Dans cet article, nous fournissons des conseils utiles pour effectuer la procédure de blessure de fil, même par le personnel avec une expérience minimale dans les chirurgies animales. Il y a deux étapes critiques dans l’exécution de cette procédure : l’incision de l’artère carotide externe et l’insertion du fil. L’incision dans l’artère carotide externe doit être effectuée dans la mesure du possible de la bifurcation, afin d’assurer suffisamment de matériaux restants (Figure 1C). L’incision ne doit pas être trop grande, en raison du risque de coupe de l’ensemble du navire. La deuxième étape critique est le risque élevé de saignement pendant l’artériotomie et l’insertion du fil de guidage si le flux sanguin n’est pas efficacement interrompu. De plus, la dénuderation endothéliale pourrait ne pas avoir lieu ou une rupture artérielle est possible si le fil de guidage n’est pas correctement introduit dans le récipient de lumen. Pour éviter cela, la surface du fil de guidage doit être soigneusement polie avant l’opération.
Pour optimiser le protocole, la position de la table d’opération avec la tête de souris vers le chirurgien assure une meilleure vue, l’accessibilité et le contrôle pour la manipulation appropriée de fil de guidage. En outre, pour augmenter la reproductibilité, utilisez le même fil de guidage dans toutes les études. Comme la taille du fil ne change pas, il est important d’examiner et d’éliminer toutes les différences possibles entre les souris en utilisant le même sexe, l’âge et le même poids pour toutes les souris incluses dans une étude. Par la suite, la coloration Evans-Blue aidera le chirurgien à déterminer l’efficacité de la dénudation. L’existence d’équipements appropriés est une condition préalable au succès de la procédure. Un stéréomicroscope 10X est essentiel pour effectuer cette procédure. La bonne préparation du fil de guidage (par exemple le polir) est cruciale. Par conséquent, nous recommandons fortement que la préparation du fil de guidage soit effectuée par du personnel technique spécialisé, le cas échéant.
Il existe de nombreuses étapes de dépannage dans ce protocole. Si incising l’artère carotide externe près de la bifurcation, lier soigneusement l’externa, près de la bifurcation, de sorte qu’aucun saignement ne se produit. Pendant la coupe, l’artère carotide externe ne peut pas être vu. Par conséquent, considérez la bifurcation au niveau de la suture de soie. Recueillir les sections lorsque la suture de soie disparaît. Si l’incision dans l’artère carotide externe est trop grande et que le vaisseau est rompu, assurez-vous que le flux sanguin dans la communauté carotide et l’artère carotide interne est effectivement interrompu et essayez de trouver l’ouverture du vaisseau à l’aide de forceps. Après avoir introduit le fil de guidage et effectué la dénature, lier le navire près de la bifurcation. Pendant la coupe, commencer à recueillir lorsque la soie de la suture commence à disparaître. Si la rupture artérielle se produit pendant la dénudation avec le fil de guidage, vérifiez sous le microscope si le fil de guidage est correctement poli.
Malgré la similitude du modèle de lésions filaires avec les situations cliniques, de nombreux groupes se concentrent sur l’athérosclérose indigène chez les souris, ou ils choisissent des inductions invasives d’athérosclérose, telles que l’angioplastie de ballon chez les rats ou les lapins, en raison du manque de personnel formé qui peut effectuer de petites chirurgies animales. Malgré les avantages de l’utilisation de lapins/rats, par exemple pas besoin d’équipement miniaturisé, ni les modèles de rat ni les modèles de lapin n’offrent une variété de souches knock-out différentes, en termes d’étude des mécanismes moléculaires impliqués dans la croissance du néointima et la thrombose en stent.
Les modèles existants pour étudier la restenose en stent chez la souris sont difficiles, nécessitent des compétences chirurgicales élevées, et ont des risques élevés de complications telles que des saignements ou une paralysie. Par exemple, la blessure mécanique ou l’implantation de stent dans l’aorte thoracique par l’artère fémorale est accompagnée d’un taux de mortalité élevé (35%) en raison d’une paralysie de la jambe arrière ou d’un saignement13-15. Nous décrivons également l’implantation de stent dans l’artère carotide d’une souris16. La procédure est similaire; toutefois, le traitement des tissus pour analyse est compliqué et n’est pas disponible pour tous les laboratoires16. L’artère carotide est directement accessible, non seulement pour les procédures d’opération, mais aussi pour les méthodes d’imagerie existantes telles que l’imagerie par ultrasons. D’autres inductions de blessures dans les artères carotides chez les souris peuvent être faites à l’aide de dispositifs électriques17. Cette méthode est facile à exécuter et assure une reproductibilité élevée. Cependant, il provoque des blessures dans toutes les couches du navire, ce qui n’est pas identique à une blessure mécanique. Les applications de ballon ont des avantages, par exemple l’ajustement au diamètre du navire en conformité avec la pratique clinique et a une forte influence sur les résultats pathologiques. Même si les ballons de souris sont disponibles, ils sont très chers et donc, pas largement utilisé. Au lieu de cela, le fil-blessure est la méthode établie, imitant la sténose en stent.
La dénudation est exécutée sur la paroi artérielle normale, bien qu’avec un fond athérosclérotique. Par conséquent, la formation de neointima sera modérée par rapport à la situation clinique. Le nombre élevé de modèles précliniques démontre qu’aucun des modèles ne répond à tous les critères nécessaires pour découvrir l’ensemble des mécanismes cellulaires et moléculaires menant à la pathophysiologie chez l’homme (voir tableau 2).
Après avoir effectué la procédure de lésion filaire, d’autres analyses biologiques et moléculaires peuvent être effectuées pour identifier les cellules, les protéines, les ARNm, les microARN, les gènes ou d’autres biomarqueurs, qui peuvent être utilisés comme cibles thérapeutiques pour développer de nouvelles stratégies de traitement de l’athérosclérose, et en particulier pour la formation de néointimas après une lésion vasculaire. Si disponible, la croissance de la plaque peut être surveillée à l’aide d’ultrasons à haute fréquence ou d’autres techniques d’imagerie haute résolution. De plus, la maîtrise de cette technique donnerait à l’opérateur la possibilité d’adapter le protocole à d’autres modèles invasifs d’incitation à l’athérosclérose, tels que le placement du collier, la ligature partielle ou même l’implantation de stent.