Modèles expérimentaux pour étudier la neuroprotection du postconditionnement acide contre l'ischémie cérébrale

Résumé

Le postconditionnement acide protège contre l'ischémie cérébrale. Nous présentons ici deux modèles pour exécuter APC. Ils sont obtenus respectivement en transférant des tranches corticostriatales à un tampon acide après une privation d'oxygène-glucose in vitro et en inhalant 20% de CO ₂ après l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne in vivo .

Résumé

L'AVC est l'une des principales causes de mortalité et d'invalidité dans le monde, avec des approches thérapeutiques limitées. En tant que stratégie endogène pour la neuroprotection, les traitements de post-conditionnement se sont révélés être des thérapies prometteuses contre l'ischémie cérébrale. Cependant, des procédures compliquées et des problèmes potentiels de sécurité limitent leur application clinique. Pour surmonter ces inconvénients, nous avons développé un postconditionnement acide (APC) comme thérapie pour l'ischémie cérébrale focale expérimentale. L'APC se réfère au traitement d'acidose doux par inhalation de CO ₂ lors de la reperfusion suite à une ischémie. Nous présentons ici deux modèles pour exécuter APC in vitro et in vivo , respectivement. Le traitement contre la perte de glucose de l'oxygène (OGD) des souris et l'occlusion corticostriatale et l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne (MCAO) ont été utilisés pour imiter l'ischémie cérébrale. L'APC peut être simplement réalisée en transférant des tranches de cerveau à un tampon acide tamponné avec 20% de CO ₂ , oR par des souris inhalant 20% de CO ₂ . L'APC a montré des effets protecteurs importants contre l'ischémie cérébrale, comme en témoigne la viabilité tissulaire et le volume d'infarctus du cerveau.

Introduction

L'accident vasculaire cérébral est l'une des principales causes de mortalité et d'invalidité dans le monde entier. De grands efforts ont été déployés pour trouver des traitements efficaces pour les accidents vasculaires cérébraux au cours des dernières décennies, mais la réalisation est assez insatisfaisante. Le postconditionnement est un processus manipulé par des contraintes subtoxiques suite à un épisode ischémique. Le postconditionnement, y compris le postconditionnement ischémique, hypoxique, à faible taux de glucose et à distance ischémique, déclenchent des mécanismes adaptatifs endogènes et se sont révélés être des thérapies prometteuses contre l&#....

Protocole

Toutes les expériences ont été approuvées et conduites conformément aux directives éthiques du Comité d'expérimentation animale de l'Université du Zhejiang et étaient en totale conformité avec le Guide National des Instituts de Santé pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire. Des efforts ont été faits pour minimiser toute douleur ou inconfort, et le nombre minimal d'animaux a été utilisé.

1. OGD des tranches Corticostriatales

1. Préparation de la solution:
   1. Préparer 1000 mL r-ACSF (124 mmol / L, NaCl, 5 mmol / L de KCl, 1,25 mmol / L KH ₂ PO _4, 2 mmol / ....

Résultats

Dans le modèle de la tranche corticostriatale décrite ci-dessus, la viabilité corticostriatale des tranches a été quantifiée par dosage TTC à 1 heure après la reperfusion. La conversion TTC a été calculée en normalisant l'absorption à 490 nm à la tranche de contrôle. Selon la conversion TTC, APC a été protégé contre les lésions de reperfusion induites par l'OGD en fonction de la durée et de la durée. En détail, les 1 et 3 minutes de traitement par acidose ont amélioré de manière .......

Discussion

Nous présentons ici deux modèles expérimentaux pour étudier la neuroprotection de l'APC contre l'ischémie cérébrale. Dans les tranches de cerveau, l'APC est réalisée en incubant des tranches corticostriatales de souris dans un tampon acide bouillonnant avec 20% de CO ₂ après l'apparition de reperfusion, tandis que dans le modèle MCAO, l'APC est obtenue par inhalation de 20% de CO ₂ chez la souris après reperfusion. Les deux modèles reflètent la neuroprotection de l'APC contr.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Chlorure de sodium	Sigma	S5886
Chlorure	de potassium Sigma	P5405
Phosphate de potassium monobasique	Sigma	P9791
Sulfate de magnésium	Sigma	M2643
Bicarbonate de sodium	Sigma	S5761
Chlorure de calcium dihydraté	Sigma	C5080
D-(+)-Glucose	Sigma	G7021
Vibratome	Leica	VT1000 S Chlorhydrate
2,3,5-triphényltétrazolium	Sigma	T8877
Éthanol absolu	Aladdin Industrial Corporation	E111993
Diméthyl sulfoxyde	Sigma	D8418
Laser Doppler Flowmetry	Moor Instruments Ltd	Modèle Moor VMS-LDF2
Éther diéthylique anhydre	Sinopharm Chemical Reagent Corporation	80059618
Trichloracetaldehycle hydrate	Sinopharm Chemical Reagent Corporation	30037517
10 % Formalin	Aladdin Industrial Corporation	F111936
24-well plaques	Jet Biofil	TCP-010-024

de