Un protocole de production est décrit pour la production à petite échelle de boissons laitières fermentées probiotiques à l’aide d’une nouvelle culture bactérienne de démarrage.
Article de méthode
Un protocole de production est décrit pour la production à petite échelle de boissons laitières fermentées probiotiques à l’aide d’une nouvelle culture bactérienne de démarrage.
Un nouveau séché consortium bactérien de Lactobacillus rhamnosus yoba 2012 et Streptococcus thermophilus C106 est cultivé dans 1 litre de lait. Ce démarreur frais peut être utilisé pour la production de lait fermenté et d'autres aliments fermentés à la maison ou à petite échelle en milieu rural. Pour le démarreur frais, 1 L de lait est pasteurisé dans une casserole qui tient dans un plus grand contenant de l'eau du bac, placé sur une source de chaleur. Dans ce bain d'eau, le lait est chauffé et mis à incuber à 85 ° C pendant 30 min. Ensuite, le lait est refroidi à 45 ° C, transférée dans une fiole à vide, inoculé avec les bactéries séchées et laissé pendant au moins 16 heures entre 30 ° C et 45 ° C. Aux fins de la production domestique fréquente, le démarreur est congelé frais en cubes de glace qui peuvent être utilisés pour la production de petites quantités allant jusqu'à 2 litres de lait fermenté. Aux fins de la production à petite échelle dans les pays pauvres en ressources, la pasteurisation jusqu'à 100 L de lait is menées dans des bidons de lait qui sont placés dans une grande casserole remplie d'eau et chauffée sur un feu à 85 ° C pendant 30 min, puis refroidi à 45 ° C. Ensuite, le 100 L lot est ensemencé avec le 1 L démarreur fraîchement préparée mentionné précédemment. Afin d'assurer une fermentation efficace à une température comprise entre 30 et 45 ° C, le lait peut est recouvert d'une couverture pendant 12 heures. Pour la production d'aliments fermentes non laitiers, le démarreur frais est laissé dans une étamine à 12 h, et le petit lait égoutté arrêt peut être ensuite utilisée pour l'inoculation d'une large gamme de matières premières alimentaires, y compris les légumes et les céréales ou aliments à base.
Cet article décrit un protocole de production qui permet la production de lait fermenté nutritif et probiotiques et d'autres aliments fermentés probiotiques avec l'aide d'une culture de semences qui a prouvé bienfaits pour la santé. Le protocole est robuste et facile à exécuter par toute personne en tout lieu, y compris les pays pauvres en ressources.
En Afrique sub-saharienne, 21% des décès d'enfants <5 ans est causée par la diarrhée 1, dont 29% est due à l' étiologie rotavirus , en particulier 2. Il a été montré que la consommation quotidienne d'aliment fermenté contenant une dose recommandée de 1 x 10 10 CFU de L. rhamnosus GG stimule la santé intestinale et réduit l'incidence et la gravité des rotavirus diarrhée associée 3-7.
Les bactéries bénéfiques sont présentes dans une large gamme d'aliments fermentés traditionnels partout en Afrique subsaharienne 8-10. Toutefois, ces aliments sont presque exclusivement home-produced, ont une durée de vie courte relative et ont augmenté les risques de sécurité en raison de la nature non contrôlée de la fermentation 11. En outre, la consommation de ces aliments traditionnels diminue en raison de l' urbanisation et une occidentalisation générale des régimes alimentaires en Afrique 10,12.
La bactérie probiotique générique L. rhamnosus yoba 2012 13, qui est identique à L. rhamnosus GG, a été introduit après le brevet original pour L. rhamnosus GG avait expiré 14. La culture d'ensemencement séchée a une Aw d'environ 0,1, ce qui maintient la viabilité élevée après une période de stockage d'au moins un an à la température ambiante (données non présentées).
La culture d'ensemencement est emballé par portions de 1 g et peut être utilisé pour la production d'un maximum de 100 L de lait fermenté. Lors de la production d'un ou deux lots par jour, les cultures starter peuvent aider à atteindre une capacité maximale de 1000 L de production par semaine de veillery-jour du lait frais.
L'utilisation de L. rhamnosus yoba 2012 avec S. C106 thermophilus comme une culture d'adjuvant qui permet de propager probiotique Lactobacillus 15 est un consortium bactérien unique qui n'a pas été rapportés par d' autres auteurs. Le protocole de production implique la remise en suspension du contenu d'un emballage (1 g), de la culture starter lyophilisé (culture de semences) dans 1 litre de lait, ce qui entraîne une entrée dite fraîche après incubation pendant une période de 16 heures. Le démarreur frais est ensuite utilisée pour inoculer un maximum de 100 litres de lait. Cette méthode de pré-incubation réduit la quantité de bactéries lyophilisées utilisées, ce qui réduit les coûts de production par rapport à une incubation directe comme par exemple décrit par Goff 16. La formulation utilisée pour le protocole décrit dans le présent document maintient les avantages d'une culture lyophilisée, telles que stabilité de conservation et de stockage facile et la manipulation, ce qui entraîne très rfermentations eproducible.
En outre, le protocole de production tel que décrit dans cet article ne nécessite pas de matériel de haute technologie , par opposition aux méthodes de production standards utilisés dans le monde développé 17.
Enfin le démarreur frais peut être utilisé pour l'inoculation d'autres (non laitière) matières premières pour la production d'une large gamme d'aliments fermentés comme le montre avec succès pour Obushera, Kwete, Uji et Zomkom, tous les aliments traditionnels fermentés à base de céréales de l' Ouganda (les deux premiers), le Kenya et le Burkina Faso, respectivement 15. Ceci est seulement une petite fraction de la grande quantité d'aliments fermentés développés en Afrique 18.
Fermentation est la répartition des macromolécules telles que l'amidon, les sucres et les protéines dans les produits qui ont une digestibilité accrues, à travers les activités des enzymes et / ou des micro-organismes. La fermentation est une technique largement utilisée en Afrique sub-saharienne. Togéther avec le séchage et le salage , il permet la conservation des aliments en l'absence d'installations ou de techniques industrielles telles que la mise en conserve 9,19 refroidissement. Fermentation traditionnelle utilise souvent en arrière-slopping, dans lequel une petite partie d'un lot précédent est ajouté à un nouveau lot pour faciliter la fermentation et de réduire le risque d'échec de la fermentation 11. Harrison et Tomkins 20 décrivent une large gamme d'aliments traditionnels africains fermentés à base de maïs, de sorgho ou de mil, et le rôle bénéfique de ces aliments peuvent apporter au sevrage des enfants, par exemple en réduisant la diarrhée infantile et la mortalité associées. Nout et Sarkar 19 décrivent la production traditionnelle d'un plat de manioc fermenté qui est largement consommé en Afrique occidentale. Franz et al. 9 fournir une description détaillée des aliments fermentés africains classés dans les céréales et les légumes aliments, féculents de récolte des racines et des aliments riches en protéines animales. En plus de cela, et Narvhus Gadaga 21 décrire spécifiquement la production traditionnelle de lait fermenté en Afrique.
Pour la production de lait fermenté probiotique (ou d'autres aliments fermentés), en particulier dans le cas de la production de la maison, la disponibilité d'un congélateur est avantageux de stocker le démarreur frais dans des portions congelées. Dans les pays pauvres en ressources, la production de lait fermenté peut être bien exécuté par les communautés productrices de lait. L'expérience actuelle avec les communautés locales en Ouganda indique que les coopératives laitières sont des entités appropriées pour prendre la production de yaourt à partir de leurs propres approvisionnements en lait. La mise à disposition d'une boîte de lait est avantageux, bien qu'il soit également possible, bien que moins préférable, pour préparer de grands lots de lait fermenté dans un récipient plus grand. En outre, la disponibilité de l'énergie électrique et la présence avec celui-ci relié des installations dans les magasins et les kiosques locaux de refroidissement dans les pays pauvres en ressources est un avantage dans l'expansion de l'entreprise et la réduction opertes de f en raison de la détérioration. Cependant, comme on le verra dans le protocole, par l'addition de sorbate de potassium, il est possible de préserver le yaourt pendant plusieurs jours à température ambiante et à réduire spoilages en cas de fluctuations de puissance.
1. Préparation des frais de démarrage
Pour préparer le démarreur frais, prendre 1 L soit ultra-haute température (UHT) du lait transformé ou du lait de vache frais. Si elle est le lait UHT, passez à l'étape 1.3. Si elle est le lait de vache frais, passez à l'étape 1.1.
2. Production de petits lots au niveau des ménages
3. Production en milieu rural dans les pays pauvres en ressources
Remarque: Utilisez un maximum de 100 L de lait par 1 L démarreur frais.
4. Production d'autres aliments fermentés
Cette section décrit la production d'aliments fermentés autres que le lait fermenté avec un volume maximum d'environ 50 L.
Le côté gauche du tableau 1 montre un diagramme schématique de l' article 1 du protocole. Il est suivi par un schéma généralisé combiné des sections 2 et 3 sur le côté droit de la table.
Profils de fermentation du lait inoculé avec la culture de semences en utilisant le protocole de production tel que décrit dans cet article ont été enregistrées. La figure 1 montre la fermentation du démarreur frais (tel que décrit dans la section 1). La figure 2 montre la fermentation du lait fermenté (produit final , tel que décrit dans les sections 2 et 3). Etant donné que dans la pratique dans les zones rurales le contrôle strict de la température est difficile, les mesures ont été faites à la température de 37 ° C et 45 ° C.
Pour la fermentation à 37 ° C, le profil d'acidification des deux sachets testés montrent une légère différence dans l'apparitionde l'acidification exponentielle d'environ 30 minutes, à la fois dans la production du démarreur frais et le produit final. Les valeurs de pH finales des deux cultures sont identiques après 16 h.
Valeurs et titres de pH typiques pour le L. propagé rhamnosus et S. souches thermophilus suivant les procédures de production décrites pour différents aliments fermentés peuvent être trouvées dans le tableau 2. Cellule compte pour L. rhamnosus et S. thermophilus ont été déterminés sur milieu MRS agar et LM17, respectivement, en utilisant des procédés microbiologiques de placage couramment appliqués. Le nombre de cellules finales de L. rhamnosus yoba 2012 était de 1,7 x 10 7, 3,7 x 10 9 et 3,3 x 10 9 UFC ml -1 pour le lait fermenté, kwete et uji, respectivement. des valeurs de pH finales étaient de 4,3 et 4,2 pour le lait et kwete fermenté, respectivement. Les résultats préliminaires indiquent que l'addition de potassium sorbate avant la fermentation n'a pas d' influence négative mais même augmente le nombre de L. viable rhamnosus yoba 2012 bactéries présentes dans le yogourt deux semaines après la production (données non présentées).
La figure 3 montre les résultats d' une Chromatographie liquide à haute performance (HPLC) en combinaison avec un indice de réfraction (RI) détecteur de lait non fermenté par rapport au lait fermenté. Les résultats indiquent que les niveaux de lactose dans la diminution du lait, alors que les niveaux d'acide lactique et les niveaux de galactose augmentent, ce qui est un résultat de l'activité métabolique de la culture d'ensemencement.

Figure 1. Profil de Fermentation du démarreur frais en demi lait écrémé (1,5% de matières grasses, de protéines de 3,5%). Un litre de lait a été ensemencé avec un sachet (1 g) de la culture de semences et fermenté à 37 ° C(••••, dupliquer), ainsi que 45 ° C (- - - -, dupliquer) pendant 16 heures. La ligne droite (----) à pH 4,4 est inséré à titre indicatif pour déterminer quand la fermentation est terminée. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

Figure 2. Profil de fermentation du lait fermenté (produit final) en demi écrémé (1,5% de matières grasses, de protéines de 3,5%). Un litre de lait a été ensemencé avec une 20 g de levain frais et fermentes à 37 ° C (•• ••, dupliquer), ainsi que 45 ° C (- - - -, dupliquer) pendant 16 heures. La ligne droite (----) à pH 4,4 est ajouté à titre indicatif pour déterminer le moment où la fermentation est achevée.S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

Figure 3. modèles HPLC-élution de lait non-fermenté (noir) et le lait fermenté pendant 16 heures avec la culture de semences (bleu). Les motifs d'élution indiquent la consommation de lactose et de la production de galactose et de lactate. Sucres et acide faible ont été identifiés sur la base du temps de rétention et le pic ratio de surface de absorbance UV et l' indice de réfraction. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

Tableau 1. Graine culture applica protocole de tion. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette table.

Tableau 2. Propagation de Lactobacillus rhamnosus yoba 2012 dans une variété d'aliments fermentés. Les données ont été obtenues à partir Kort et al. 15. Les fermentations ont été réalisées à 37 ° C, sauf indication contraire. Le nombre de cellules de L. yoba 2012 et S. rhamnosu thermophilus C106 après l' inoculation à la fois varié entre 1 x 10 6 et 1 x 10 7 CFU ml -1. La mutandabota fonctionnelle a été préparé avec un démarreur contenant exclusivement L. rhamnosus yoba 2012 comme rapporté par Mpofu et al 24. ND, non déterminé.d / 54365 / 54365tbl2large.jpg "target =" _ blank "> S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette table.
Fichier supplémentaire. La production locale et la vente de yaourt probiotique en Afrique rurale. Plans et photos sont prises dans Balawoli et Namagera, Ouganda, mai 2016. Le clip montre la chaîne de valeur à partir de la réception du lait à la transformation, l'emballage, les ventes et enfin à la consommation d'un lot de 50 L de yaourt probiotique, préparé avec l'utilisation des équipements de base uniquement. S'il vous plaît cliquer ici pour télécharger.
Le protocole de production simple à l'aide du matériel de base et un roman fermentée culture starter alimentaire décrit dans cet article facilite la production d'un lait fermenté probiotique de haute qualité au niveau des ménages et en milieu rural dans les pays pauvres en ressources. Il est essentiel de pasteuriser le lait pour un minimum de 30 min afin d'obtenir la réduction ou l'élimination des organismes d'altération et de micro-organismes pathogènes potentiels suffisants. En outre, un chauffage adéquat provoque une dénaturation des protéines de petit - lait 17 qui sera ensuite associé avec les micelles de caséine 25 entraînant la formation de reticulations dans le lait fermenté 26. Par conséquent, la viscosité du produit final est augmentée par rapport au lait chauffé 27 moins largement. Il est également essentiel d'éviter l'inoculation du lait supérieure à 45 ° C, car à des températures plus élevées les bactéries seront inactivés.
De même, si elle est disponible et le coût-Efficace, l'utilisation de lait UHT est préféré, en particulier pour la production de départ fraîche. Tout d'abord, le lait UHT est pratiquement exempt de micro-organismes indésirables. Deuxièmement, UHT protéines de lactosérum de lait ont été largement dénaturée, ce qui les rend plus accessibles aux protéases bactériennes, la promotion de leur dégradation et la croissance ultérieure des bactéries du yaourt. Pendant le processus de refroidissement, les protéines replient partiellement à leur état natif, donc re-chauffage avant l'inoculation est bénéfique pour la production de yogourt. Résultats de la fermentation prolongée dans un lait fermenté avec un pH <4,4, ce qui est souvent indésirable. La fermentation peut être arrêtée en temps utile en plaçant le lait fermenté dans le réfrigérateur.
On a montré que les yogourts produits localement en Afrique pour contenir des niveaux significatifs de lactocoques 28 tels que L. lactis, ce qui peut entraîner la production de peptides ayant un goût amer 29-32, qui est généralement undesirable 31. Par conséquent, il est essentiel que la fermentation a lieu à une température comprise entre 45 et 35 ° C 15,28. Etant donné que la température diminue lentement pendant la fermentation dans un milieu semi-controlled, l'inoculation est réalisée à 45 ° C, la température la plus élevée autorisée. isolement suffisant pendant la fermentation est essentielle pour éviter la diminution de la température inférieure à 35 ° C.
la production manuelle de yogourt en milieu rural a un risque relativement élevé de contamination microbienne par des organismes d'altération. En particulier, les levures sont capables de se propager dans les conditions acides dans le yogourt. Contamination de levure peut conduire à une production excessive de gaz, soit dans la phase d'incubation ou pendant le stockage, gâcher ainsi le yogourt immédiatement ou de manière significative raccourcir sa durée de vie 33,34. les niveaux de levure peuvent être minimisés par la stérilisation et / ou de nettoyage avec de l'hypochlorite de sodium de tous les ustensiles et l'équipement de la chaleur avant chaque esprit de contact h du lait ou du yogourt. En particulier après l'altération de levure est produite, la stérilisation et le nettoyage sévère et large est nécessaire pour éliminer la contamination.
Les risques ci-dessus décrites montrent clairement que le succès de l'application de ce protocole de production dans les pays pauvres en ressources est limitée par sa nature manuelle et avec celui-ci le taux de détérioration accrue associée. Le taux de détérioration devient encore plus élevé dans les communautés qui manquent d'installations de refroidissement ou avoir une disponibilité très fluctuant de l'électricité. De plus, le manque d'accès à un prix abordable matériau d'emballage de haute qualité peut limiter l'absorption du protocole décrit. L'équipement nécessaire est fondamental et universel, mais un laboratoire ou la cuisine thermomètre est essentiel. Enfin, actuellement qu'un nombre limité de pays ont les installations pour produire le lyophilisé culture starter. La plupart des pays pauvres en ressources manquent ces installations, et dépendent donc de l'importation pour obtenir ce produit.
_content "> Parmi les denrées alimentaires, le lait fermenté , y compris le yaourt est le véhicule le plus commun pour les bactéries probiotiques. La production de lait fermenté ne nécessite pas d' équipement particulier en dehors d'un thermomètre. Ainsi , la combinaison de ce qui précède décrit la première culture de départ probiotique générique 13 avec un simple protocole de production permet la production reproductible, contrôlé et sécuritaire du lait fermenté probiotique par presque tout le monde en tout lieu, y compris la production au niveau des ménages et de chalets niveaux de l'industrie dans les zones rurales dans les pays pauvres en ressources. en pratique traditionnellement fermentations naturelles, des niveaux égaux de probiotique les bactéries ne peuvent pas être garantis 9. la culture d'auto-stable démarreur dans 1 g sachets permettre aux petits producteurs de manière rentable de produire des aliments fermentés, sans la nécessité d'acheter des quantités élevées de cultures starter qui perdent habituellement viabilité après ouverture de l'emballage, en particulier lorsque maintenu à la température ambiante et à une humidité relative élevée, qui està notre connaissance le cas pour tous les autres disponibles cultures starter de yogourt. En outre, la quantité de bactéries sèches qui est importé reste très faible, inférieure à 0,1% de la concentration de la culture probiotique dans le produit final, car la quasi-totalité de la culture de départ est produit localement en raison de la méthode de pré-incubation, qui est décrit dans ce protocole, .La production de lait fermenté est décrit en détail dans cet article et peut être une première étape pour maîtriser l'art de produire des aliments fermentés probiotiques, qui peuvent ensuite être appliquées à fermenter de nombreux types d'autres aliments (comme mentionné dans cet article). Pour mettre à niveau le lait fermenté de base, une éventuelle étape suivante est la production de biens-fruits lait fermenté. Cela nécessite la préparation d'un fruit stérile Preserve (un mélange de fruits, de sucre et éventuellement certains additifs) ou l'achat d'un fruit ready-made de préserver pour être mélangé avec le lait fermenté après la fermentation 35,36.
Wilbert Sybesma et Remco Kort sont les fondateurs de la Yoba pour la fondation de la vie, un organisme sans but lucratif, agréé par les autorités fiscales néerlandaises comme Benevolent Institution publique (PBI), qui vise à promouvoir la production et la consommation de produits fermentés en Afrique locale . Les produits fermentés à base de la culture d'ensemencement Yoba, y compris le yogourt, zomkom, obushera et mutandabota ne sont pas commercialisés par la fondation en tant que telle, mais le Yoba pour la fondation de la vie stimule la production et l'appropriation locale, ce qui permet des activités génératrices de revenus pour les entrepreneurs africains dans le secteur alimentaire . Le Yoba for Life Fondation distribue et vend des sachets prêts à l'emploi avec des cultures de semences bactériennes séchées à travers un réseau de partenaires et de bénévoles pour faciliter la production locale de produits laitiers et de céréales à base de produits par fermentation bactérienne contrôlée.
Les auteurs reconnaissent le projet East Dairy africaine de développement (EADD) pour leur soutien pratique sur le terrain dans la formation des coopératives laitières en Ouganda rural dans la production de lait fermenté. CSK alimentaire Enrichment est reconnu pour la production, le contrôle de la qualité et de l'évaluation de la capacité fermentaire de la culture de démarrage. Lactosan GmbH & Co, en Autriche, est reconnu pour l'aide à la production. Les auteurs remercient Karin Overkamp (TNO microbiologie et la biologie des systèmes, Zeist, Pays-Bas) pour l'analyse HPLC, et Derrick Assimwe (UIRI) pour l'enregistrement de l'auteur des déclarations en Ouganda. Ces enregistrements ont eu lieu au cours de la réunion de lancement soutenu par le CRDI de la nourriture fermentée pour le projet de vie (FCRSAI Phase 2) à Entebbe, en Ouganda, mai 2016. L'Université VU d'Amsterdam et le musée Micropia sont reconnus pour des contributions financières et la fourniture d'installations de laboratoire pour la production de la vidéo décrit dans cet article. Les auteurs remercient Wim van Egmondpour la microscopie des bactéries du yaourt.
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Culture de démarrage Yoba | Fondation Yoba for | Life-Lait | |
| Obtenu à partir de vache | locale-Lait | entier, frais, sans antibiotiques et obtenu à partir d’une vache en bonne santé | |
| Sucre optionnellement | Acheté au supermarché | local-Canesuger a été utilisé, mais le sucre de betterave est également possible. Exempt d’impuretés | |
| Thermomètre de laboratoire | Narang Scientific Industries | TM-01 | |
| Lactomètre | Narang Scientific Industries | LM-01 | |
| Éthanol 96 % | Sigma Aldrich | 476226 | |
| Papier | pH Macherey-Nagel GmbH & Co | 90206 | |
| Étamine | au-delà de Gourmet-Tout | étamine de qualité alimentaire de haute qualité peut faire | |
| Tamis / passoire | Cuisinart | CTG-00-3MS | N’importe quelle passoire à mailles fines peut faire l’affaire, mais les passoires en acier inoxydable sont préférées. |
| Bouteille thermos de 1 L | Achetée à l’entrepôt | local-Casserole | |
| de 1 L + couvercle | Acheté à l’entrepôt | local-Casserole | acier inoxydable |
| de 2 L | Achetée à l’entrepôt | local-Tout | matériau chauffant et imperméable fera l’affaire |
| Casserole de 50 L | Acheté à l’entrepôt | local-Tout | matériau résistant à la chaleur et imperméable fera l’affaire |
| Canette de lait | Narang Scientific Industries | MC-SS-30 | N’importe quelle boîte de lait en acier inoxydable peut faire |
| Couverture | Acheté à l’entrepôt local | - | Plus la couverture est épaisse, meilleure est l’isolation |
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