Étude In Vivo du métabolisme du Glucose à haute teneur en graisses régime chez les souris nourries avec épreuve d’hyperglycémie provoquée par voie orale (HGPO) et Test de tolérance à l’insuline (ITT)

Summary

L’article décrit la génération et la caractérisation métabolique de chez les souris nourries à la diète riche en gras comme un modèle de résistance à l’insuline induite par le régime alimentaire et l’obésité. Il dispose également des protocoles détaillés pour effectuer l’épreuve d’hyperglycémie provoquée par voie orale et le test de tolérance de l’insuline, suivi des altérations du corps entier de glucose métabolisme in vivo.

Abstract

L’obésité représente le seul facteur de risque plus important dans la pathogenèse du diabète de type 2, une maladie qui se caractérise par une résistance à l’absorption du glucose stimulée par l’insuline et une décompensation brute du métabolisme du glucose systémique. Malgré des progrès considérables dans la compréhension du métabolisme du glucose, les mécanismes moléculaires de sa réglementation en santé et la maladie demeurent sous visé par l’enquête, alors qu’il existe un besoin urgent de nouvelles approches pour prévenir et traiter le diabète. Alimentation dérivée de glucose stimule la sécrétion pancréatique d’insuline, qui sert à l’organisme de réglementation principal de processus anaboliques cellulaires pendant l’État nourri et soldes ainsi la glycémie niveaux pour maintenir le statut énergétique systémique. Suralimentation déclencheurs meta-inflammation chronique, qui entraîne des modifications en insuline périphérique associés aux récepteurs de signalisation et réduit ainsi la sensibilité à la disposition de la glycémie induite par l’insuline. Ces événements aboutirait à glycémie élevée à jeun et de taux d’insuline, mais aussi une réduction de la tolérance au glucose, qui à son tour servir d’indicateurs importants de résistance à l’insuline. Nous présentons ici un protocole pour la production et la caractérisation métabolique d’alimentation riche en graisses (HFD)-nourri des souris comme un modèle souvent utilisé de résistance à l’insuline induite par l’alimentation. Nous illustrons en détail l’épreuve d’hyperglycémie provoquée par voie orale (HGPO), qui surveille l’élimination périphérique d’une sécrétion glucose administré par voie orale de charge et de l’insuline au fil du temps. En outre, nous présentons un protocole pour l’épreuve d’hyperglycémie provoquée insuline (ITT) de surveiller l’action de l’insuline de l’organisme entier. Ensemble, ces méthodes et leurs applications en aval, représentent des outils puissants pour caractériser le phénotype métabolique général de souris aussi bien quant à évaluer plus précisément les altérations du métabolisme du glucose. Ils peuvent être particulièrement utiles dans le domaine de la recherche large de résistance à l’insuline, le diabète et l’obésité pour fournir une meilleure compréhension de la pathogenèse, aussi bien quant à tester les effets des interventions thérapeutiques.

Introduction

Dans les pays développés, l’obésité et le diabète atteint des dimensions épidémies due à la sédentarité et la consommation excessive d’aliments transformés, les effets qui résultent de l’urbanisation, industrialisation, mais aussi la mondialisation. Bien que les recherches sur la résistance à l’insuline et ses co-morbidités, tels que les hyperlipidémies et l’athérosclérose, a gagné la proéminence pendant les dernières décennies, les mécanismes biologiques complexes qui régulent le métabolisme de la santé et la maladie restent incomplètement compris et il n’y a toujours un besoin urgent de nouvelles modalités de traitement prévenir et traiter ces maladies

Protocol

Toutes les méthodes décrites ici ont été approuvés par le Comité de l’urbanisme de l’Université médicale de Vienne et animalier et réalisées selon la Fédération des européen Laboratory Animal Science Associations (FELASA). Veuillez noter que toutes les procédures décrites dans le présent protocole doivent être effectuées uniquement après approbation institutionnelle et gouvernementale, ainsi que par le personnel qui est techniquement compétent.

1. HFD-nourris de souris

Remarque : Maintenir toutes les souris C57BL/6J sur un cycle lumière/obscurité de 12 h avec accès gratuit à la nourriture et l’eau.

1. À l’....

Results

La figure 1 illustre un calendrier schématique pour Phénotypage métabolique de la souris sur le régime alimentaire. À un âge d’environ 6 semaines, les souris doivent être placés sur un HFD, alors qu’un groupe d’écoute peut servir le groupe témoin. Ce qui est important, poids corporel doit être déterminé chaque semaine pour observer si il y a une augmentation du poids corporel. Tout type de stress (p. ex., bruit ou le comportement agressif des hommes).......

Discussion

Avec la forte prévalence du diabète et des maladies associées à la population mondiale, il y a une exigence forte pour une recherche portant sur le mécanisme moléculaire, prévention et traitement de la maladie,¹⁹. Le protocole présenté décrit des méthodes bien établies pour la génération de souris HFD, un modèle animal robuste utilisé pour les recherches métaboliques, ainsi que la conduction de l’HGPO et ITT, qui sont des outils puissants pour l’évaluation des modifications métaboliques confiné co.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Souche de souris : C57BL/6J	The Jackson Laboratory	664	LFD/HFD
Accu Chek Performa - Glucomètre	Roche	6870228	OGTT/ITT
Accu Chek Performa - Bandelettes	Roche	6454038	OGTT/ITT
D-(+)-Glucose solution	Sigma-Aldrich	G8769	OGTT
Actrapid - Insuline	Novo Nordisk	417642	ITT
Aiguilles d’alimentation réutilisables	Fine Science Tools	#18061-22	OGTT ; calibre 22 (calibre -24 pour les jeunes souris)
Seringues doseuses Omnifix-Fine	Braun	9161406V	OGTT/ITT
Aiguille à insuline Sterican (30G x 1/3 » ; ø ; 0.30 x 13 mm)	Braun	304000	ITT ; souris maigres
Sterican (G 27 x 3/4 » ; ø ; 0.40 x 20 mm)  ;   ;	Braun	4657705	ITT ; souris sur
des plaques PCR HFD 96 Well, sans jupe, flexibles	Braintree Scientific, Inc.	SP0016	OGTT
Souris Ultrasensible Insuline ELISA	kit Crystam Chem	90080	OGTT
Régime pour rongeurs avec 60 % de kcal % de matières	grasses Research Diets Inc	D12492	souris sur HFD
Régime pour rongeurs avec 10 % de matières grasses.	Research Diets Inc	D12450B	souris sur LFD
BRAND micro hématocrite capillaire	Sigma-Aldrich	BR749321	OGTT/ITT
Vaseline - crème	Riviera P1768677		OGTT/ITT