Le but du présent protocole est de générer un modèle de fractures vertébrales liées à l’ostéoporose rat nu qui peut être évalués longitudinalement en vivo à l’aide d’une microcomputed semi-automatique axée sur la tomographie quantitative analyse structurale.
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Article de méthode
Semi-automatisées longitudinale axée sur les Microcomputed tomographie Quantitative analyse structurale d’un modèle de Rat nu Fracture vertébrale liée à l’ostéoporose
Dans cet article
Résumé
Résumé
Fractures vertébrales liées à l’ostéoporose (OVCFs) sont un besoin commun et cliniquement non satisfait avec l’augmentation de la prévalence dans le vieillissement de la population mondiale. Des modèles animaux de FOCR sont essentiels pour le développement préclinique de stratégies ingénierie tissulaire translationnelle. Alors qu’un certain nombre de modèles existe actuellement, ce protocole décrit une méthode optimisée pour induire de multiples défauts vertébraux hautement reproductibles dans un seul rat nu. Une tomographie de roman microcomputed semi-automatique longitudinale (µCT)-base d’une analyse structurelle quantitative des anomalies vertébrales est aussi détaillée. Brièvement, des rats ont été projetés à plusieurs points de temps post-op. L’analyse du jour 1 a été réorientée vers une position standard, et un volume standard d’intérêt a été défini. Scans µCT ultérieures de chaque rat ont été enregistrées automatiquement à l’analyse de la journée 1 donc le même volume d’intérêt a été ensuite analysé pour évaluer d’une néo-formation osseuse. Cette approche versatile adaptable à une variété d’autres modèles où analyse longitudinale axée sur l’imagerie pourrait profiter d’un alignement semi-automatique 3D précis. Globalement, ce protocole décrit un système facilement quantifiable et facilement reproductible pour la recherche sur l’ostéoporose et l’OS. Le protocole suggéré prend 4 mois pour induire l’ostéoporose dans nues ovariectomisées et entre 2,7 et 4 h à générer, d’images et d’analyser les deux défauts vertébraux, selon la taille du tissu et du matériel.
Introduction
Plus de 200 millions de personnes dans le monde souffrent d’ostéoporose1. Pathologique sous-jacent diminution de la densité minérale osseuse (DMO) et microarchitecture osseuse altérée augmenter la fragilité osseuse et, par conséquent, le risque relatif de fracture2. L’ostéoporose est tellement répandue et nuisible à la santé que l’OMS a défini un problème majeur de santé publique. En outre, comme la population mondiale est prévue pour l’âge, l’ostéoporose devrait devenir encore plus fréquente.
Fractures vertébrales ostéoporotiques sont les fractures de fragilité plus courants, estimées à plus ....
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Protocole
toutes les expérimentations animales ont été effectuées en vertu d’un protocole approuvé par l’animalier institutionnel et utilisation Comité (IACUC) du Cedars-Sinai Medical Center (protocole # 3609). L’anesthésie a été administrée pendant toutes les procédures d’imagerie et chirurgies. Tous les animaux étaient logés conformément aux protocoles approuvés de IACUC.
Remarque : le protocole expérimental du présent protocole est illustré à la Figure 1. Acheter des rats âgés de six semaines avec leurs ovaires enlevés chirurgicalement et les nourrir un LCD composé de phosphate de calcium et 0,77 % 0,01 %. Après un....
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Résultats
Utilisant ce protocole, on peut l’image et de quantifier la régénération de n = 8 modélisés anomalies vertébrales ostéoporotiques à travers différents moments. La correspondance anatomique obtenue par la procédure d’enregistrement permet l’analyse de la VOI même à tous les points dans le temps. Il en résulte une analyse histomorphométrique 3D longitudinales très précises, même lorsque les marges de la malformation originale ne sont plus reconnaissables. Nous avons utilisé cinq points dans.......
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Discussion
L’ostéoporose est la cause la plus répandue des fractures vertébrales causées par une augmentation de la charge sur la colonne vertébrale et qui aboutissent à l’effondrement du corps vertébral. Toutefois, il est pratiquement impossible de générer une blessure à un rongeur qui réplique authentiquement une semblable tassements vertébraux. Au lieu de cela, chercheurs en créant un vide cylindrique dans le centre du corps vertébral pour imiter OVCFs16,17,
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Déclarations de divulgation
Cette recherche a été financée par une subvention de la California Institute for Regenerative Medicine (CIRM) (TR2-01780).
Remerciements
La recherche a été financée par une subvention de la California Institute for Regenerative Medicine (CIRM) (TR2-01780).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Isoflurane | MWI Santé animale, Pasadena, Californie | 501017 | |
| BetadineSolution | MWI Santé animale, Pasadena, Californie | 4677 | |
| Gluconate de chlorhexidine 2 % gommage | MWI Santé animale, Pasadena, Californie | 510083 | |
| Alcool isopropylique 70 % pinte | MWI Santé animale, Pasadena, Californie | 501044 | |
| Carprofène | MWI Santé animale, Pasadena, CA | 26357 | |
| Buprénorphine 0,3 mg/mL | MWI Santé animale, Pasadena, CA | 56163 | |
| Rats nus athymiques ovariectomisés | Harlan Laboratories, Indianapolis, IN | Hsd :RH-Foxn1 rnu | |
| Aliments à faible teneur en calcium | Newco Distributors, Inc., CA | 1814948 (5AV8 AIN-93M avec faible teneur en calcium) | |
| Phosphate Buffered Saline | Life Technologies Corporation | ||
| Dermabond | J AND J ETHICON | DHVM12 | |
| Appareil d’anesthésie | Patterson Scientific | TEC 3EX | |
| Chambres d’induction à dessus coulissant | Patterson Scientific | 78917833 | |
| ProStation Poste de travail chauffant | Patterson Scientific | 78914731 | |
| Champ chirurgical | HALYARD HEALTH INC | 89101 | |
| Système de rétraction de fixateur magnétique | Fine Science Tools, Inc., CA | 18200-50 | |
| Ciseaux de dissection, 10 cm, courbé, SS | World Precision Instruments, FL | 14394 | |
| Ciseaux à iris, 11,5 cm, 45 ° ; Angle, Dentelé, Sharp/Sharp | World Precision Instruments, FL | 503225 | |
| Pinces, n° 5 | World Precision Instruments, FL | 555048FT | |
| Micro Mosquito Forceps Hemostatic | Precision Instruments, FL | 503360 | |
| Gaze de coton stérile | Medtronic, MINNEAPOLIS, MN | 9024 | |
| Lances à absorption - Montées/stériles | Fine Science Outils, CA | 18105-01 | |
| Seringue, 1 mL | TERUMO TERUMO MED | SS-01T | |
| Aiguille, calibre 25 | BD MED SYS INJECTION SYS | ||
| Hotte à flux laminaire | Baker | SterilGARD e3-Class II Type A2 Armoire | |
| biosécurité Unité de cautérisation thermique | World Precision Instruments, FL | 501292 | |
| Micro-Drill OmniDrill115/230V | World Precision Instruments, FL | 503598 | |
| Tréphines pour micro-foret, 2 mm de diamètre | Outils de science fine, CA | 18004-20 | |
| 3-0 Vicryl non teint 27" SH conique | J ET J | ETHICON 1663G | |
| 4-0 Ethilon noir 18" PC3 coupe conventionnelle | J AND J | ETHICON 1954G | |
| Conebeam in vivo microCT (vivaCT 40) | Scanco Medical | vivaCT 40 | |
| Suite logicielle des systèmes microCT Scanco Medical | vivaCT 40 | ||
| Logiciel d’analyse | Imagerie biomédicale, Mayo Clinic, Rochester, MN | Analyze 12 | Logiciel d’analyse d’images |
| Pommade | oculaire vétérinaire |
Références
- Wang, M. L., Massie, J., Perry, A., Garfin, S. R., Kim, C. W. A rat osteoporotic spine model for the evaluation of bioresorbable bone cements. Spine J. 7 (4), 466-474 (2007).
- Consensus development conference: prophylaxis and treatment of osteoporosis. Am J Med
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Réimpressions et autorisations
