Colostomie distale murin fournit un modèle murin pour la colite détournement humaine, une colite lymphocytaire principalement dans le segment du côlon exclus du flux de matières fécal.
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Article de méthode
Murine colostomie distale, un nouveau modèle de colite détournement chez les souris C57BL/6
Dans cet article
Résumé
Résumé
Colite de dérivation (DC) est une condition clinique fréquente survenant chez les patients avec des segments d’intestin exclus du flux fécal par suite d’une entérostomie détourner. L’étiologie de cette maladie reste mal définie mais semble différer de celle des maladies classiques inflammatoires de l’intestin comme la maladie de Crohn et la colite ulcéreuse. Recherches visant à décrypter les mécanismes physiopathologiques menant au développement de cette maladie a été gravement entravée par l’absence d’un modèle murin approprié. Ce protocole génère un modèle murin de DC qui facilite l’étude du rôle du système immunitaire et son interaction avec le microbiome dans le développement de DC. Dans ce modèle à l’aide de C57BL/6 animaux, parties distales du côlon sont exclus du flux de matières fécal en créant une colostomie distale, en déclenchant le développement de légère à modérée de l’inflammation dans les segments de l’intestin exclus et en reproduisant les lésions de la marque distinctive de l’homme DC avec une réponse inflammatoire systémique modérée. Contrairement au modèle de rat, il existe un grand nombre de modèles murins génétiquement modifié sur le fond de C57BL/6. La combinaison de ces animaux avec notre modèle permet les rôles possibles de différentes cytokines, chimiokines ou récepteurs de molécules bioactives (p. ex., interleukine (IL) -17 ; Il-10, chemokine CXCL13, récepteurs de chimiokines CXCR5 et CCR7 et le récepteur de la sphingosine-1-phosphate 4) à évaluer dans la pathogenèse de la DC. La disponibilité de souches congéniques de souris C57BL/6 antécédents facilite grandement les expériences de transfert afin d’établir les rôles de types cellulaires distincts impliqués dans l’étiologie du DC. Enfin, le modèle offre la possibilité d’évaluer l’influence des interventions locales (p. ex., modification du microbiome local ou un traitement anti-inflammatoire local) sur l’immunité mucosale dans les segments concernés et non concernés de l’intestin et le sur homéostasie immunitaire systémique.
Introduction
Ces dernières années, un nombre important d’entités non infectieuses colite différents de maladies inflammatoires de l’intestin classique (DBI ; i.e., ulcéreuse ou colite de Crohn) ont été caractérisés sur le plan clinique et histopathologique chez l’homme. Les mécanismes physiopathologiques menant au développement de ces formes de colite ne sont pas complètement compris partiellement parce que les modèles animaux appropriés sont rares. Colite de détournement est une de ces entités récemment décrites. Bien que le terme a été inventé en 1980 par Glotzer1, la description initiale d’un phénotype similaire a été donnée en 1972 par Morson
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Protocole
Toutes les méthodes décrites ici ont été approuvés par l’autorité vétérinaire (Landesamt für Landwirtschaft, Lebensmittelsicherheit und Fischerei Mecklenburg-Vorpommern, LALLF M-V).
1. préopératoire soins et préparation de l’Animal
- À son arrivée à l’animalerie, divise les animaux (C57Bl/6) en groupes de taille similaire, chaque groupe en cage ensemble et maintenir les groupes constante au cours des expériences.
Remarque : Utilisez des animaux du même sexe. Les résultats présentés ont été obtenus avec des souris mâles.
Remarque : Si les animaux mâles sont utilisés, les groupes de cage à partir ensemble lorsqu’ils sont âgés de 7 semaines afin qu’u....
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Résultats
La chirurgie est bien tolérée tant expérimental (colostomie) et groupes d’imposture (colotomy). La mortalité péri-opératoire ne doit pas dépasser 10 % lorsque la chirurgie et périopératoires sont correctement gérées. Dans la première semaine post-opératoire, perte de poids significative est vu dans les deux groupes expérimentaux et sham. Animaux du groupe fictif atteindre leur nadir poids habituellement vers le quatrième jour postopératoire, mais il se produit un jour plus tard dans le gr.......
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Discussion
Le modèle murin de DC présentée dans le présent protocole fiable reproduit les caractéristiques histopathologiques des DC humaine (p. ex., développement de novo des follicules lymphoïdes dans la sous-muqueuse des segments de l’inflammation de l’intestin, crypte raccourcissement et réductions nombre de cellules caliciformes). En dehors de cet avantage, ce modèle est induit par un facteur de déclenchement très similaire et présente une évolution clinique modérée à gravité légère comme c’est le cas chez le.......
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Déclarations de divulgation
Tous les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas des intérêts concurrents.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Matériel de fonctionnement | |||
| heat sous-couche, 6 watts | ThermoLux, Witte + Sutor GmbH | 461265 | |
| Éthanol 70 % (avec méthyléthylcéton) | Pharmacie de l’hôpital universitaire de Greifswald | ||
| Applicateurs en bois, petite tête en coton unilatérale, bâton en bois, longueur 150 mm | Centramed GmbH, Allemagne | 8308370 | pour la désinfection du champ d’opération |
| Ciseaux | Aesculap (BRAUN) | BC064R | |
| Pince Atraumatique DeBakey | Aesculap (BRAUN) | OC021R | |
| Porte-aiguille | Aesculap (BRAUN) | BM012R | |
| Vasofix Safety i.v. canule 22G | Braun Melsungen AG, Allemagne | 4268091S-01 | |
| VICRYL Plus 4-0 violet tressé ; V-5 17 m 1/2c ; 70 cm | ETHICON, Inc. | ||
| monofil PDS II 6-0 ; V-18 13 mm 3/8c ; 70 cm | ETHICON, Inc. | Z991H | |
| BD Plastipak 1 mL (Seringues avec aiguille avec intérieur stérile) | BD Medical | 305501 | |
| Triacid-N (N-Dodecylpropan-1,3-diamin) | ANTISEPTICA, Allemagne | 18824-01 | désinfection des instruments chirurgicaux dans le bain à ultrasons |
| Médicaments | |||
| kétamine 10 %, 100 mg/mL (chlorhydrate de kétamine) | selectavet, Dr. Otto Fischer GmbH | 9089.01.00 | 87 mg/kg i.p. |
| Xylasel, 20 mg/mL (chlorhydrate de xylazine) | selectavet, Dr. Otto Fischer GmbH | 400300.00.00 | 13 mg/kg i.p. |
| NaCl 0,9 % | Braun Melsungen AG, Allemagne | 6697366.00.00 | |
| Buprenovet 0,3 mg/mL (buprénorphine) | Bayer, Allemagne | PZN : 01498870 | 0,1 mg/kg s.c. |
| Tramal Gouttes, 100 mg/mL (chlorhydrate de tramadol) | Grü ; nenthal GmbH, Allemagne | 10116838 | 1 mg/mL d’eau potable |
| Ceftriaxon-saar 2 g (ceftriaxone) ; | Cephasaar GmbH, Allemagne | PZN : 08844252 | 25 mg/kg de poids corporel i.p. |
| metronidazole 5 mg/mL | Braun Melsungen AG, Allemagne | PZN : 05543515 | 12,5 mg/kg de poids corporel i.p. |
| >Food | |||
| ssniff M-Z Ereich | ssniff, Allemagne | ; V1184-3 | |
| Boisson Solide Dehyprev Vit BIO, sachets | TripleATrading, Pays-Bas | SDSHPV-75 | |
| Équipement | |||
| Nikon Eclipse Ci-L | Nikon Instruments Europe BV, Allemagne | Microscopie | |
| optique VetScan HM 5 ; | Abaxis, USA | 770-9000 | Analyseur d’hématologie vétérinaire de 50 µ ; l sang EDTA veineux |
| Bandelin SONOREX (Bain à ultrasons) | Bandelin electronics, Allemagne | RK 100 H | désinfection des instruments chirurgicaux |
| Software | |||
| NIS-Element BR4 software | Nikon Instruments Europe BV, Germany | ||
| GraphPad Prism Version 6 | GraphPad Software, Inc. |
Références
- Glotzer, D. J., Glick, M. E., Goldman, H. Proctitis and colitis following diversion of the fecal stream. Gastroenterology. 80, 438-441 (1981).
- Morson, B., Dawson, I. Gastrointestinal Pathology. , Blackwell Scientific Publications. London. (1972).
- Whelan, R. L., Abramson, D., Kim, D. S., Hashmi, H. F.
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Réimpressions et autorisations
