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Article de méthode

Un modèle de souris d’une Obstruction intestinale partielle

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DOI :

10.3791/57381

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5 mars 2018

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* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Occlusions intestinales sont une obstruction partielle ou complète de l’intestin qui peut causer des douleurs abdominales, nausées, vomissements et empêchant le passage des selles. Cette procédure de création intestinales partielles obsructions chez la souris est fiable en étudiant les mécanismes qui sous-tendent la croissance des cellules pathologiques et la mort dans l’intestin.

Résumé

Les occlusions intestinales, qui entravent ou bloquent le mouvement péristaltique, peuvent être causées par des adhérences abdominales et plus gastro-intestinal (GI) maladies, y compris des croissances tumorales. Cependant, transformant des mécanismes cellulaires impliqués dans et causés par, occlusions intestinales sont mal comprises. Plusieurs modèles animaux d’occlusions intestinales ont été développées, mais le modèle murin est la plupart du coût/temps efficace. Le modèle de souris utilise l’implantation chirurgicale d’une obstruction intestinale partielle (PO) qui a un taux de mortalité élevé si elle n’est pas réalisée correctement. En outre, souris recevant la chirurgie PO ne se développent pas hypertrophie si un blocus approprié est employé pas ou pas correctement placé. Nous décrivons ici un protocole détaillé pour la chirurgie de PO qui produit fiables et reproductibles des occlusions intestinales avec un taux de mortalité très faible. Ce protocole utilise un anneau de silicone placé chirurgicalement qui entoure l’iléon qui bloque partiellement les mouvements digestifs dans l’intestin grêle. L’obstruction partielle rend l’intestin deviennent dilatés en raison de l’arrêt du mouvement digestive. La dilatation de l’intestin induit hypertrophie de muscle lisse du côté oral de la bague qui progressivement se développe sur deux semaines jusqu'à ce qu’elle entraîne la mort. Le modèle de souris PO chirurgical offre un modèle in vivo de tissu intestinal hypertrophique utile pour étudier les changements pathologiques des cellules intestinales, y compris les cellules musculaires lisses (SMC), cellules interstitielles de Cajal (CIC), PDGFRα+et neuronale cellules lors du développement d’une occlusion intestinale.

Introduction

Occlusions intestinales sont un blocage partiel ou complet dans l’intestin de petite ou grande, qui empêche les aliments digérés, fluides et gaz de se déplacer à travers les intestins1. En raison de l’obstruction, l’obstruction provoque la paroi intestinale pour devenir épaissi, rétrécissement de la lumière2. Une occlusion intestinale peut se produire à la suite de chirurgies abdominales ou pelviennes qui provoquent la formation de tissu d’adhérences abdominales ou de troubles gastro-intestinaux tels que les maladies inflammatoires de l’intestin (maladie de Crohn), hernies, volvulus, diverticulite, sténose, invagination ....

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Protocole

Le protocole suivant a été approuvé par le Comité utiliser (IACUC) à l’Université du Nevada-Reno (UNR) des ressources animales et d’institutionnels animalier et est conforme à toutes les directives éthiques institutionnelles relatives à l’utilisation des animaux de recherche.

1. les animaux.

  1. Obtenir des souris C57BL/6 de maturité (4-6 semaines) pesant entre 20-30 g. maison de la colonie de souris de laboratoire dans une animalerie centralisée à ressources animales de l’UNR.

2 chirurgie de l’Obstruction partielle

NOTE : Les chirurgies sont effectuées dans une salle dédiée ....

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Résultats

Obstruction partielle (PO) a été chirurgicalement induite chez les souris âgés d’un mois en plaçant un anneau de silicone autour de l’iléon à proximité du sphincter iléo-caecale. Cet anneau a créé une obstruction partielle dans l’iléon. Opérations de Sham (SO) ont aussi été réalisées sans un anneau sur l’âge et le sexe égalé souris et ces souris n’ont pas montré des symptômes similaires à ceux observés chez les souris de PO. Souris se remit rapidement d’une chirurgie PO en quelques heures.......

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Discussion

Nous avons démontré que les souris ayant reçu la chirurgie intestinale de PO systématiquement et de façon reproductible développent hypertrophie de muscle lisse intestinal, qui imite une obstruction intestinale humaine. Chirurgies de l’occlusion intestinale ont été développés pour différents animaux dont7de la souris, rats10, cobayes11, chiens chats et12 13. Le modèle murin d’obstruction intestinale a t.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Les auteurs tiennent à remercier Benjamin J Weigler, D.V.M., Ph.d. et Walt Mandeville, D.M.V. (ressources animales & Campus fréquentant vétérinaire, Université du Nevada, Reno) pour leurs excellents services animaliers a fourni aux souris ainsi que leurs avocats sur interventions chirurgicales.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Champ chirurgicalFournitures médicales et vétérinairesSMS4040" X100 yards
Underpad, econ, pro plusFournitures médicales et vétérinairesMSC28122417x24"
Ciseaux à irisBraintree scientific, IncSC-i-130
Ciseaux à irisVantageV95-304
Dumont pince à épiler électronique & bijoutierDumont98-180-3
Suture résorbable tresséeCovidien polysorbSL-5687G5-0, polyglactine
Nylon mono filament non résorbableAD chirurgicalS-N618R136-0, nylon
Lame chirurgicaleDynarexNo.15
Porte-aiguilleJacobson microvasculaire36-1342TC8,5 pouces
Manche de scalpelFlinn scientificAB1049
Ciseaux microchirurgicauxWPI503305
Pommade ophtalmique à la vaselinePuralube VET3,5 g
Fluriso (isoflurane)VetoneV1 502017250 ml
Fermeture cutanée renforcée Steri-strip3MR1547
Gants chirurgicauxMedlineMSG2270
Masque facial à boucle d’oreilleLa zone de sécuritéRS700
Éponges non tissées de gaze Avant SoinsPRM25444
Coupe chirurgicaleAdmiral  ; craft OYC-2725-A422,5 oz
d’écouvillonChloraPrep2601032 % p/v de chlorhexidine. Gluconate (CHG) et alcool isopropylique (IPA) à 70 % v/
vAplicateur à embout en cotonPuritan806-WC
BuprénorphineZoo pharmBZ80693171 mg/ml
Sulfate de gentamycineVetoneG-6336-04100 mg/ml
Gel crème décapant à action rapideVeet8111002
SeringueAHSAH01T25161 ml avec aiguille
Anneau en siliconeVWR60985-720de 6 mm de longueur, 4 mm de diamètre extérieur, 3,5 mm de diamètre intérieur
C57BL/6 sourisThe Jackson Laboratory4-6 semaines

Références

  1. Millat, B., Guillon, F. Physiopathology and principles of intensive care in intestinal obstructions. Rev Prat. 43, 667-672 (1993).
  2. Tonelli, P.

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Réimpressions et autorisations

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