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Article de méthode

Évaluation de la déficience de la mémoire spatiale dans un modèle de souris de lésions cérébrales traumatiques à l'aide d'un labyrinthe radial de la marche d'eau

6.8K vues

DOI :

10.3791/55986

17 juillet 2017

Dans cet article

Résumé

Nous présentons ici un protocole pour un test de cognition spécifique à la souris qui ne nécessite pas de nage. Ce test peut être utilisé pour distinguer avec succès les souris traumatiques traumatiques provoquées par l'impact cortical contrôlé par des témoins simulés.

Résumé

Malgré l'augmentation récente de l'utilisation des modèles de souris dans la recherche scientifique, les chercheurs continuent à utiliser des tâches cognitives qui ont été initialement conçues et validées pour l'utilisation des rats. Le test de labyrinthe de la mémoire spatiale (spécialement conçu pour les souris et ne nécessitant pas de baignade) a été démontré précédemment pour distinguer avec succès les souris TBI induites par impact cortical contrôlées et les contrôles simulés. Ici, un protocole détaillé pour cette tâche est présenté. Le labyrinthe RWT capitalise sur la tendance naturelle des souris à éviter les zones ouvertes en faveur de l'étreinte des côtés d'un appareil (thigmotaxis). Les murs du labyrinthe sont bordés de neuf trous d'évacuation placés au-dessus du sol de l'appareil, et les souris sont entraînées à utiliser des repères visuels pour localiser le trou d'évacuation qui sort du labyrinthe. Le labyrinthe est rempli d'un pouce d'eau froide, suffisant pour motiver l'évasion mais pas assez profond pour exiger que la souris nage. La période d'acquisition ne prend que quatre formationsJours, avec un test de rétention de mémoire au jour cinq et un test de mémoire à long terme au jour 12. Les résultats rapportés ici suggèrent que le labyrinthe de RWT est une alternative possible aux tests cognitifs validés par le rat et basés sur la natation dans l'évaluation de l'espace Déficits de mémoire dans les modèles souris de TBI.

Introduction

Les troubles de la mémoire sont parmi les symptômes les plus courants signalés par les patients après une lésion cérébrale traumatique (TCE) 1 , 2 . L'identification et l'évaluation exactes des déficits de mémoire analogues dans les modèles animaux de TBI sont donc essentielles à notre compréhension de cette condition et de sa gestion. Ici, nous présentons un protocole pour tester la mémoire spatiale dans un modèle de souris de TBI en utilisant un labyrinthe de roulement à eau radiante (RWT). Cet appareil a précédemment évalué les déficits cognitifs dans les modèles de souris du TBI ....

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Protocole

Toutes les procédures et la manipulation des animaux ont été menées conformément aux directives sur les soins des animaux délivrées par les National Institutes of Health et par le Comité de l'élevage et de l'utilisation des animaux de l'Université de Washington.

1. Chirurgie

  1. Anesthésier la souris à 5% d'isoflurane dans une boîte d'induction jusqu'à l'inconscience. Confirmer l'anesthésie par une réduction de la fréquence respiratoire et l'absence d'un réflexe de retrait après le pincement.
  2. Maintenir l'anesthésie par le cône du nez à 2-2,5% tout au long de la chirurgie. Survei....

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Résultats

Le labyrinthe RWT ( Figure 1 ) a été utilisé pour enquêter sur les déficits de mémoire spatiale dépendant de la lésion chez des souris assignées de manière aléatoire pour recevoir soit une TBI contrôlée par impact cortical contrôlé, soit une chirurgie simulée. La blessure a été générée à l'aide d'un impact cortical à solénoïde avec une pointe convexe de 3 mm et les paramètres de blessure suivants: vitesse de frappe de 6 m / s, 1 mm de profondeur de p.......

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Discussion

Le protocole de labyrinthe RWT présenté ici distingue avec succès les souris TBI induites par CCI et les contrôles simulés, et représente une alternative viable, axée sur la souris, au lézard circulaire MWM et Barnes. Alors que les résultats rapportés ici ne parlent que de l'utilisation du labyrinthe RWT dans un modèle de souris TBI, cet appareil a été utilisé avec succès dans des modèles âgés et transgéniques où la non-conformité induite par le stress résultant d'essais basés sur la nage effectués à l'aide .......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n'ont rien à dévoiler.

Remerciements

Cette recherche a été soutenue par l'opportunité de projet pilote de l'Institut pour les sciences de la traduction (UL1TR000423), le Centre de l'Université de Washington sur le développement humain et l'incapacité, et l'Université de Washington Animal Behavior Core and Brain Imaging Core. Nous tenons à remercier le Dr Warren Ladiges pour son rôle dans le développement et la diffusion du design et du protocole original du labyrinthe Radial Water Tread présentés ici. Nous remercions également Toby Cole pour son aide à ce projet.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
35 gal. Baignoire ronde en acier trempé à chaudHome DepotInternet #206638142Nécessaire : 1
1-1/2 po. Adaptateur de piège ABS DWV SPG x SJHome DepotInternet #100344703, Store SKU #188956Besoin : 9
1-3/4 po x 1-7/16 po Bouchon en caoutchouc noirHome DepotInternet #100114974 Store SKU #755844Besoin : 8
1-1/2 po. ABS DWV 90 Degree Hub x Hub ElbowHome DepotInternet #100346663 Store SKU #188603Besoin : 1
HDX
10 Gal. Sac de rangement
Home DepotInternet #202523587 Store SKU #258804 Store SO SKU #258804Besoin : 1
Impact One Stereotaxic Impactor pour CCILeica Biosystems39463920Nécessaire : 1
Vernier Stereotaxic avec manuel Fine Drive Stereotaxic Instrument pour petits animauxLeica Biosystems39463001Nécessaire : 1

Références

  1. Levin, H. Neurobehavioral outcome of closed head injury: Implications for clinical trials. J. Neurotrauma. 12 (4), 601-610 (1995).
  2. Schretlen, D., Shapiro, A. A quantitative review of the effects of traumatic brain injury on cognitive functio....

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Réimpressions et autorisations

Étiquettes

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