Article de méthode

Batterie de Behavioral teste évaluation générale Locomotion, force musculaire et la Coordination chez les souris

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DOI :

10.3791/55491

23 janvier 2018

Dans cet article

Résumé

Tests comportementaux sont utilisé dans les essais précliniques pour évaluer les effets phénotypiques d’une maladie ou un traitement sur le bien-être de l’animal. Afin d’évaluer globalement le fonctionnement moteur, nous avons sélectionné les essais de locomotion générale, la force musculaire et de coordination : plein champ test, le test de la maille et le test rotarod, respectivement.

Résumé

Tests comportementaux sont utilisé dans les essais précliniques pour évaluer les effets phénotypiques et les résultats ayant une maladie particulière ou un traitement sur la santé et le bien-être de l’animal. Il y a des nombreux tests comportementaux qui pourraient s’appliquer. Nous avons sélectionné un test pour la locomotion générale, plein champ d’essai (OFT) ; un test pour la force musculaire, la bandelette test (MT) ; et un test pour la coordination, l’essai rotarod (RR). Essai peut être effectué sur une base hebdomadaire ou mensuelle. Comme un test pour la locomotion général, les œuvres de l’OFT par objectivement surveillance des paramètres de mouvement tandis que la souris sont dans un appareil de plein champ. Le champ est généralement une boîte de 2' x 2', et les mouvements sont enregistrés par le biais de détection laser ou la capture vidéo. La souris est placée dans le centre de plein champ et autorisée à circuler librement pour le test. Le MT utilise la latence pour une souris pour tomber un écran inversé comme une mesure de la force musculaire. Une souris est placée sur un écran, qui est inversé sur une boîte transparente et est programmé pour leur temps de latence à l’automne. Trois essais sont effectués, avec le meilleur des trois essais marqués pour cette journée. Un score de 60 s est la durée maximale reste une souris inversée. Les souris sont reçu a 5 min de repos entre les essais de test de maille. Enfin, un protocole accéléré sur le RR évalue endurance et coordination motrice. Au cours d’un procès, une souris se promène sur une tige de rotation car il augmente la vitesse de 4 tr/min à 40 tr/min pendant 5 min. Le procès se termine quand la souris touche le capteur de pression aimanté à tomber. Chaque souris subit trois essais, et le meilleur essai est marqué pour ce jour-là. Cette combinaison des données comportementales permettant l’évaluation globale de la mobilité, coordination, force et mouvement des animaux testés. Au moins deux des trois mesures de tests comportementales doit montrer amélioration pour un animal de se qualifier comme étant l’amélioration globale de la fonction moteur.

Introduction

L’objectif des tests comportementaux est de mesurer la caractérisation phénotypique, que ce soit dans les études pour un nouveau modèle de souris de maladies affectant le système nerveux central ou un essai d’un nouveau traitement. Il existe une variété de tests comportementaux à choisir. La raison d’être en utilisant une combinaison de tests comportementaux est souvent d’évaluer pleinement les résultats précliniques de traitement. La batterie de tests comportementaux ci-après comprend le test de plein champ (OFT), le test de maille (MT) et le rotarod test (RR).

L’OFT est utilisé comme une mesure de l’activité locomotrice générale

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Protocole

Tous les protocoles décrits dans les présentes ont été effectuées conformément à et ont été approuvés par, Comité de protection des animaux de la Reine University. La fréquence des tests comportementaux peut être hebdomadaire ou mensuelle ou une combinaison des deux (c.-à-d., semaine quand on s’attend à voir la plus grande différence et au mois ailleurs).

Remarque : Les études comportementales murins sont en grande partie sexe/âge/dépendante de la souche, et c’est pourquoi il est essentiel de recueillir les points de bon moment et de rester cohérent dans l’ensemble de groupes expérimentaux. Des facteurs environnementaux (p. ex.....

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Résultats

Les animaux de l’étude peuvent subir le paradigme de test comportementaux hebdomadaire ou mensuel pour accueillir le nombre de points de temps nécessaire requis pour l’analyse. Voir la Figure 1 pour obtenir des exemples sur le calendrier de test comportementaux. Dans les données représentatives ci-dessous, tirées Osmon et al. (2016), les souris ont subi la batterie de tests comportementaux, chaque mois, commençant à 12 semaines d’âge, jusqu'à leur point de termin.......

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Discussion

Pour tous les tests, nettoyer et désinfecter la surface pour réduire les contagions et éléments de distraction à la souris. En outre, s’assurer que les souris sont stable compte tenu des périodes de repos suffisantes entre les essais et comportementale lors de l’utilisation de l’OFT, RR et Mt.

Dans l’OFT, il est essentiel que chaque souris sont placée au milieu du champ ouvert et que le programme est démarré lors de la sortie de la souris dans le centre. N’oubliez pas qu’il n’y a aucun mouveme.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Nous tenons à remercier la Fondation de recherche de nouvel espoir pour leur soutien et le financement de nos recherches. Nous tenons également à remercier IITC pour un soutien financier partiel pour ce travail.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
IITC Life Sciences Rotarod avec le logiciel informatique Series 8IITC Life Sciences755
Carré à champ ouvert 45 x 45 x 40 cm (couleur grise). Autre couleur de sol disponible : blanc, noir.Harvard Aparatus (PanLab)760190
  ; Module préconfiguré Open FieldHarvard Aparatus (PanLab)760688
Plate-forme logicielle Smart V3.0  ;Harvard Aparatus (PanLab)760681
Convertisseur vidéo (analogique/numérique)Harvard Aparatus (PanLab)760262
Système de fixation de toit pour caméraHarvard Aparatus (PanLab)760277
Analogique Sony Appareil photo & objectifNTSCHarvard Aparatus (PanLab)760505

Références

  1. Osmon, K. J., et al. Systemic Gene Transfer of a Hexosaminidase Variant Using an scAAV9.47 Vector Corrects GM2 Gangliosidosis in Sandhoff Mice. Human Gene Therapy. 27 (7), 497-508 (2016).
  2. Brooks, S. P., Dunnett, S. B.

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Mots-clés

Test du champ libreTest du grillageTest du RotarodLocomotion chez la sourisCoordination motriceTests comportementauxEssais pr cliniquesvaluation de la fonction motriceAnalyse du mouvement chez la souris

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