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Article de méthode

Lévitation magnétique Couplé avec imagerie portable et d'analyse pour le diagnostic de la maladie

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DOI :

10.3791/55012

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19 février 2017

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Dans cet article

Résumé

Nous présentons une technique de lévitation magnétique couplée à l’imagerie et à l’analyse automatisées à la fois dans un appareil compatible avec un smartphone et un appareil avec imagerie et traitement intégrés. Ceci est appliqué pour mesurer la distribution de la densité des cellules avec deux applications biomédicales démontrées : le diagnostic de la drépanocytose et la séparation des globules blancs et rouges.

Résumé

Actuellement, de nombreuses procédures de diagnostic clinique sont complexes, coûteuses, inefficaces et inaccessibles à une large population dans le monde. Les exigences en matière d’équipement spécialisé et de personnel formé exigent que de nombreux tests de diagnostic soient effectués dans des laboratoires cliniques distants et centralisés. La lévitation magnétique est une technique simple mais puissante qui peut être appliquée pour faire léviter des cellules, qui sont suspendues dans une solution paramagnétique et placées dans un champ magnétique, à une position déterminée par l’équilibre entre une force magnétique et une force de flottabilité. Ici, nous présentons une technologie de plate-forme polyvalente conçue pour le diagnostic au point d’intervention qui utilise la lévitation magnétique couplée à l’imagerie microscopique et à l’analyse automatisée pour déterminer la distribution de la densité des cellules d’un patient comme indicateur de diagnostic utile. Nous présentons deux plates-formes fonctionnant sur ce principe : (i) une version compatible avec les smartphones de la technologie, où l’appareil photo intégré du smartphone est utilisé pour imager les cellules dans le champ magnétique et une application pour smartphone traite les images et pour mesurer la distribution de la densité des cellules et (ii) une version autonome où une carte de caméra est utilisée pour capturer des images et une unité de traitement intégrée avec un écran à transistor à couche mince (TFT) mesure et affiche les résultats. Les applications démontrées comprennent : (i) la mesure de la distribution altérée d’une population cellulaire avec un phénotype de maladie par rapport à un phénotype sain, qui est appliquée au diagnostic de la drépanocytose, et (ii) la séparation de différents types de cellules en fonction de leurs densités caractéristiques, qui est appliquée pour séparer les globules blancs des globules rouges pour la cytométrie des globules blancs. Ces applications, ainsi que les extensions futures des mesures essentielles basées sur la densité rendues possibles par cette technologie de plate-forme portable et conviviale, amélioreront considérablement les capacités de diagnostic des maladies au point de service.

Introduction

Ici, nous présentons une plate-forme technologique et une technique qui utilise la lévitation magnétique couplée à l'imagerie et l'analyse automatisé pour analyser la répartition de la densité des cellules d'un patient comme un indicateur de la maladie. Cette approche polyvalente pour l'analyse cytométrique basé sur la densité peut finalement être appliquée à une gamme de diagnostics de la maladie. Toutefois, afin d'être compatible avec les tests de point de soins et d'utilisation dans les pays en développement, la technique doit satisfaire aux exigences de faible coût, la portabilité et la facilité d'utilisation. Le dispositif et les cons....

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Protocole

Déclaration éthique: Toutes les procédures impliquant des échantillons de sang humain ont été effectués selon les règles institutionnelles. Tous les protocoles ont été examinés et approuvés par le comité d'examen institutionnel. Un consentement éclairé a été donné par tous les participants.

Préparation 1. Exemple de drépanocytose Diagnostic 5, 8

  1. Préparer une solution à 50 mM de gadobutrol dans une solution saline équilibrée de Hank (HBSS).
  2. Dissoudre le métabisulfite de sodium 10 mM dans la solution de gadolinium.
    NOTE: métabisulfite de sodium est to....

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Résultats

Pour l'analyse de la répartition de la densité cellulaire, ce qui est la technique utilisée pour le diagnostic des maladies de faucille cellulaire, dont le but est d'identifier la largeur de la distribution de la population cellulaire. Les cellules sanguines des patients sans maladie drépanocytaire seront confinés à l'intérieur d'une largeur prévisible. Les cellules provenant de patients atteints de drépanocytose seront distribués dans une région plus large, avec une incl.......

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Discussion

Étapes critiques dans le Protocole
Les facteurs critiques dans ce processus comprennent le bon alignement des aimants. Si les aimants deviennent délogée ou séparés plus que la normale dans le dispositif, cela peut affecter les résultats. Pour contrôler ce défaut ou d'autres dans le processus, une particule de densité contrôlée, tels que des microsphères de polystyrène, peut être utilisé périodiquement pour contrôler les changements au fil du temps. En outre, le temps de lévitation est importante pour permettr.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs Stephanie Knowlton et Savas Tasoglu sont les fondateurs et ont une participation dans mBiotics, une jeune entreprise en démarrage qui travaille à la commercialisation de la plateforme de lévitation magnétique décrite ci-dessous pour les solutions de diagnostic au point de service. Un brevet provisoire intitulé « Lévitation magnétique avec imagerie optique embarquée et analyse d’images pour la séparation, l’identification et la mesure basées sur la densité » a été déposé auprès de l’UCONN n° 16-027 sur la technologie décrite ici.

Remerciements

Les auteurs tiennent à remercier le Dr Matthew Heeney du Boston Children’s Hospital/Dana-Farber Cancer Institute et le Dr Farzana Pashankar de l’hôpital Yale-New Haven pour avoir fourni des échantillons de patients atteints de drépanocytose. Les auteurs tiennent à remercier Chu H. Yu et Ashwini Joshi pour leur aide dans l’analyse de ces échantillons et la compilation des données.

S.T. remercie l’American Heart Association Scientist Development Grant (15SDG25080056) et le prix du programme d’excellence en recherche de l’Université du Connecticut pour le soutien financier de cette recherche. S.K. reconnaît que ce matériel est basé sur des tra....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Gadavist (Bayer)Jefferson Medical and Imaging2068062Gadavist contient 1M de gadobutrol, un chélate de gadolinium. Nous avons acheté des flacons de 2 ml avec 15/ca.
Tubes microcapillaires carrésen verre Vitrocom8270longueur de 50 mm est suffisante
Métabisulfite de sodiumSigma-AldrichS9000Formule chimique : Na2S2O5
Leica Microsystems Scellant pour tubes CritosealFisher Scientific02-676-20
Hank’s Balanced Salt SolutionSigma-AldrichH9269  ; SIGMA
Trypsine-EDTASigma-AldrichT4049Ou autre réactif recommandé pour le type de cellule utilisé
Autopiqueur réglable MICROLET 2Walgreens246567Tout autopiqueur est acceptable lorsqu’il est utilisé conformément aux protocoles de biosécurité
Microlet LancesWalgreens667474Doit être jetable et non réutilisé
Hausser Bright-Line Phase HemacytometerFisher Scientific02-671-6Ou toute méthode préférée pour le comptage
cellulaire Tampon de lyse ACKThermoFisherA1049201  ;
Une

Références

  1. Tasoglu, S., Khoory, J., Tekin, H., Thomas, C., Karnoub, A., Ghiran, I., Demirci, U. Levitational Image Cytometry with Temporal Resolution. Advanced Materials. 27 (26), 3901-3908 (2015).
  2. Tasoglu, S., Yu, C. H., Liadudanskaya, V., Guven, S., Migliaresi, C., Demirci, U. Magnetic L....

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Réimpressions et autorisations

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