Mycobacterium tuberculosis, l’agent causal de la tuberculose (TB), est l’une des principales causes de morbidité et de mortalité dans le monde. Avec la propagation accrue de la tuberculose multirésistante (TB-MR), il est urgent de développer de nouvelles stratégies thérapeutiques contre les infections à M. tuberculosis. Traditionnellement, les composés sont évalués en fonction de leur activité antibactérienne dans des conditions de croissance in vitro en bouillon ; cependant, les résultats sont souvent trompeurs pour les agents pathogènes intracellulaires comme M. tuberculosis, car les conditions de dépistage phénotypique dans le bouillon sont significativement différentes des conditions réelles de la maladie dans le corps humain. Le dépistage des inhibiteurs qui agissent à l’intérieur des macrophages a toujours été difficile en raison de la complexité, de la variabilité de l’infection et de la lenteur du taux de réplication de M. tuberculosis. Dans cette étude, nous présentons une nouvelle approche pour évaluer rapidement l’efficacité des composés sur la viabilité de M. tuberculosis dans un modèle d’infection par les macrophages. En utilisant la combinaison d’un test de cytotoxicité et d’un test de viabilité de M. tuberculosis en bouillon, nous avons pu créer un système de dépistage qui génère une analyse complète des composés d’intérêt. Ce système est capable de produire des données quantitatives à faible coût, ce qui est à la portée de la plupart des laboratoires, tout en étant hautement évolutif pour s’adapter aux grands environnements industriels.