehringer Ingelheim	N/A
Pentobarbital	Kyoritsu Seiyaku	N/A
Amplificateur de signal	Biotex	N/A
Chambre d’enregistrement du sommeil	APL	N/A
Logiciel SleepSign Kissei	Comtec	N/A	pour l’enregistrement/l’analyse EEG/EMG
Bague collectrice	Biotex	N/A
Vis en acier inoxydable	Yamazaki	N/A	&phi ; 1,0 et plusieurs fois ; 2.0
Fil d’acier inoxydable	Fil de cooner	AS633

Produit