Pré-clinique Orthotopique modèle murin de cancer de la prostate humaine

Résumé

Le cancer de la prostate est la deuxième cause la plus fréquente de décès liés au cancer aux États-Unis. Un modèle de cancer orthotopique fournit une approche utile pour comprendre la biologie du cancer de la prostate et pour évaluer l’efficacité des schémas thérapeutiques. Ce protocole décrit en détail les étapes nécessaires à l’établissement d’un modèle murin orthotopique de cancer de la prostate.

Résumé

Pour étudier la biologie multidimensionnelle du cancer de la prostate, les modèles précliniques in vivo offrent une gamme d’options pour découvrir des informations biologiques essentielles sur cette maladie. Le modèle murin de xénogreffe orthotopique de cancer de la prostate humain offre une approche alternative utile pour comprendre les interactions spécifiques entre les cellules tumorales génétiquement et moléculairement modifiées, leur microenvironnement organique, et pour évaluer l’efficacité des schémas thérapeutiques. Il s’agit d’un modèle bien caractérisé conçu pour étudier les événements moléculaires du développement de la tumeur primaire et il récapitule les premiers événements de la cascade métastatique avant l’embolie et l’entrée des cellules tumorales dans la circulation. Il permet ainsi d’élucider les mécanismes moléculaires sous-jacents à la phase initiale de la maladie métastatique. De plus, ce modèle permet d’annoter des cibles médicamenteuses d’importance clinique et constitue un outil précieux pour étudier la progression du cancer de la prostate. Dans ce manuscrit, nous décrivons une procédure détaillée pour établir un modèle murin de xénogreffe orthotopique de cancer de la prostate humain.

Introduction

Le cancer de la prostate est la deuxième cause la plus fréquente de décès par cancer (9%) chez les hommes aux États-Unis, à côté d' un cancer du poumon et des bronches (28%) ^1. Selon des données récentes, on estime que 220 ​​800 cas de cancer de la prostate nouvellement diagnostiqués et 27 540 décès auront lieu en 2015 ^1. Le taux de survie relative à cinq ans du début de cancer de la prostate stade est> 99% tandis que celle de la maladie métastatique avancé est seulement 28% ^1. Un défi majeur pour le traitement de la maladie métastatique avancé est le manque de compréhension des mécanismes moléculaires qui sous-tendent la propensi....

Protocole

Protocoles pour toutes les procédures impliquant des animaux doivent être examinés et approuvés par un comité de protection et d'utilisation institutionnelle des animaux (IACUC). Suivre les procédures approuvées officiellement pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire. L'injection intra-prostatique nécessite une intervention chirurgicale ouverte abdominale et les animaux doivent être conservés dans un environnement exempt d'agents pathogènes avec une pièce désignée de chirurgie où les techniques aseptiques chirurgicales appropriées sont utilisées pendant toute la procédure.

1. Préparation des cellules pour imp....

Résultats

Après l' implantation orthotopique de cellules PC3M-Luc-C6 dans le lobe de la prostate postérieure, les souris ont été hebdomadaire imagés en utilisant un système d'imagerie par bioluminescence d'animaux vivants pour contrôler la colonisation des cellules et la croissance des tumeurs au cours de l' expérience (Figure 5A - B). Quantification du signal bioluminescent a indiqué que les cellules PC3M-Luc-C6 colonisé avec succès les lobes de l.......

Discussion

Ce manuscrit décrit une procédure détaillée pour établir un modèle de xénogreffe de souris humaine orthotopique de cancer de la prostate. Ce modèle a été mis en place par implantation directe de la lignée cellulaire du cancer de la prostate humain PC3M-Luc-C6 dans les lobes prostatiques dorsale de souris immunodéprimées. Les tumeurs ont été autorisés à se développer au cours de l'expérience. La croissance tumorale a été surveillée toutes les semaines par un système d'imagerie par bioluminescence non invasive au .......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Lignée cellulaire du cancer de la prostate PC3	ATCC	CRL-1435
Support essentiel minimum (MEM)  ;	GIBCO,Life Technology	11095-080
PBS	GIBCO,Life Technology	10010-023
FBS	GIBCO,Life Technology	10437-028
Zeocin	Invitrogen,Life Technology	R250-01
Trypsin  ;	GIBCO,Life Technology	25300-54
IVIS  ;	Xenogen-Caliper
(300 & micro ; l, 28.5 g)	Becton Dickinson	309300
Souris	Charles River Laboratories, Inc
Tampons d’alcool	MEDEquip Depot	326895 BD
PVP Iode Prep Pad	MEDEquip Depot	C12400PDI
Surgical CatGut Suture chromique	Demetech	CC224017F0P
Matrigel	Corning	354248

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