Induction et diagnostic des tumeurs dans<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal Disc Epithelia

Kenta Morimoto; Yoichiro Tamori

doi:10.3791/55901

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Article de méthode

Induction et diagnostic des tumeurs dans

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DOI :

10.3791/55901

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25 juillet 2017

Kenta Morimoto¹^,² , Yoichiro Tamori¹

¹Structural Biology Center, National Institute of Genetics and Department of Genetics, School of Life Science, SOKENDAI, ²Graduate School of Media and Governance, Keio University

Dans cet article

Résumé

L'analyse de clones de mosaïque dans l'épithélium de disque imaginal de Drosophila est un système modèle puissant pour étudier les mécanismes génétiques et cellulaires de la tumorigénèse. Nous décrivons ici un protocole pour induire des tumeurs dans des disques imaginaux d'ailes de Drosophila en utilisant le système GAL4-UAS et introduire une méthode de diagnostic pour classer les phénotypes tumoraux.

Résumé

Aux premiers stades du cancer, les cellules mutantes transformées présentent des anomalies cytologiques, commencent une prolifération incontrôlée et perturbent progressivement l'organisation du tissu. Drosophila melanogaster est apparue comme un système de modèle expérimental populaire dans la biologie du cancer pour étudier les mécanismes génétiques et cellulaires de la tumorigénèse. En particulier, les outils génétiques pour les disques imaginatifs de Drosophila (développement d'épithélium dans les larves) permettent la création de cellules pro-tumorales transformées dans un tissu épithélial normal, une situation similaire aux étapes initiales du cancer humain. Cependant, une étude récente de la tumorigénèse dans les disques imaginaux d'ailes de Drosophila a montré que l'initiation de la tumeur dépend de la cytoarchitecture tissulaire-intrinsèque et du microenvironnement local, ce qui suggère qu'il est important de considérer la susceptibilité spécifique à la région aux stimuli tumorigènes dans l'évaluation des phénotypes tumoraux dans l'imaginaire Disques. Pour faciliter l'analyse phénotypique des progrès de la tumeurSur les disques imaginaux, nous décrivons ici un protocole pour les expériences génétiques utilisant le système GAL4-UAS pour induire des tumeurs néoplasiques dans des disques imaginaux d'ailes. Nous introduisons en outre une méthode de diagnostic pour classer les phénotypes des lésions clonales induites dans les épithéliums imaginaux, car une méthode de classification claire pour discriminer les différentes étapes de la progression de la tumeur (comme l'hyperplasie, la dysplasie ou la néoplasie) n'a pas été décrite auparavant. Ces méthodes pourraient être largement applicables à l'analyse clonale des phénotypes tumoraux dans divers organes de Drosophila .

Introduction

Les tissus épithéliaux sont des systèmes hautement organisés qui ont la capacité homéostatique remarquable de maintenir leur organisation par le développement et le renouvellement cellulaire. Ce système auto-organisé robuste, cependant, est progressivement perturbé lors du développement de la tumeur. Au début du développement de la tumeur, des cellules mutantes individuelles issues de l'activation de l'oncogène ou de l'inactivation du gène suppresseur de tumeur apparaissent dans une couche épithéliale. Lorsque cette «cellule pro-tumorale» transformée évite un environnement suppresseur, perturbe l'organisation épithéliale et commence la prolifération i....