Effets d’allogéniques Plasma riche en plaquettes (PRP) sur le processus de guérison des Tendons d’Achille sectionné des Rats : une Description méthodologique

Laura Greimers; Pierre V. Drion; Alain Colige; Vincent Libertiaux; Vincent Denoël; Christelle Lecut; André Gothot; Jean-François Kaux

doi:10.3791/55759

Article de méthode

Effets d’allogéniques Plasma riche en plaquettes (PRP) sur le processus de guérison des Tendons d’Achille sectionné des Rats : une Description méthodologique

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DOI :

10.3791/55759

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19 mars 2018

Laura Greimers¹ , Pierre V. Drion¹ , Alain Colige² , Vincent Libertiaux³ , Vincent Denoël³ , Christelle Lecut⁴ , André Gothot⁴ , Jean-François Kaux⁵

¹Experimental Surgery, GIGA-R & Credec, University of Liège, ²Laboratory of Connective Tissues Biology, GIGA-R, University of Liège, ³Department Argenco, University of Liège, ⁴Department of Clinical Biology, University Hospital of Liège, University of Liège, ⁵Physical Medicine and Sport Traumatology Department, FIFA Medical Center of Excellence, University Hospital of Liège, University of Liège

Dans cet article

Résumé

Ce protocole décrit le processus d’évaluation de la guérison des tendons chez les rats qui ont reçu une injection de plasma riche en plaquettes allogéniques (PRP) ou une solution saline après avoir enlevé la partie du tendon d’Achille. L’état d’avancement de la guérison du tendon est évalué à plusieurs points dans le temps à l’aide de différents types d’analyses.

Résumé

Cet article décrit les procédures expérimentales utilisées pour observer si PRP peut influencer positivement la guérison du tendon. Il y a 4 grandes étapes à suivre : induire une lésion dans le tendon d’Achille ; préparer des PRP et injecter (ou la solution saline) ; supprimer le tendon ; et effectuer des évaluations biomécaniques, moléculaires et histologiques. A chaque étape, toutes les procédures et les méthodes sont décrites en détail, donc ils peuvent être facilement reproduits.

Tendons d’Achille ont été sectionnée chirurgicalement (suppression d’un tronçon de 5 mm de long). Par la suite, PRP ou une solution saline a été injectée pour étudier si le PRP a un effet positif sur la guérison du tendon. Trois groupes de 40 animaux (un total de 120 rats ont été utilisés dans cette étude) ont été divisés en 2 sous-groupes : groupe d’injection de PRP et une injection saline groupe témoin. Des rats ont été sacrifiés à accroître les points dans le temps (groupe A: 5 jours ; Groupe B: 15 jours ; Groupe C: 30 jours) et les tendons ont été supprimés. 90 tendons ont subi des tests biomécaniques avant d’effectuer l’analyse transcriptomique et les 30 tendons restants ont été soumis à une analyse histologique.

Introduction

Coagulation, processus inflammatoires et les rôles de modulation de l’immunité des plaquettes sont bien connu¹. Plus récemment, il a été démontré qu’ils ont aussi des propriétés réparatrice²^,³. En effet, divers facteurs de croissance et cytokines (VEGF, PDGF, TGF-B, IGF-I et HGF) sont libérés par les plaquettes au cours de la dégranulation. Ces facteurs de croissance favorisent l’angiogenèse, remodelage tissulaire et plaie de guérison (OS, peau, muscle, tendon)². Centrifugation de sang autologue produit plasma riche en plaquettes (PRP) qui contient des concentrat....