Mise en place d’une Culture primaire de sarcome des tissus mous dérivé de Patient

Résumé

Le protocole suivant est axé sur la mise en place d’une culture primaire de sarcome des tissus mous dérivé de patient (STS). Ce modèle pourrait nous aider à mieux comprendre la base moléculaire et le profil pharmacologique de ces tumeurs malignes rares et pourrait constituer un point de départ pour poursuivre les recherches visant à améliorer la gestion de STS.

Résumé

Sarcomes des tissus mous (STS) représentent un éventail de malignités hétérogènes avec un diagnostic difficile, classification et gestion. A ce jour, plus de 50 sous-types histologiques de ces rares tumeurs solides ont été identifiés. Ainsi, en raison de leur extraordinaire diversité et la faible incidence, notre compréhension de la biologie de ces tumeurs est encore limitée. Dérivé de patient cultures représentent la plate-forme idéale pour étudier la pharmacologie et physiopathologie de la STS. Nous avons donc développé un humain modèle préclinique de mailles à partir de spécimens de tumeur provenant de patients devant subir une résection chirurgicale. Patient provenant des cultures de cellules STS ont été obtenues à partir de spécimens chirurgicales par digestion de collagénase et isolés par filtration. Cellules ont été comptés, épépinées et laissés pendant 14 jours dans des cultures monocouches standard et ensuite traitées par analyse en aval. Avant de procéder à des analyses moléculaires ou pharmaceutiques, la mise en place de cultures primaires STS a été confirmée par le biais de l’évaluation des caractéristiques cytomorphologic et, lorsque disponibles, les marqueurs immunohistochimiques. Cette méthode représente un outil utile 1) afin d’étudier l’histoire naturelle de ces tumeurs malignes mal explorées et 2) pour tester les effets des différentes drogues dans le but de mieux connaître leurs mécanismes d’action.

Introduction

Sarcomes des tissus mous (STS) incluent un éventail de lésions hétérogènes de la comptabilité d’origine mésenchymateuse à 1 % de toutes les tumeurs solides^1,2, et la nouvelle classification de l’Organisation mondiale de la santé reconnaît la présence de plus de 50 ³de différents sous-types. Parmi ceux-ci, les plus courantes histotypes sont sarcome d’adipocytes ou liposarcome et leiomyosarcomes, représentant 15 % et 11 % de toutes les mailles adultes, respectivement^4,5. Bien que STS peuvent développer dans différentes parties du ....

Protocole

STS cellules sont isolées d’une tumeur masse chirurgicalement excisée de patients atteints de STS. Le protocole a été approuvé par le Comité d’éthique Local et s’effectue selon des lignes directrices de bonnes pratiques cliniques et la déclaration d’Helsinki. Tous les patients ont donné le consentement éclairé pour participer à l’étude. Les spécimens chirurgicaux sont analysées par un pathologiste expérimenté sarcome et traitées dans un délai de 3 heures de chirurgie.

1. tumeur prélèvement et traitement :

1. Prélever les échantillons de tumeur à l’aide d’un pathologiste de sarcome dans un contenant d’urine stérile de 100 mL avec 50 m....

Résultats

Nous avons conçu une méthode simple pour obtenir la mise en place d’une culture primaire de sarcome des tissus mous dérivé de patient et signaler ici un exemple des résultats obtenus sur un histotype spécifique de m¹³. Le protocole a été utilisé pour la mise en place de cultures primaires de différentes mailles histotypes y compris liposarcome bien différencié, dédifférenciées production liposarcome, liposarcome, myxofibrosarcoma, indifférencié, liposarcome pléomor.......

Discussion

Les modèles précliniques bien définis sont nécessaires pour élucider le fond moléculaire des tumeurs, prédire le pronostic et élaborer de nouvelles stratégies thérapeutiques pour les patients atteints de cancer. Ceci est particulièrement important pour des tumeurs rares tels que STS dont forte hétérogénéité en termes de morphologie, un comportement agressif, clinique et potentiel défis notre compréhension de la biologie de STS et de gestion des patients²¹. Par ailleurs, les quelques lignées de cel.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
DMEM High Glucose	EuroClone	ECB7501L
Sérum fœtal bovin	EuroClone	ECS0180D
Glutamine	Gibco	25030-024
Paraformaldéhyde 4 % solution aqueuse, grade EM	Microscopie électronique Sciences	157-4-100
Pénicilline streptomycine	Gibco	15140122
Réactif de triazole	Ambion Life-Technologies	15596018
Trypsin	EuroClone	ECB3052D